Graduiertenkolleg 592 Lymphozyten - DFG-Graduiertenkolleg 1660

Rahmen Ihrer vom Graduiertenkolleg geförderten Promotion hat Frau Kießler die intrazelluläre
Durchfluss-Zytometrie für die genannten Moleküle etabliert und erarbeitet derzeit die Bedingungen
für die Light Cycler PCR.
Funktionelle Bedeutung von NK-Zellen bei der Immunabwehr gegen M. tuberculosis. Mittels
51 Chromium Freisetzungs Test wird untersucht, ob NK Zellen Makrophagen lysieren, die mit
virulenten M. tuberculosis infiziert sind. Nach Koninkubation von NK-Zellen und infizierten
Makrophagen wird auch die Freisetzung von Zytokinen (IFN-γ, TNF) bestimmt. Die Zytokin-sezernierenden
Zellen werden durch Fluoreszenz-Mehrfachfärbung (intrazelluläre Zytokin-Färbung
+ Oberflächenfärbung) näher charakterisiert. Die funktionelle Bedeutung dieser
Effektormechanismen wird bestimmt, indem das Überleben der intrazellulären Bakterien mittels
Plattierung von Zell-Lysaten gemessen wird.
Zur Untersuchung des Vorkommens von NK-Zellen steht uns Resektionsmaterial von Lungentuberkulose
Patienten aus Erlangen (Dr. Faller, Institut für Pathologie), China (Prof. Dong
Shou, Chengdu University) und Südafrika (Dr. Frank Post, Groote Schoor Hospital, Capetown)
zur Verfügung. Da die Infektiosität des Gewebes den Einsatz der technisch weniger
aufwendigen Gefrierschnitt-Technik verbietet, wurde die Färbung an Formalin-fixiertem Gewebe
etabliert. Zur Detektion von NK-Zellen in Lungengranulomen wird eine klassische
Immunhistologie mit Peroxidase/Aminoethylcarbazol durchgeführt. Zur Charakterisierung
der NK-Zellen in situ wurde eine Mehrfachfärbung mittels konfokaler Lasermikroskopie etabliert,
die eine simultane Detektion von NK-Zellen und antibakteriellen Effektormolekülen
oder Zytokinen erlaubt.
Eigene, für das Projekt relevante Publikationen (Auswahl):
Engele, M., Stößel, E., Castiglione, K., Schwerdtner, N., Wagner, M., Bölcskei, P., Röllinghoff, M. und S. Stenger.
(2002). Induction of Tumor Necrosis Factor in human alveolar macrophages as a potential evasion mechanism
of virulent Mycobacterium tuberculosis. J. Immunol. Im Druck.
Ochoa M.-T.*, Stenger S.*, Sieling, P.A., Thoma-Uszynski, S., Sabet, S., Cho, S.,
Krensky, A.M., Röllinghoff, M., Nunes Sarno E., Burdick A., Rea T.H., und R.L. Modlin. (2001). A role for the
antimicrobial protein granulysin in host defense in leprosy.
Nat. Med., 7: 174-179. *Gleichberechtigte Erstautoren.
Stenger, S., Hanson, D., Teitelbaum, R., Dewan, P., Niazi, K.R., Froelich, C.J., Ganz, T., Thoma-Uszynski, S.,
Melian, A., Bogdan, C., Porcelli, S.A., Bloom, B.R., Krensky, A.M. und R.L. Modlin. (1998). An antimicrobial
activity of cytolytic T cells mediated by granulysin. Science, 282: 121-125.
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• GRK 592: Lymphozyten - Differenzierung, Aktivierung und Deviation •