Identifizierung und Charakterisierung von Interaktionspartnern des ...

Diskussion
4.1.3 PKC-interacting Protein 1 (PKCI-1) (Klon 455/3)
Mittels Sequenzierung konnte der Klon 455/3 als eine 482 Basenpaare lange
Nukleotidsequenz identifiziert werden, die einem 79 Aminosäuren langen Protein mit einem
Molekulargewicht von 8,3 kDa entsprach. In Homologievergleichen fand sich eine
Nukleotidsequenz mit Kodierung für das humane Protein PKC-interacting Protein 1
(PKCI-1).
Ursprünglich konnte PKCI-1 aus bovinem Hirngewebe isoliert werden (McDonald et al.,
1985). Hier zeigte es einen inhibitorischen Effekt auf die Proteinkinase C (Pearson et al.,
1990), die allerdings nicht bestätigt werden konnte. Ebenso konnte eine Interaktion von
PKCI-1 mit dem Gruppe D Ataxia teleangiectasia Protein nachgewiesen werden (Brzoska et
al., 1995), einem wichtigen Protein bei der humanen Erbkrankheit Ataxia teleangiectatica.
Weiterhin wurde in Cyanobakterien ein Homolog zu PKCI-1 gefunden, bei dessen
Abwesenheit ein nur schwaches Wachstum der Bakterien stattfand (Bustos et al., 1990).
Mittels fluoreszierender Antikörper gegen PKCI-1 konnte dessen Lokalisation nahe
zytoskelettaler Strukturen nachgewiesen werden (Brzoska et al., 1996). Diese Ergebnisse
postulieren die Teilnahme von PKCI-1 in einem bisher unbekannten Signaltransduktionsweg
(Bustos et al., 1990). Das Protein des PKCI-1 umfaßt 380 Aminosäuren vom Start- bis zum
Stopp-Codon und beinhaltet an den Aminosäuren 110-114 ein sogenanntes HIT-Motiv.
Dieses HIT-Motiv (Histidine Triad) (Seraphin, 1992) konnte als alpha-Phosphat
Bindungsstelle für nukleotidbindende Domänen identifiziert werden (Brenner et al., 1997).
Der Klon 455/3 kodiert für die Aminosäuren 62-126 des PKCI-1 und besitzt ebenfalls das
HIT-Motiv.
4.1.4 Junctional Adhesion Molecule (JAM) (Klon 512/3)
Die Sequenzierung ergab für den Klon 512/3 eine 761 Bp lange Nukleotidsequenz, die für ein
Protein mit 135 Aminosäuren und einem Molekulargewicht von etwa 14,2 kDa kodiert. In
Blast-Analysen wurde das Junctional Adhesion Molecule (JAM) als Protein gefunden.
Erst 1998 wurde JAM entdeckt und in die Familie der membranständigen Immunglobuline
eingeordnet. Das Protein besteht aus insgesamt 300 Aminosäuren, die sich aus einer
extrazellulären Domäne, einer Transmembranregion und einer kurzen zytoplasmatischen
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