Inimese embrüonaalsete tüvirakkude kasvatamine maatriksitel ning ...

Sisukord
Kasutatud lühendid .....................................................................................................4
Sissejuhatus ..................................................................................................................6
I Kirjanduse ülevaade
1. Rakuväline maatriks. Selle ehitus ja komponendid ...........................................7
1.1. Rakuväline maatriks ja basaalmembraan. Üldine ehitus ..................................7
1.2. Rakuvälise maatriksi komponendid, mis ei kuulu basaalmembraani
koosseisu.........................................................................................................8
1.2.1. Fibronektiin..............................................................................................8
1.2.2. Vitronektiin..............................................................................................8
1.3. Basaalmembraani olulisimad komponendid ja nende retseptorid. ...................9
1.3.1. Laminiinid................................................................................................9
1.3.1.1. Laminiinide struktuur .....................................................................9
1.3.1.2. Laminiinide ekspressioon kudedes. ..............................................11
1.3.1.3. Laminiinidele seonduvad molekulid.............................................11
1.3.2. Kollageen ...............................................................................................12
1.3.3. Nidogeen................................................................................................13
1.3.4. Proteoglükaanid ja glükoosaminoglükaanid..........................................13
1.3.5. Integriinid...............................................................................................14
1.3.6. Düstroglükaan........................................................................................15
2. Embrüonaalseid tüvirakke ümbritsev rakuväline maatriks ...........................16
2.1.Basaalmembraanid varajases embrüos ja embrüoidkehades ...........................16
2.2.Rakuvälise maatriksi valgud ning neile vastavad retseptorid hiire embrüos,
embrüoidkehades ja hESC-des .......................................................................17
2.2.1 Laminiinide ekspressioon hiire embrüos, embrüoidkehades ja
hESC-des ................................................................................................17
2.2.1.1. Laminiinide ekspressioon hiire embrüos ......................................18
2.2.1.2. Laminiinide ekspressioon hiire embrüoidkehades........................18
2.2.1.3. Laminiinide eksrpressioon hESC-des...........................................18
2.2.2. Düstroglükaani ekspressioon hiire embrüos ja embrüoidkehades.........19
2.2.3. Integriinide ekspressioon hiire embrüos, embrüoidkehas ja hESC-des.19
2.2.3.1.Integriinide ekspressioon hiire embrüos ja embrüoidkehades.......19
2.2.3.2. Integriinide ekspressioon hESC-des .............................................20
2.2.4.Nidogeeni ekspressioon hiire embrüotes ja embrüoidkehades...............20
2.2.5.Kollageenide ekspressioon hiire embrüos, embrüoidkehades
ja hESC-des.............................................................................................20
2.2.6.Fibronektiini ekspressioon hiire embrüotes ja hESC-des.......................21
3. hESC-de koekultuuris kasvatamine...................................................................22
3.1.hESC-de toiterakkudel kasvatamine................................................................22
3.1.1.hESC-de hiire embrüonaalsetel fibroblastidel kasvatamine ...................22
3.1.2.hESC-de inimese rakkudel kasvatamine.................................................22
3.1.2.1. hESC-de inimese fibroblastidel kasvatamine ...............................22
3.1.2.2. hESC-de autogeensetel fibroblastidel kasvatamine......................24
3.1.2.3. hESC-de inimeserakkudel (v.a. fibroblastid) kasvatamine...........25
3.2. hESC-de ilma toiterakkudeta kasvatamine.....................................................25
3.2.1.hESC-de rakuvälise maatriksi komponentidel kasvatamine...................25
3.2.1.1. hESC-de Matrigelil kasvatamine ..................................................26
3.2.1.2. hESC-de inimese rakuvälise maatriksi valkude kombinatsioonil
kasvatamine ...................................................................................26
3.2.1.3.hESC-de inimese rakuvälise maatriksi valkudel kasvatamine.......27
3.2.1.3.1. hESC-de fibronektiinil kasvatamine..................................27
2