Identifizierung und Charakterisierung von Interaktionspartnern des ...

Material und Methoden
Zunächst wurden die Substanzen in 150 ml H 2 O gelöst und der pH mit NaOH auf 7,5
eingestellt. Anschließend wurde das Medium mit H 2 O auf 200 ml aufgefüllt und aliquotiert.
2.1.2.2 Medien für die Aufzucht von Hefen
YPD-Medium (pro l): 20 g Difco Peptone
10 g Hefeextrakt
Nach Zugabe von 950 ml H 2 O wurde der pH mit HCl auf 5,8 eingestellt und das Medium
autoklaviert. Anschließend wurde das Medium auf ~55°C abgekühlt und 50 ml einer sterilen
40%-igen Glukoselösung zugesetzt. Für YPD-Agarplatten wurde dem Medium vor dem
Autoklavieren 20 g/l Agar hinzugefügt.
SD-Medium (pro l): 6,7 g Yeast nitrogen base
ohne Aminosäuren
20 g Agar (nur für Platten)
850 ml H 2 O
100 ml Dropout-Lösung (10x)
pH 5,8
Anschließend wurde das Medium autoklaviert. Nach der Abkühlung auf ~55°C folgte die
Zugabe von 3AT (3-Amino-1,2,4-triazol), entsprechend gewünschter Endkonzentration,
sowie 50 ml einer 40%-igen Glukoselösung.
Dropout-Lösung (10x): 10x Dropout-Lösungen bestehen aus verschiedenen
Kombinationen von Aminosäuren. Mit SD/-Trp/-Leu wird ein
Medium bezeichnet, dem eine Dropoutlösung zugesetzt wurde,
der Trp (Tryptophan) und Leu (Leucin) fehlen.
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