doplnok - Ústredný kontrolný a skúšobný ústav poľnohospodársky
doplnok - Ústredný kontrolný a skúšobný ústav poľnohospodársky
doplnok - Ústredný kontrolný a skúšobný ústav poľnohospodársky
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Stanovenie pridaného lyzín hydrochloridu<br />
Príloha č. 19<br />
1. Predmet metódy<br />
Táto metóda skúšania krmiva sa vzťahuje na stanovenie pridaného lyzín hydrochloridu<br />
v premixoch doplnkových látok metódou kapilárnej izotachoforézy.<br />
Lyzín je esenciálna aminokyselina, chemicky kyselina 2, 6 - diaminokaprónová a na<br />
kŕmne účely sa používa ako lyzín hydrochlorid; sumárny vzorec C6H15O2N2 Cl.<br />
2. Podstata metódy<br />
Lyzín hydrochlorid sa stanoví na základe rozdielnej pohyblivosti iónov v elektrickom poli<br />
metódou kapilárnej izotachoforézy.<br />
3. Chemikálie a skúšobné pomôcky<br />
3.1. izotachoforetický analyzátor s príslušenstvom, a to registračné zariadenie alebo<br />
tlačiareň a datastanica s vyhodnocovacím softwarom;<br />
3.2. trepačka;<br />
3.3. pH meter;<br />
3.4. lyzín hydrochlorid, štandard, o známej účinnosti;<br />
3.5. lyzín hydrochlorid, základný štandardný roztok, ktorý sa pripravuje tak, že sa do<br />
odmernej banky o objeme 100 ml naváži presne 0,3000 g štandardu lyzín<br />
hydrochloridu o 100 % účinnosti alebo prepočítané množstvo o nižšej účinnosti,<br />
rozpustí sa v redestilovanej vode, doplní sa redestilovanou vodou po značku a premieša<br />
sa. Základný štandardný roztok obsahuje 3 mg lyzín hydrochloridu v jednom<br />
ml a uchováva sa v chladničke. Tento roztok je stály jeden týždeň;<br />
3.6. lyzín hydrochlorid, pracovný štandardný roztok, ktorý sa pripravuje zo základného<br />
štandardného roztoku lyzín hydrochloridu rozriedením tak, aby jeden ml pracovného<br />
štandardného roztoku obsahoval asi také množstvo lyzín hydrochloridu<br />
ako jeden ml roztoku vzorky krmiva. Pripravuje sa vždy čerstvý;<br />
3.7. vodiaci elektrolyt pripravený z octanu draselného, c ( CH 3 COOK) = 0,005 mol/l;<br />
3.8. koncový elektrolyt, roztok, pripravený z izotermicky predestilovanej kyseliny<br />
octovej, c(CH 3 COOH) = 0,01 mol/l.<br />
4. Pracovný postup<br />
4.1. Stanovenie kalibračnej krivky<br />
Pomocou dávkovacieho kohúta sa do predseparačnej kolóny ITP prístroja dávkuje<br />
príslušné množstvo pracovného štandardného roztoku a analyzuje sa na<br />
predseparačnej kolóne pri intenzite prúdu 200 μA technikou ITP za rovnakých<br />
podmienok pri kalibrácii i pri analýze roztoku vzorky. Z derivačného záznamu pre<br />
pracovný štandardný roztok i roztok vzorky sa odmeria dĺžka zóny lyzín<br />
hydrochloridu ako vzdialenosť vrcholov príslušných píkov v smere časovej osi.<br />
4.2. Vlastné stanovenie lyzín hydrochloridu<br />
Do kužeľovej banky o objeme 250 ml sa naváži na presnosť 0,001 g také množstvo<br />
vzorky krmiva, aby navážka obsahovala asi 400 mg lyzín hydrochloridu, pridá sa<br />
77