Graduiertenkolleg 592 Lymphozyten - DFG-Graduiertenkolleg 1660

len. Dazu werden aus Buffy Coats zunächst PBMC und anschließend über MACS reine CD4 +
T-Zellen gewonnen. Die Optimierung der Lyse- und Elektrophoresebedingungen für die 2D-
Proteingelektrophorese kann mit CD4 + T-Zellen durchgeführt werden. Sind diese Bedingungen
etabliert, werden CD4 + T-Zellen in vitro zu Th1- bzw Th2-Zellen differenziert und mittels
2D-Proteingelektrophorese und Massenspektroskopie unterschiedliche Proteine identifiziert.
Die Befunde werden mittels unabhängiger Techniken wie z.B. Westernblot oder funktioneller
Tests überprüft.
Im Rahmen der Doktorarbeit der derzeitigen Kollegiatin Annette Breuer konnten wir
zum ersten Mal zeigen, daß Mastzellprodukte wie Histamin und Prostaglandin D 2 in der Lage
sind, die Bildung von Chemokinen in residenten Zellen der Lunge („smooth muscle cells“ und
Epithelzellen) zu induzieren. In einer weiterführenden Doktorarbeit soll nun zunächst in vitro
mit Hilfe von Chemotaxisassays die Wanderung von Eosinophilen und T-Zellen untersucht
werden. Hiermit sollt festgestellt werden, in wieweit diese, von residenten Lungenzellen produzierten
Chemokine für die Wanderung von Zellen eine Rolle spielen. Dazu werden Überstände
von Histamin bzw. PGD 2 behandelten residenten Lungenzellen gesammelt. In „Transwell-Chambers“
wird insbesondere die Wanderung von Th2-Zellen in Abhängigkeit der konditionierten
Überstände untersucht. Diese Zellen entscheidend für die Pathogenese der späten
und chronischen Phase des Asthma sind. Im zweiten Teil dieser Doktorarbeit sollen diese
Befunde im Tiermodell der Spätphasen-Eosinophilie in Mäusen vertieft werden. Zunächst
wird untersucht, welche Chemokine in der bronchoalveolären Lavage in Abhängigkeit von
der Sensibilisierung und der Provokation zu finden sind. Im weiteren wird die Produktion der
Chemokine in Abhängigkeit vom genetischen Hintergrund (z.B. Prostaglandin D 2 Rezeptor
knockout Maus) analysiert.
Alle für diese Arbeiten benötigten Materialien inklusive der Zellen sind im Labor vorhanden,
alle benötigten Techniken sind etabliert.
Eigene, für das Projekt relevante Publikationen (Auswahl):
1. Andreas Pahl, Meixia Zhang, Hildegard Kuss, Istvan Szelenyi and Kay Brune. (2002). Regulation of IL-
13 synthesis in human lymphocytes: Implications for asthma therapy. Br.J.Pharmacol.. in press.
2. Andreas Pahl, Meixia Zhang, Katalin Török, Hildegard Kuss, Ute Friedrich, Zoltan Magyar, Jozsef Szekely,
Katalin Horvath, Istvan Szelenyi and Kay Brune. (2002). Anti-inflammatory effects of a cyclosporine
receptor binding compound, D-43787. J.Pharm.Exp.Ther. in press.
3. Lohoff, M., Duncan, G.S., Ferrick, D., Mittrucker, H.W., Bischof, S., Prechtl, S., Rollinghoff, M., Schmitt,
E., Pahl, A. und Mak, T.W. (2000). Deficiency in the transcription factor interferon regulatory factor
(IRF)-2 leads to severely compromised development of natural killer and T helper type 1 cells. J Exp Med
192, 325-36.
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• GRK 592: Lymphozyten - Differenzierung, Aktivierung und Deviation •