inaugural – dissertation - Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg

1 Einleitung 32
Verbesserung der Lebensqualität (Quality of Life) ein (Negro-Vilar, Prince et al., 2008;
Duvic, Kuzel et al., 2002). Es muss jedoch festgestellt werden, dass zahlreiche schwere
Nebenwirkungen möglich sind, wie z.B. Sehkraftverlust, systemische
Kapillarlecksyndrom, Leberschäden und periphere Ödeme (Foss, 2001).
Demzufolge wird deutlich, dass Immuntoxine im Gegensatz zu monoklonalen Ak,
welche die Zellen nach erfolgter Bindung durch Apoptoseinduktion, Ak-abhängige
zellvermittelte Zytotoxizität (antibody dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC) und
komplementvermittelter Zytotoxizität (complement-dependent cytotoxicity, CDC) töten,
besser für Patienten geeignet sind, deren Krebszellen Apoptose-resistent sind und
deren Immunsystem keine ADCC oder CDC ausüben wird (Zhang, Zhang et al., 2006).
Eine weitere Alternative (bereits seit den 1980er Jahren) zur spezifischen Zelldepletion
nutzt die toxische A-Untereinheit von DT (DT-A) in Kombination mit einer
zellspezifischen Expression des DT-A. ROSA26-eGFP-DTA-Mäuse besitzen eine weit
verbreitete Expression von enhanced green fluorescent protein (eGFP; Ivanova,
Signore et al., 2005). Die DT-A-Transkription ist jedoch bei ihnen durch eine
transkriptionale Stop-Sequenz blockiert. Erst eine Kreuzung mit Mäusen, welche die
Cre-Rekombinase unter der Kontrolle eines zellspezifischen Promotors besitzen,
entfernt das loxP-flankierte eGFP und die Stop-Sequenz. Die DT-A-Expression wird
aktiviert und Cre-exprimierende Zellen werden spezifisch depletiert.
Ein weiteres Modell stellt die sogenannte tet-DTA-transgene Maus da. Sie exprimiert
DT-A unter der Kontrolle des Tetrazyklin-Operators (tetO) und dem Zytomegalovirus-
Promotor (Lee, Morley et al., 1998). Werden diese Tiere mit Mäusen gekreuzt, welche
das reverse tetracycline-controlled transactivator protein oder das tetracyclinecontrolled
transactivator protein in speziellen Zellpopulationen exprimieren, so kann die
gewebespezifische DT-A-Expression im Nachwuchs mittels Tetrazyklin-Analog
Doxyzyklin induziert werden. Es ist somit in diesen doppeltransgenen Mäusen möglich,
eine reversibel induzierbare Depletion von bestimmten Zellpopulationen zu erzielen.
1.4.2 Diphtherietoxin-Rezeptor basierendes Zelldepletionssystem
Eine weitere Methode zur spezifischen Eliminierung von Zellen besteht in einer
gezielten Applikation von Toxinen in transgene Mäuse, deren zu depletierende Zellen
den Toxinrezeptor exprimieren (mittels zellspezifischem Promotor). So wurde 2001 von
Saito et al. DT zur konditionellen Depletion von genetisch modifizierten Leberzellen
(Diphtherietoxin-Rezeptor + ; DTR + ) angewandt (Saito, Iwawaki et al., 2001).
Systeme zur Eliminierung von Immunzellen