89-91 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów
89-91 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów
89-91 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
procesy relaksacji spin-sieć zachodzą w Cladosporium<br />
cladosporioides.<br />
Słowa kluczowe: wolne rodniki, flucytozyna, melanina,<br />
Cladosporium cladosporioides, EPR<br />
[Inżynieria <strong>Biomateriałów</strong>, <strong>89</strong>-<strong>91</strong>, (2009), 168-170]<br />
Wstęp<br />
Biopolimery melaninowe wykazują właściwości paramagnetyczne<br />
[1-2]. Grzyby glebowe Cladosporium cladosporioides<br />
zawierają eu- i feomelaninę [3]. Główną składową<br />
widma EPR Cl. cladosporioides jest lina eumelaniny [3].<br />
Nasze wcześniejsze prace dotyczyły wpływu pH oraz jonów<br />
metali (Cu(II), Zn(II), Cd(II)) na właściwości centrów<br />
paramagnetycznych melaniny Cl. cladosporioides [4-6].<br />
Celem niniejszej pracy jest określenie wpływu flucytozyny<br />
na koncentrację i właściwości centrów paramagnetycznych<br />
Cladosporium cladosporioides. W pracy oceniono<br />
możliwość przyszłych zastosowań melaniny Cladosporium<br />
cladosporioides w kosmetologii.<br />
materiały i metody<br />
W pracy przeprowadzono badania właściwości wolnych<br />
rodników występujących w grzybni Cladosporium cladosporioides<br />
(RyS.1). Po zakończeniu hodowli grzybnię Cladosporium<br />
cladosporioides kompleksowano z flucytozyną<br />
uzyskując kompleks 50µg flucytozyny/mg grzybni.<br />
Flucytozyna to syntetyczny lek przewiwgrzybiczy<br />
(RyS.2). Jest to pochodna pirymidyny. Prowadzi ona do zablokowania<br />
syntezy białek w komórce grzyba. Flucytozyna<br />
zaburza także syntezę DNA. Działa hamująco na Candida,<br />
Cryptococcus, Aspergillus, Phialophora i Cladosporium.<br />
Pomiary EPR wykonano za pomocą spektrometru elektronowego<br />
rezonansu paramagnetycznego na pasmo X<br />
produkcji RADIOPAN (Poznań). Wyznaczono koncentrację<br />
centrów paramagnetycznych (N) oraz następujące parametry<br />
widm EPR: współczynnik rozszczepienia spektroskopowego<br />
g, amplitudę (A) i szerokość (∆B pp) linii EPR.<br />
Wyniki i dyskusja<br />
rys.1. upigmentowane<br />
grzyby glebowe cladosporiumcladosporioides.<br />
fig.1. cladosporium cladosporioides<br />
pigmented<br />
soil fungi.<br />
Dla grzybów glebowych Cladosporium cladosporioides<br />
oraz ich kompleksów z flucytozyną rejestrowano szerokie<br />
linie EPR o wartościach współczynnika rozszczepienia<br />
spektroskopowego g charakterystycznych dla o-semichinonowych<br />
wolnych rodników. Parametry widm EPR oraz<br />
koncentracje wolnych rodników w badanych próbkach<br />
zamieszczono w TABELI 1. Wpływ mocy mikrofalowej na<br />
amplitudę (A) i szerokość (ΔB pp) linii EPR Cladosporium<br />
cladosporioides i ich kompleksów z flucytozyną porównano<br />
na RySUNKACH 3-4. Flucytozyna powoduje wzrost<br />
koncentracji wolnych rodników w melaninie Cladosporium<br />
cladosporioides (TABELA 1). Wartości współczynnika<br />
rozszczepienia spektroskopowego g 2.0037 wskazują na<br />
obecność głównie o-semichinonowych wolnych rodników w<br />
testowanych próbkach. Wolne procesy relaksacji spin-sieć<br />
zachodzą w obydwu badanych próbkach (RyS.3). Flucyto-<br />
Keywords: free radicals, flucytosine, melanin,<br />
Cladosporium cladosporioides, EPR<br />
[Engineering of Biomaterials, <strong>89</strong>-<strong>91</strong>, (2009), 168-170]<br />
introduction<br />
Melanin biopolymers reveal paramagnetic properties<br />
[1-2]. Soil fungi Cladosporium cladosporioides contain eu-<br />
i pheomelanin [3]. The main component of EPR spectrum<br />
of Cl. cladosporioides is the line of eumelanin [3]. Our<br />
earlier works described influence of pH and metal ions<br />
(Cu(II), Zn(II), Cd(II)) on properties of paramagnetic centers<br />
of Cl. cladosporioides melanin [4-6]. The aim of this<br />
work is to determine effect of flucytosine on concentration<br />
and properties of paramagnetic centers of Cladosporium<br />
cladosporioides. In this work the potential applications of<br />
melanin from Cladosporium cladosporioides in cosmetology<br />
were estimated.<br />
materials and methods<br />
In his work properties of free radicals existing in mycelium<br />
Cladosporium cladosporioides (FIG.1) were examined.<br />
Mycelium of Cladosporium cladosporioides was complexed<br />
with flucytosine and the complex of 50µg flucytosine/mg<br />
mycelium was obtained. EPR spectra of dry samples were<br />
measured.<br />
Flucytosine is a synthetic antifungal drug (FIG.2). It is<br />
the derivative of pyrimidine. This drug inhibits fungal protein<br />
synthesis. Flucytosine also inhibits fungal DNA synthesis.<br />
Flucytosine is active against Candida, Cryptococcus, Aspergillus,<br />
Phialophora and Cladosporium.<br />
EPR measurements were done by the use of an X-band<br />
electron paramagnetic resonance spectrometer produced by<br />
RADIOPAN (Poznań). Free radicals concentration (N) and<br />
the following parameters of EPR spectra: g-factor, amplitude<br />
(A), and linewidth (∆B pp) of EPR lines, were determined.<br />
results and discussion<br />
rys.2. struktura chemiczna flucytozyny<br />
[7].<br />
fig.2. chemical structure of flucytosine<br />
[7].<br />
Broad EPR lines with g-factor characteristic for osemiquinone<br />
free radicals were measured for soil fungi<br />
Cladosporium cladosporioides and their complexes with<br />
Próbka<br />
Sample<br />
Nx10 18<br />
[spin/g]<br />
∆B pp<br />
[±0.02<br />
mT]<br />
g<br />
[±0.0002]<br />
Cladosporium cladosporioides 0.6 0.37 2.0033<br />
Cladosporium cladosporioides+<br />
flucytozyna<br />
Cladosporium cladosporioides+<br />
flucytosine<br />
1.2 0.38 2.0035<br />
Tabela 1. koncentracja centrów paramagnetycznych<br />
(n), szerokość (∆b pp) linii epr oraz współczynnik<br />
rozszczepienia spektroskopowego g badanych<br />
próbek.<br />
Table 1. free radicals concentration (n), linewidths<br />
(∆b pp) and g-factor of analysed samples.<br />
169