More documents

Recommendations

Info

в стенках, – формируется эмфизема легких. Возникает обструктивный синдром, в основе которого лежит нарушение равновесия эластического натяжения между легочной паренхимой и бронхами. Вместе с тем на всех этапах развития воспаления высвобождаются антимедиаторы, предупреждающие избыточное накопление медиаторов воспаления. Соотношение медиаторов и антимедиаторов во многом определяет формирование и индивидуальные особенности течения воспаления. В группе антипротеиназ – альфа-1-ингибитор протеиназ, альфа-2-макроглобулин, альфа-1-антихимотрипсин, тканевые ингибиторы металлопротеиназ и др. Система ингибитора протеиназ регулируется несколькими генами и в зависимости от их соотношения в одних случаях может в большей степени страдать антипротеиназная система, в других – имеется наследственно обусловленное увеличение синтеза лейкоцитарной эластазы, коллагеназы, катепсина В, G и др. Генетический полиморфизм протеолитических ферментов на сегодняшний день остается неизученным. Анализ данных последних лет позволил сформировать современные представления о физиологической и патогенетической роли общего и ограниченного протеолиза и определить важность оценки активности протеиназ и их ингибиторов для клинической практики при заболеваниях воспалительной природы, доказана несомненная связь дефицита альфа-1-ингибитора протеиназ с ранним возникновением хронического обструктивного бронхита и эмфиземы, показана важная роль системы «протеиназы-ингибиторы» в развитии профессиональных заболеваний органов дыхания. Однако, несмотря на многочисленные исследования системы «протеолизантипротеолиз», данные являются неоднозначными и порой противоречивыми, что затрудняет интерпретацию результатов в каждом конкретном клиническом случае. Эпидемиологические данные свидетельствуют, что 90% от всех генетических вариантов ZZ не идентифицируются при рутинном обследовании этого белка в крови. Это свидетельствует о необходимости внедрения в клинику медицины труда комплексных исследований протеиназно-ингибиторной системы на молекулярно-генетическом и биохимическом уровнях с исследованием количества и активности протеолитических ферментов и их ингибиторов, с определением гипосекреторных мутаций гена ингибитора протеиназ методом ДНК-диагностики. Методы определения ингибитора протеиназ В связи с этим были проанализированы все имеющиеся методы генотипирования альфа-1-ингибитора протеиназ, изо электрофокусирование в полиакриламидном геле, определение мутаций гена альфа-1-ингибитора протеиназ методом полимеразной цепной реакции с последующим рестриктазным расщеплением. Был проведен литературный поиск данных о нуклеотидной последовательности M atsc (общий) A M M N atsn (норма) atsm (мутация) гена, кодирующего альфа-1-ингибитор протеиназ и об аминокислотной последовательности белка – продукта данного гена, затем подобраны праймеры, отработаны условия амплификации и разработана тест-система на выявление наиболее распространенных мутаций в Z и S аллелях с точковыми аминокислотными заменами методом полимеразной цепной реакции (патент на изобретение от 02.04.2002 №2218094 Способ определения риска развития фиброзных изменений в легких и в печени). Данная тест-система внедрена в клинике НИИ медицины труда РАМН. Электрофореграмма продуктов ПЦР представлена на рисунке 1. Во всех случаях дорожка М соответствует анализу мутации, дорожка N – анализу нормы. Цифры справа указывают длину продуктов в н.п. Сигнал маркерного гена виден как фрагмент длиной 429 н.п., сигналы по точке Z – 245 н.п., сигналы по точке S – 146 н.п. 730 867 1100 1337 звенья по HSA1ATZ, AC J02619 мутация S A 867 –>T 867 Glu 264 –>Val 264 M B Рис. 1. Электрофореграмма продуктов ПЦР при определении S и Z мутаций у четырех пациентов A, B, C и D atzn (норма) atzm (мутация) мутация Z G 1100 –>A 1100 Glu 342 –>Lys 342 Рис. 2. Схема расположения в гене α1-ИП нуклеотидных замен, приводящих к S и Z мутациям, и праймеров (обозначены стрелками) для их выявления методом аллель-специфичной ПЦР N Г Е Н О Т И П P I M Z M C M Z N M D Z Z N 429 245 146 atzc (общий) Наличие во всех пробах сигнала маркерного гена подтверждает эффективность выделения ДНК и ПЦР. Сигналы аллель-специфичной ПЦР показывают, что у пациента D нуклеотидные звенья в точках Z и S соответствуют норме, пациенты С и В гетерозиготны по Z и имеют норму по S, пациент А гомозиготен по Z и имеет норму по S. 2 8 М е д и ц и н а т р у д а и в о с с т а н о в и т е л ь н а я м е д и ц и н а
