17.10.2014 Views

doplnok - Ústredný kontrolný a skúšobný ústav poľnohospodársky

doplnok - Ústredný kontrolný a skúšobný ústav poľnohospodársky

doplnok - Ústredný kontrolný a skúšobný ústav poľnohospodársky

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Stanovenie pridaného lyzín hydrochloridu<br />

Príloha č. 19<br />

1. Predmet metódy<br />

Táto metóda skúšania krmiva sa vzťahuje na stanovenie pridaného lyzín hydrochloridu<br />

v premixoch doplnkových látok metódou kapilárnej izotachoforézy.<br />

Lyzín je esenciálna aminokyselina, chemicky kyselina 2, 6 - diaminokaprónová a na<br />

kŕmne účely sa používa ako lyzín hydrochlorid; sumárny vzorec C6H15O2N2 Cl.<br />

2. Podstata metódy<br />

Lyzín hydrochlorid sa stanoví na základe rozdielnej pohyblivosti iónov v elektrickom poli<br />

metódou kapilárnej izotachoforézy.<br />

3. Chemikálie a skúšobné pomôcky<br />

3.1. izotachoforetický analyzátor s príslušenstvom, a to registračné zariadenie alebo<br />

tlačiareň a datastanica s vyhodnocovacím softwarom;<br />

3.2. trepačka;<br />

3.3. pH meter;<br />

3.4. lyzín hydrochlorid, štandard, o známej účinnosti;<br />

3.5. lyzín hydrochlorid, základný štandardný roztok, ktorý sa pripravuje tak, že sa do<br />

odmernej banky o objeme 100 ml naváži presne 0,3000 g štandardu lyzín<br />

hydrochloridu o 100 % účinnosti alebo prepočítané množstvo o nižšej účinnosti,<br />

rozpustí sa v redestilovanej vode, doplní sa redestilovanou vodou po značku a premieša<br />

sa. Základný štandardný roztok obsahuje 3 mg lyzín hydrochloridu v jednom<br />

ml a uchováva sa v chladničke. Tento roztok je stály jeden týždeň;<br />

3.6. lyzín hydrochlorid, pracovný štandardný roztok, ktorý sa pripravuje zo základného<br />

štandardného roztoku lyzín hydrochloridu rozriedením tak, aby jeden ml pracovného<br />

štandardného roztoku obsahoval asi také množstvo lyzín hydrochloridu<br />

ako jeden ml roztoku vzorky krmiva. Pripravuje sa vždy čerstvý;<br />

3.7. vodiaci elektrolyt pripravený z octanu draselného, c ( CH 3 COOK) = 0,005 mol/l;<br />

3.8. koncový elektrolyt, roztok, pripravený z izotermicky predestilovanej kyseliny<br />

octovej, c(CH 3 COOH) = 0,01 mol/l.<br />

4. Pracovný postup<br />

4.1. Stanovenie kalibračnej krivky<br />

Pomocou dávkovacieho kohúta sa do predseparačnej kolóny ITP prístroja dávkuje<br />

príslušné množstvo pracovného štandardného roztoku a analyzuje sa na<br />

predseparačnej kolóne pri intenzite prúdu 200 μA technikou ITP za rovnakých<br />

podmienok pri kalibrácii i pri analýze roztoku vzorky. Z derivačného záznamu pre<br />

pracovný štandardný roztok i roztok vzorky sa odmeria dĺžka zóny lyzín<br />

hydrochloridu ako vzdialenosť vrcholov príslušných píkov v smere časovej osi.<br />

4.2. Vlastné stanovenie lyzín hydrochloridu<br />

Do kužeľovej banky o objeme 250 ml sa naváži na presnosť 0,001 g také množstvo<br />

vzorky krmiva, aby navážka obsahovala asi 400 mg lyzín hydrochloridu, pridá sa<br />

77

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!