Genetik Ders Notları 1998 - Akademik Bilgi Sistemi - Kafkas ...

Şekil 3. Drozofila dişi ve erkeğinde kromozom yapıları
Kromozom üretim tekniğidir. Bu tekniğin ana ilkeleri ve uygulanışı aşağıda verilmiştir.
1. Söz konusu teknikte kromozomları incelenecek hücreler lenfositlerdir.
2. Sistemin temel materyali aktif bölünme devresine girmiş hücrelerdir. Bunu
saptamak için % 20 sığır fötus serumu ile zenginleştirilmiş sentetik besi yerleri (TC-
Medium199, RPMT–1640. Eagle, Early's v.s.) kullanılır. Steril şartlara rağmen herhangi
bir şekilde mikrobik bulaşma olasılığına karşı antibiyotik. (penisilin 100 IÜ/cm3 veya
streptomisin 100 mg/cm 3 gibi) ve mitozu uyarıcı olarak PHA(Phyte Hasa Agglutinin)
katılarak hazırlanan besi yerine, lenfosit ekimi yapılır. Kan alırken enjektörün 0.1–0.2 cc
heparinle bulaştırılmış olması gerekir (Aksi halde kan pıhtılaşır). 5–10 cc periferik kan 10
dakika 400 rpm (devir) de santrifüj edilerek eritrositlerin çökmesi sağlanır. Üstteki
plâzmadan 1–2 cc hazırlanan besi yerine katılır. Hafifçe çalkalanır. Ekim işlemi
böylece tamamlanmış olur. Üreme işleminin gerçekleşmesi için bu ekilmiş ünitelerin
ilgili türün beden ısısında (insan da 37 ° C) etüvde bekletilmesi gerekir.
Şekil 4. Kromozomların morfolojik yapıları.
9