ANALYSETECHNIEKEN IN HET LABORATORIUM. - Favv

2.1.3.4 Coliformen en Escherichia coli
Om een contaminatie aan te tonen kan men ofwel meteen de pathogene soorten opsporen of, wat
soms gemakkelijker en/of sneller is of een betere gevoeligheid oplevert, een verwante soort of groep
soorten opsporen. Die soort of groep geldt dan als een aanwijzing voor mogelijke besmetting met het
pathogeen. Coliformen en Escherichia coli zijn micro-organismen die normaal in de ingewanden van
mensen en dieren leven. Zij worden dan ook opgespoord als een aanwijzing voor fecale contaminatie.
Door deze indicatoren te bewaken kan de naleving van de hygiënenormen in de volledige keten van
de productie worden nagegaan.
2.1.3.4.1 Analyse coliformen
De procedure voor het tellen van coliformen verloopt als volgt (ISO 4832: 1991) :
• afwegen van een hoeveelheid monster, overbrengen in verdunningsvloeistof en
homogeniseren,
• eventueel aanmaken van een decimale verdunningsreeks (indien hoge waarden verwacht
worden),
• 1 ml monster of verdunning in een petriplaat brengen, er een hoeveelheid gesmolten violet
red bile lactose agar (VRBL) aan toevoegen, mengen en de bodem laten stollen. Daarna een
bijkomend laagje VRBL-agar aanbrengen om de geënte bodem af te sluiten van de lucht
(semi-anaëroob milieu) en zo de groei van sommige stoorflora te remmen.
• incuberen bij 30°C gedurende 24 uur,
• de violet- of purperkleurige kolonies met een diameter van 0,5 mm of meer tellen,
• bevestiging : selecteren van vijf kolonies van elk type en enten in lactose broth met briljant
groen, incuberen bij 30 ° C gedurende 24 uur, kolonies waarbij er gasvorming te zien is in de
Durham buisjes, worden beschouwd als coliformen
• het aantal cfu’s berekenen uit het getelde aantal kolonies, rekening houdend met de gemaakte
verdunningen.
Figuur 4.1.7 VRBL petriplaat
36