Test fonctionnel de mesure des activités enzymatiques de ...

tel-00126858, version 1 - 26 Jan 2007
Etude bibliographique
b) L’étape d’incision et d’excision
Une fois que le dommage est reconnu, le complexe d’incision est alors formé
afin d’éliminer la lésion. Le facteur TFIIH est tout d’abord recruté, il est composé
notamment de deux hélicases XPB et XPD qui, en présence d’ATP, vont permettre de
dérouler la double hélice d’ADN. Cette ouverture de la double hélice permet le
recrutement des protéines nécessaires à la suite du processus de réparation. Il est
intéressant de noter que TFIIH est aussi nécessaire lors de la transcription, et que son
rôle dans la REN doit être proche de celui qu’il joue lors de l’initiation de la
transcription.
La protéine XPA rejoint alors le complexe. La suite du processus d’incision se
déroule avec le recrutement de la protéine RPA qui se fixe à XPA, et de
l’endonucléase XPG qui se positionne en 3’ de la lésion. XPC et hHR23B quittent
alors le complexe de réparation. Le duplex ERCC1 / XPF, qui tout comme XPG a une
activité endonucléase, se positionne en 5’ de la lésion. La double incision en 5’ et 3’
du dommage a ensuite lieu 21 ; cette étape est dépendante de Mg 2+ , cation nécessaire à
l’activité endonucléase de XPG. Le brin d’ADN contenant le dommage, d’une taille
d’environ trente nucléotides, est alors excisé (Figure 3).
c) L’étape de resynthèse et de ligation
Le complexe de resynthèse est composé de la polymérase réplicative ε ou δ, du
facteur de processivité PCNA, et de RFC. Le facteur RFC permet de charger PCNA
sur l’ADN qui va permettre à la polymérase de resynthétiser l’ADN excisé en prenant
comme modèle le brin complémentaire. Pour finir, la ligase I vient ligaturer la double
hélice d’ADN (Figure 2).
10