Схема расположения в гене альфа-1-ингибитора протеиназ нуклеотидных замен, приводящих к S и Z мутациям, представлена на рисунке 2. Предполагается, что варианты РI*S и РI*Z содержат меньшее количество сиаловой кислоты, чем варианты РI*М (нормальный аллель, при котором активность ингибитора принята за 100%). С другой стороны, показано, что недостаток сиаловой кислоты в молекуле тормозит его Таблица 1. Распределение частот генотипов гена GSTM1 у больных профессиональными заболеваниями органов дыхания и в контрольной группе Группы (n) БЛППГ (77 человек) БЛПНГ (29 человек) Контрольная группа (297 человек) *р < 0,05 секрецию гепатоцитами и ускоряет выведение из плазмы. Эти структурные особенности обусловливают разный уровень альфа-1-ингибитора протеиназ в сыворотке крови лиц с различными фенотипами. Тест-система для обнаружения мутаций гена a1-ИП имеет ряд преимуществ. Применение метода ДНК-диагностики (аллель-специфичной ПЦР) позволяет проводить доклиническую диагностику. Он обладает высокой чувствительностью и специфичностью, автоматизацией исполнения. Однократность проведения теста у обследуемых, возможность проведения скрининга позволяют рекомендовать его для широкого практического применения в медицине труда при проведении предварительных и периодических медицинских осмотров. Таким образом, биохимическую диагностику целесообразно дополнять молекулярно-генетической, которая, обладая более широкими возможностями, одновременно является и более экономичной. Следует подчеркнуть, что указанные выше методы исследования являются необходимыми для выявления индивидуального риска развития бронхолегочной патологии не только в клинике медицины труда, но активно используются в общей пульмонологии и в педиатрии. Частоты генотипов GSTM1 +/+ GSTM1 0/0 в абсолютных единицах В % в абсолютных единицах В % Таблица 2. Характеристика состояния больных в зависимости от генотипа GSTM1 Диагноз Частоты GSTM1 0/0 30 39,0 47 61,0 0,6104* 11 37,9 18 62,1 0,6207 158 53,2 139 46,8 0,4680 Генотип GSTM1 +/+ (42 человека) в абсолютных единицах в % Генотип GSTM1 0/0 (64 человека) в абсолютных единицах Гипоксемия II, III ст. 12* 28,6 35* 54,7 Дыхательная недостаточность II,II ст. в % 24 57,1 46 71,9 Туберкулез 2 4,8 10 15,6 Пороки развития бронхолегочной системы Заболевания верхних дыхательных путей 7 16,7 16 25,0 23 54,8 25 39,1 Эмфизема легких 31 73,8 53 82,8 * р < 0,01 Результаты исследований системы «протеолиз-антипротеолиз» В группе больных профессиональными заболеваниями легких от воздействия промышленных аэрозолей дефицитные генотипы установлены в 5% случаев, среди больных бронхолегочными заболеваниями непрофессионального генеза – в 10% случаев. Более низкая встречаемость дефицитных вариантов белка у больных профессиональной патологией объясняется элиминацией лиц с подобным генетическим дефектом в начале профессиональной деятельности в связи с развитием заболеваний органов дыхания с тяжелым клиническим течением. Сопоставление результатов генетического полиморфизма a1-ИП с клиническими проявлениями показало, что наличие гомозиготного дефицитного варианта (ZZ) гена a1-ИП характеризуется формированием быстро прогрессирующего, хронического профессионального бронхита тяжелого течения даже при небольшом (5–7 лет) стаже работы в условиях воздействия промышленных аэрозолей, незначительно превышающих ПДК. Система ингибитора протеиназ регулируется несколькими генами и в зависимости от их соотношения в одних случаях может в большей степени страдать антипротеиназная система, в других – имеется наследственно обусловленное увеличение синтеза лейкоцитарной эластазы, коллагеназы, катепсина В, G и др. Генетический полиморфизм протеолитических