Ute Hoffmann, BNI Hamburg - Förderverein der Biologieolympiade

5.2 Diskussion der Ergebnisse der Arbeiten mit den Bakterien
Auf dem mit Coomassie gefärbten SDS-PAGE-Gel, auf welches die Aliquots,
die vor und nach der Induzierung der Proteinproduktion in den TRAP-F-
Bakterien genommen worden sind, und die Proben des Probelysats aufgetragen
worden sind, ist deutlich die Produktion von TRAP-F nachvollziehbar,
da auf Höhe von 25 kDa sowohl in den Aliquots der Tag- und der Nachtkultur
und der Probe des Pellets des Probelysats eine deutliche Zunahme der
Bande sichtbar ist.
Während der Aufreinigung scheint TRAP-F jedoch verloren gegangen zu
sein, da auf dem nach der Aufreinigung hergestellten SDS-PAGE-Gel keine
Banden auf 25 kDa-Höhe zu entdecken sind. Der Verlust kann mit der schweren
Löslichkeit des Proteins zusammenhängen, so dass es bei der Lyse der
Bakterien nicht freigesetzt worden ist. Es wäre interessant zu wissen, welches
Protein stattdessen aufgereinigt worden ist, da im konzentrierten Eluat auf
Höhe von 70 kDa eine deutliche Bande sichtbar ist.
Auf dem SDS-PAGE-Gel mit den Aliquots, die vor und nach der Induzierung
der Proteinproduktion in den TRAP-H-Bakterien genommen wurden,
ist nur auf dem zweiten angefertigten Gel im Pellet der Übernachtkultur die
70 kDa schwere Bande, im Verhältnis zu den anderen Banden, dicker geworden.
Dies lässt darauf schlieÿen, dass entweder kein TRAP-H hergestellt
wurde oder dieses im Verhältnis zu dem ansonsten in den Bakterienzellen
vorhandenen Protein nicht viel ausmacht.
Da auf dem nach der Proteinaufreinigung hergestellten SDS-PAGE-Gel
in der Probe des konzentrierten Eluats eine deutliche Bande in Höhe von 70
kDa sichtbar ist, könnte man davon ausgehen, dass es sich dabei um TRAP-H
handelt. Da sich allerdings auch auf dem nach der Aufreinigung von TRAP-F
hergestellten SDS-PAGE-Gel eine Bande in Höhe von 70 kDa bendet und
diese mit hoher Wahrscheinlichkeit nicht von TRAP-H stammt, wäre auch
an der Identität des aufgereinigten TRAP-H zu zweifeln.
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