18.02.2013 Views

89-91 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów

89-91 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów

89-91 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

procesy relaksacji spin-sieć zachodzą w Cladosporium<br />

cladosporioides.<br />

Słowa kluczowe: wolne rodniki, flucytozyna, melanina,<br />

Cladosporium cladosporioides, EPR<br />

[Inżynieria <strong>Biomateriałów</strong>, <strong>89</strong>-<strong>91</strong>, (2009), 168-170]<br />

Wstęp<br />

Biopolimery melaninowe wykazują właściwości paramagnetyczne<br />

[1-2]. Grzyby glebowe Cladosporium cladosporioides<br />

zawierają eu- i feomelaninę [3]. Główną składową<br />

widma EPR Cl. cladosporioides jest lina eumelaniny [3].<br />

Nasze wcześniejsze prace dotyczyły wpływu pH oraz jonów<br />

metali (Cu(II), Zn(II), Cd(II)) na właściwości centrów<br />

paramagnetycznych melaniny Cl. cladosporioides [4-6].<br />

Celem niniejszej pracy jest określenie wpływu flucytozyny<br />

na koncentrację i właściwości centrów paramagnetycznych<br />

Cladosporium cladosporioides. W pracy oceniono<br />

możliwość przyszłych zastosowań melaniny Cladosporium<br />

cladosporioides w kosmetologii.<br />

materiały i metody<br />

W pracy przeprowadzono badania właściwości wolnych<br />

rodników występujących w grzybni Cladosporium cladosporioides<br />

(RyS.1). Po zakończeniu hodowli grzybnię Cladosporium<br />

cladosporioides kompleksowano z flucytozyną<br />

uzyskując kompleks 50µg flucytozyny/mg grzybni.<br />

Flucytozyna to syntetyczny lek przewiwgrzybiczy<br />

(RyS.2). Jest to pochodna pirymidyny. Prowadzi ona do zablokowania<br />

syntezy białek w komórce grzyba. Flucytozyna<br />

zaburza także syntezę DNA. Działa hamująco na Candida,<br />

Cryptococcus, Aspergillus, Phialophora i Cladosporium.<br />

Pomiary EPR wykonano za pomocą spektrometru elektronowego<br />

rezonansu paramagnetycznego na pasmo X<br />

produkcji RADIOPAN (Poznań). Wyznaczono koncentrację<br />

centrów paramagnetycznych (N) oraz następujące parametry<br />

widm EPR: współczynnik rozszczepienia spektroskopowego<br />

g, amplitudę (A) i szerokość (∆B pp) linii EPR.<br />

Wyniki i dyskusja<br />

rys.1. upigmentowane<br />

grzyby glebowe cladosporiumcladosporioides.<br />

fig.1. cladosporium cladosporioides<br />

pigmented<br />

soil fungi.<br />

Dla grzybów glebowych Cladosporium cladosporioides<br />

oraz ich kompleksów z flucytozyną rejestrowano szerokie<br />

linie EPR o wartościach współczynnika rozszczepienia<br />

spektroskopowego g charakterystycznych dla o-semichinonowych<br />

wolnych rodników. Parametry widm EPR oraz<br />

koncentracje wolnych rodników w badanych próbkach<br />

zamieszczono w TABELI 1. Wpływ mocy mikrofalowej na<br />

amplitudę (A) i szerokość (ΔB pp) linii EPR Cladosporium<br />

cladosporioides i ich kompleksów z flucytozyną porównano<br />

na RySUNKACH 3-4. Flucytozyna powoduje wzrost<br />

koncentracji wolnych rodników w melaninie Cladosporium<br />

cladosporioides (TABELA 1). Wartości współczynnika<br />

rozszczepienia spektroskopowego g 2.0037 wskazują na<br />

obecność głównie o-semichinonowych wolnych rodników w<br />

testowanych próbkach. Wolne procesy relaksacji spin-sieć<br />

zachodzą w obydwu badanych próbkach (RyS.3). Flucyto-<br />

Keywords: free radicals, flucytosine, melanin,<br />

Cladosporium cladosporioides, EPR<br />

[Engineering of Biomaterials, <strong>89</strong>-<strong>91</strong>, (2009), 168-170]<br />

introduction<br />

Melanin biopolymers reveal paramagnetic properties<br />

[1-2]. Soil fungi Cladosporium cladosporioides contain eu-<br />

i pheomelanin [3]. The main component of EPR spectrum<br />

of Cl. cladosporioides is the line of eumelanin [3]. Our<br />

earlier works described influence of pH and metal ions<br />

(Cu(II), Zn(II), Cd(II)) on properties of paramagnetic centers<br />

of Cl. cladosporioides melanin [4-6]. The aim of this<br />

work is to determine effect of flucytosine on concentration<br />

and properties of paramagnetic centers of Cladosporium<br />

cladosporioides. In this work the potential applications of<br />

melanin from Cladosporium cladosporioides in cosmetology<br />

were estimated.<br />

materials and methods<br />

In his work properties of free radicals existing in mycelium<br />

Cladosporium cladosporioides (FIG.1) were examined.<br />

Mycelium of Cladosporium cladosporioides was complexed<br />

with flucytosine and the complex of 50µg flucytosine/mg<br />

mycelium was obtained. EPR spectra of dry samples were<br />

measured.<br />

Flucytosine is a synthetic antifungal drug (FIG.2). It is<br />

the derivative of pyrimidine. This drug inhibits fungal protein<br />

synthesis. Flucytosine also inhibits fungal DNA synthesis.<br />

Flucytosine is active against Candida, Cryptococcus, Aspergillus,<br />

Phialophora and Cladosporium.<br />

EPR measurements were done by the use of an X-band<br />

electron paramagnetic resonance spectrometer produced by<br />

RADIOPAN (Poznań). Free radicals concentration (N) and<br />

the following parameters of EPR spectra: g-factor, amplitude<br />

(A), and linewidth (∆B pp) of EPR lines, were determined.<br />

results and discussion<br />

rys.2. struktura chemiczna flucytozyny<br />

[7].<br />

fig.2. chemical structure of flucytosine<br />

[7].<br />

Broad EPR lines with g-factor characteristic for osemiquinone<br />

free radicals were measured for soil fungi<br />

Cladosporium cladosporioides and their complexes with<br />

Próbka<br />

Sample<br />

Nx10 18<br />

[spin/g]<br />

∆B pp<br />

[±0.02<br />

mT]<br />

g<br />

[±0.0002]<br />

Cladosporium cladosporioides 0.6 0.37 2.0033<br />

Cladosporium cladosporioides+<br />

flucytozyna<br />

Cladosporium cladosporioides+<br />

flucytosine<br />

1.2 0.38 2.0035<br />

Tabela 1. koncentracja centrów paramagnetycznych<br />

(n), szerokość (∆b pp) linii epr oraz współczynnik<br />

rozszczepienia spektroskopowego g badanych<br />

próbek.<br />

Table 1. free radicals concentration (n), linewidths<br />

(∆b pp) and g-factor of analysed samples.<br />

169

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!