Mastocitoma Canino e Leishmaniose Visceral em Cao - Qualittas

2.5 DIAGNÓSTICO
O diagnóstico da leishmaniose canina é semelhante ao diagnóstico da doença na
espécie humana, e pode ser feito com base nas características clínicas apresentadas
pelos animais, pela demonstração do parasita em punções aspirativas de órgãos
linfóides, por provas sorológicas e por meio de métodos moleculares (reação em cadeia
da polimerase – PCR) (NOLI, 1999).
Dentre as provas sorológicas, as mais empregadas atualmente são a
imunofluorescência indireta, o ELISA, a fixação de complemento e a aglutinação
direta. Estas provas geralmente apresentam alta sensibilidade e especificidade, no
entanto, podem apresentar resultados falso-positivos ou falso-negativos
(SLAPPENDEL, 1990).
O Elisa apresenta uma sensibilidade muito boa na detecção de casos de calazar,
contudo, com os antígenos atualmente empregados, pode ocorrer reações cruzadas, ou
seja, falso-positivos (NEVES, 2000).
A Reação de fixação do complemento é menos sensível, porém mais específica do
que a RIFI, não originando reações cruzadas, mas podem ocorrer soros
anticomplementares (NEVES, 2000).
A RIFI, teste indicado pelo MS para levantamentos epidemiológicos e diagnósticos
da LV canina, reúne essas características: valores elevados de sensibilidade (90-100%)
e valores menores de especificidade (80%) para amostras de soro. Adicionalmente é
conhecido que a identificação de indivíduos falsos positivos pela RIFI se deve a reações
cruzadas entre LV e duas outras importantes zoonoses: LTA e doença de Chagas
(ALVES, BEVILACQUA, 2004).
As técnicas parasitológicas possuem especificidade de 100%, no entanto, sua
sensibilidade pode ser muito baixa. A identificação de Leishmania em preparações
citológicas feitas a partir de punções aspirativas de linfonodos é rápida e fácil
(FERRER et al, 1995). As formas amastigotas são facilmente reconhecidas por sua
forma esférica a ovóide, medem de 2 a 5 μm e contêm um núcleo arredondado e um
cinetoplasto alongado (POCAI et al, 1998). O diagnóstico parasitológico é o método de
certeza e se baseia na demonstração do parasito que é abundante nos órgãos linfóides e
fígado. Na prática, a mais utilizada é a punção medular (esterno, crista ilíaca e tíbia) por
ser procedimento mais seguro e permite colheita de material para mielograma, ficando
a punção de gânglios restrita aos casos em que estes são volumosos (Leão, R. N. Q;
1997).
Recentemente, desenvolveu-se a técnica de PCR, que é uma prova diagnóstica
altamente sensível e específica, com a qual é possível identificar e ampliar
seletivamente o DNA do cinetoplasto do parasita. Infelizmente, só é possível a
realização da técnica de PCR em laboratórios especializados (NOLI, 1999). A reação
em cadeia da polimerase (PCR) permite a amplificação seletiva de seqüências do DNA
do parasito, o que conseqüentemente viabiliza um instrumento diagnóstico espécieespecífico
para doenças infecciosas (FERREIRA e ÁVILA, 2001) e, segundo Rey
(2001), mostra-se muito sensível para detectar casos incipientes de leishmaniose. A
PCR pode ser feita com o DNA extraído da medula óssea, biopsias cutâneas, aspirados
de linfonodos, sangue, cortes histológicos de tecidos parafinados e também no vetor
(GREENE, 2006; FERRER, 1999). Ferreira e Ávila (2001) afirmam que a técnica da
PCR é bem eficiente para detectar os estágios iniciais de infecções, enquanto as
técnicas sorológicas são mais eficazes para diagnosticar estágios avançados. Por este
motivo, os autores acreditam ser possível que a PCR venha a se constituir num método
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