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Protéases à sérine type SubtilisineMutations dans le site actif. Triade catalytique• Pratiquement pas d’effet sur leKm• Rôle de la serine catalytique• Après disparition de Ser,presque plus d’effetssupplémentaires• Catalyse résiduelle aprèsdisparition de la triadecomplète :– Contacts hors site actifparticipent aussi au degré decatalyse par fixationpréférentielle de l’état detransition de la réactionK cat /K uncat K cat /K AAASer His Asp 1,9 10 10 7 10 6Ala His Asp 3,0 10 3 1.1Ala Ala Asp 2,5 10 3 0,9Ala His Ala 2,5 10 3 0,9Ala Ala Ala 2,7 10 3 1,0Ser Ala Ala 2,3 10 4 8,4Ser His Ala 2,0 10 5 385Ser Ala Asp 3,4 10 3 1,2Structure des Protéines II. 2011/2012. Chap 3
Protéases à sérine type SubtilisineMutations dans le site actifHis64Ala Kcat/Km 10 6ModélisationPossibilité compensation par His apportéepar le substratExpérience faite :Gain d’un facteur 4000Notion de catalyse assistée par le substratMutations dans le site actifAsn155Ala Kcat/Km 10 3 Implication de Asn155 dans la stabilisationde l’état de transitionReproduction ULP Strasbourg. Autorisation CFC - ParisStructure des Protéines II. 2011/2012. Chap 3
Page 1 and 2: Protéines : Structures, Fonctions1
Page 3 and 4: Les ProtéasesHydrolyse d'une liais
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Page 9 and 10: Turk Nature Reviews Drug Discovery
Page 11 and 12: Les 4 grandes classes de protéases
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Page 45 and 46: Protéases à sérine1. Généralit
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