Transgene dieren

Figuur 2: Schematische weergave van de opeenvolgende stappen in transgenese door middel van micro-injectie van DNA in bevruchte eicellen van de muis (+ =
transgeen; – = niet transgeen).
Bovendien zijn ook veranderingen in het genoom gerapporteerd
zoals kleine deleties, die het gevolg zijn van het
complexe integratieproces van het transgen. In de dagelijkse
laboratoriumpraktijk worden daarom altijd een aantal
(3-5) primaire transgene muizen gemaakt door middel
van eicelinjectie, waarna in de nakomelingen de expressie
van het transgen wordt geanalyseerd. De muizen met
het gewenste expressieprofiel van het transgen worden
geselecteerd voor verder onderzoek.
Ondanks genoemde beperkingen en onzekerheden zijn
met behulp van micro-injectie in de afgelopen 25 jaar met
succes honderden verschillende transgen-constructen,
coderend voor eiwitten met zeer uiteenlopende functies
en afkomstig van allerlei diersoorten, tot expressie
gebracht gedurende bepaalde ontwikkelingsstadia van
de muis en in bepaalde celtypen en organen.
Infectie van pre-implantatie embryo’s
met retrovirale vectoren
Retrovirussen behoren tot een klasse virussen waarvan
het genoom uit RNA bestaat. Bij het infectieproces wordt
dit RNA in de levende cel gebracht, samen met een viraal
eiwit dat het RNA omzet in DNA, dat vervolgens integreert
in het genoom van de gastheercel. Met behulp van
recombinant-DNA-technologie zijn dergelijke virussen
omgebouwd tot transporteurs (virale vectoren) van genetische
informatie. Een voordeel van dit systeem is dat de
virale vector als een enkele kopie in het gastheer genoom
integreert, maar de plaats van integratie is even onbepaald
als bij micro-injectie. Een nadeel is dat slechts een
transgen van relatief geringe lengte kan worden overgebracht
door de vector. De toepassing van deze technologie
bleef tot voor kort beperkt, omdat een op dergelijke
11