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establecidos por el CLSI han sido aceptados universalmente como los métodos de
referencia para los ensayos de la actividad in vitro de los compuestos antifúngicos.
Actualmente se dispone del documento M38-A2, del CLSI (20), para trabajar en
condiciones estandarizadas con hongos filamentosos. El documento M38-A2 es un método
de referencia, para facilitar un acuerdo entre los laboratorios en la medición de
susceptibilidad de hongos filamentosos contra agentes antifúngicos.
1.5.5 Identificación molecular.
Las distintas especies de hongos filamentosos dematiáceos parecen estar en relación
íntima y son muy difíciles de distinguir entre sí. Parece ser que ningún aspecto taxonómico
dentro de la micología médica ha provocado tanto debate y controversia como los agentes
etiológicos de esta enfermedad (74). Los taxónomos han recurrido a la biología molecular
para solucionar el problema en la separación de especies estrechamente relacionadas. Sólo
un número limitado de especies pueden ser reconocidas por morfología. Son numerosas las
técnicas moleculares que se han utilizado hasta la fecha para resolver estos problemas. Los
primeros estudios fueron realizados por Kawasaki et al (48), partiendo del ADN
mitocondrial de especies identificadas morfológicamente y utilizaron la técnica de
polimorfismos en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP), para dilucidar la
diversidad de éstas especies según su origen geográfico. Otros estudios realizados por
Caligiorne et al, con hongos dematiáceos patógenos, utilizaron el ADN genómico y
amplificaron las regiones ITS, para obtener separación de grupos de hongos productores de
cromoblastomicosis y feohifomicosis mediante RFLP, y amplificación al azar de ADN
(RAPD) (16-17). Ablitz et al diseñaron iniciadores con secuencias conservadas, para una
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