la revue internationale sur bananiers et plantains - Bioversity ...

Mesure de la virulence
de la fusariose
Développement d’une méthode pratique pour évaluer
la virulence de Fusarium oxysporum f. sp. cubense
race 1 (E.F. Smith) chez le bananier
T. Saravanan, M. Muthusamy, E.G. Ebenezar et R. Bhaskaran
La fusariose est une contrainte
majeure de la production bananière à
travers le monde (Stover 1962). Son
agent causal, Fusarium oxysporum f. sp.
cubense (Foc) est un champignon tellurique
génétiquement stable. L’identification des
souches déclenchant la fusariose reste une
gageure en raison du peu d’efficacité des
méthodes prouvant la virulence de la maladie
en conditions de serre. Toutefois, Sun et Su
(1984) ont développé une méthode d’étude
de la virulence en utilisant des vitroplants mais
la disponibilité de tels matériels pour tous les
cultivars reste un problème. C’est pourquoi,
cette étude vise à développer une méthode
pratique pour étudier la virulence de Foc race
1 chez le bananier.
Matériels et méthodes
L’expérience a été entreprise au Department
of Plant Pathology, Agricultural College
and Research Institute, Madurai, Inde. Les
champignons de la fusariose (race 1) affectant
les bananiers (cv. Rasthali) ont été collectés
à partir de bananiers poussant dans le sud
du Tamil Nadu. Des rejets montrant une
décoloration ont été utilisés pour l’isolement
de Foc. Les rejets montrant les symptômes
typiques de la maladie ont été lavés dans de
l’eau et fragmentés sur plaque stérile avec un
scalpel stérilisé dans du chlorure de mercure
à 0,1% pendant 30 sec puis rincés plusieurs
fois dans de l’eau stérile. Le milieu stérile
dextrose agar pour la pomme de terre (PDA)
supplémenté avec 100 ppm de sulfate de
streptomycine (pour éviter la contamination
bactérienne) a été versé dans des boîtes de
Pétri stériles à 15 ml par boîte et 3 fragments
végétaux stérilisés en surface ont été placés
à équidistance dans chaque boîte. Toutes les
manipulations ont été effectuées en conditions
d’asepsie. Les boîtes ont été incubées à la
température de la pièce (28± 2°C) pendant
7 jours et la croissance des champignons
a été observée. Les champignons ont été
purifiés par une technique simple d’isolement
des spores, transférant une spore unique sur
une boîte de PDA incubée à 28°C pendant
cinq jours. Les champignons ont ensuite été
multipliés dans un milieu sableux (Ricker et
Ricker 1936). Du sable fin et de la farine de
maïs ont été mélangés dans un rapport de 19:
16
1 et stérilisés à une pression de 1,4 kg/cm 2
pendant 2 h. Le milieu sableux stérilisé a été
inoculé en transférant un disque (9mm) de
la culture pathogène cultivée sur boîte PDA
dans le milieu sableux stérilisé et mélanger
pendant 1 min afin de répartir les champignons
dans tout le milieu. Toutes les manipulations
ont été effectuées en conditions d’asepsie.
Les champignons ont été incubés à la
température de la pièce (28 ± 2ºC) pendant
trois semaines. La totalité de l’inoculum
cultivé de Foc a été utilisée pour les tests
de virulence. La suspension de spores a été
préparée en ajoutant de l’eau distillée stérile
aux champignons cultivés sur PDA à 10 ml
par boîte. La boîte a été agitée délicatement
pendant cinq minutes et la suspension a été
filtrée sur un tamis. Le filtrat a été utilisé pour
l’injection du corme et le trempage des rejets
dans l’étude.
Sept traitements ont été effectués dans
l’étude:
T1 Inoculum d’isolat sur sable à 10% p/v de
terreau,
T2 Inoculum d’isolat sur sable à 15% p/v de
terreau,
T3 Injection du corme par un isolat à 3 ml/plant
+ inoculum d’isolat sur sable à 10% p/v de
terreau,
T4 Trempage des rejets pendant 30 min (106
cfu/ml) + inoculum d’isolat sur sable à 10%
p/v de terreau,
T5 Trempage des rejets pendant 30 min (106
cfu/ml),
T6 Fragments de plants infectés à 10% p/v de
terreau et
T7 Sol infecté (105 cfu/g de sol) à 10% p/v de
sol.
L’injection du corme a été effectuée en
injectant 3 ml de suspension de spores (106
cfu/ml) à la base du pseudotronc de rejets
âgés de trois mois du cv. ‘Rasthali’ en utilisant
le modèle d’injecteur pour bananiers TNAU. La
suspension était injectée dans le corme selon
un angle de 45°.
Le sol infecté a été collecté dans des
plantations de bananiers où une infection
naturelle de la fusariose avait été observée
à plus de 80%. Ce sol a été prélevé dans la
rhizosphère des plants infectés.
InfoMusa - Vol. 16 N° 1-2, Juin et décembre 2007