ферментов на сегодняшний день остается неизученным. Комплексные исследования по определению активности протеиназ (эластазы, катепсина G) и генетического полиморфизма альфа-1-ингибитора протеиназ позволили выявить выраженный дисбаланс в системе «протеолиз-антипротеолиз» у больных профессиональными заболеваниями органов дыхания. Следует отметить, что высокие уровни протеолитических ферментов у больных профессиональными заболеваниями бронхолегочной системы в сравнении с больными заболеваниями органов дыхания непрофессионального генеза, даже при отсутствии генетически детерминированного дефицита альфа-1-ингибитора протеиназ и достаточно высоких или нормальных количественных уровнях данного белка, способствуют развитию декомпенсации системы «протеолиз-антипротеолиз», что приводит к повреждению компонентов паренхимы легких и развитию патологии. В связи с этим нами разработаны критерии оценки биологического баланса в системе «протеиназы-ингибиторы», которые могут служить маркерами воспалительных и деструктивных процессов в легочной ткани, критериями воздействия промышленных аэрозолей на течение патологического процесса и индивидуального риска развития профессиональных заболеваний органов дыхания. При исследовании генетического полиморфизма α1-ИП обращает на себя внимание группа больных профессиональной бронхиальной астмой, в которой наблюдается наибольшая встречаемость гетерозиготных дефицитных вариантов PI MZ – 10,8%, при этом в группе больных непрофессиональной бронхолегочной патологией обнаружен один случай гетерозиготного фенотипа – 4,8%. В группе здо- С О В Р Е М Е Н Н Ы Е М Е Д И Ц И Н С К И Е Т Е Х Н О Л О Г И И . И Ю Н Ь 2 0 1 0 2 9
Page 1 and 2: Редакционный совет
Page 3 and 4: 55 Коррекция артери
Page 5 and 6: ТЕМА ПЕРВАЯ Вопрос
Page 7 and 8: ря 2002 года, с учетом
Page 9 and 10: Здравоохранение В 2
Page 11 and 12: ская, Астраханская,
Page 13 and 14: гах, кроме Северо-З
Page 15 and 16: И самое главное. Со
Page 17 and 18: Однако следует отм
Page 19 and 20: Впервые врачебное
Page 21 and 22: нирует восемь цент
Page 23 and 24: все чаще использую
Page 25 and 26: и бальнеопроцедур.
Page 27: ющая центральные п
Page 31 and 32: День здорового сер
Page 33 and 34: Таблица 1. Показате
Page 35 and 36: Здоровый донор Ате
Page 37 and 38: менения в системе г
Page 39 and 40: не в больницах, а в
Page 41 and 42: В зарубежных иссле
Page 43 and 44: Параллельно осущес
Page 45 and 46: рых затруднительна
Page 47 and 48: центр клинической
Page 49 and 50: МУНИЦИПАЛЬНОЕ ЛЕЧЕ
Page 51 and 52: Однако, по мнению м
Page 53 and 54: вительные мероприя
Page 55 and 56: Наталья Амосова за
Page 57 and 58: способен увеличива
Page 59 and 60: менение ингибиторо
Page 61 and 62: нию работоспособно
Page 63 and 64: данной категории п
Page 65 and 66: Россия Румыния Шве
Page 67: но более плоским, д
Page 70 and 71: ЗАНЕСЕНИЕ АНКЕТНЫХ
Page 72 and 73: ОСМОТР ЛЕЧАЩЕГО ВР
Page 74 and 75: Александр Голиусов
Page 76 and 77: Игорь Бакулин заве
Page 78 and 79:
Изменения концентр
Page 80 and 81:
Приоритеты борьбы
Page 82 and 83:
тактах связан с тем
Page 84 and 85:
Основные направлен
Page 86 and 87:
тоянно неработающи
Page 88 and 89:
Терапия стволовыми
Page 90 and 91:
Современные методы
Page 92 and 93:
9 2 Р А З Д Е Л . . .
Page 94 and 95:
Геннадий Сухих дир
Page 96 and 97:
Михаил Сергеев гла
Page 98 and 99:
Виктор Тутельян ди
Page 100 and 101:
Международный томо
Page 102 and 103:
Сергей Харченков д
Page 104 and 105:
Юрий Кошелев генер
Page 106 and 107:
Влияние криотерапи
Page 108 and 109:
Преимуществом данн
Page 110 and 111:
Саид Яхихажиев зас
Page 112 and 113:
Здравоохранение Гу
Page 114 and 115:
Ольга Костина глав
Page 116 and 117:
V Всероссийская нау
Page 118 and 119:
Резолюция V юбилейн
Page 120 and 121:
Решение проблемы н
Page 122 and 123:
Борьба против стар
Page 124:
ИНФОРМАЦИОННО-АНАЛ
show all

ÐÑÑÐ½Ð°Ð» Â«Ð¡Ð¾Ð²ÑÐµÐ¼ÐµÐ½Ð½ÑÐµ Ð¼ÐµÐ´Ð¸ÑÐ¸Ð½ÑÐºÐ¸Ðµ ÑÐµÑ Ð½Ð¾Ð»Ð¾Ð³Ð¸Ð¸ - Ð¦ÐµÐ½ÑÑ ...

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?

ÐÑÑÐ½Ð°Ð» Â«Ð¡Ð¾Ð²ÑÐµÐ¼ÐµÐ½Ð½ÑÐµ Ð¼ÐµÐ´Ð¸ÑÐ¸Ð½ÑÐºÐ¸Ðµ ÑÐµÑÐ½Ð¾Ð»Ð¾Ð³Ð¸Ð¸ - Ð¦ÐµÐ½ÑÑ ...