Aus der Klinik für Plastische Chirurgie der Universität zu Lübeck ...

Monoexpression von VEGF 165
allein nicht mehr therapeutisch effektiv. Diese
therapeutischen Erfolge sind ebenfalls nicht erzielbar, wenn die modifizierten Zellen erst
zum Zeitpunkt des IschÅmiebeginnes in vivo appliziert werden, was durch den
Wirkungsmechanismus der exprimierten Proteine verstÅndlich wird. Da nur ortsstÅndige
Endothelzellen zur Angiogenese angeregt werden, welche unter IschÅmiebedingungen
bereits eine lokale Stimulation durch freigesetzte Signalproteine erfahren, wird eine
zusÅtzliche Expression von Angiogenesefaktoren keine nennenswerten therapeutischen
Effekte generieren kÑnnen. Neue Studien haben deshalb zum Ziel, neben den Signalprotein-
exprimierenden Zellen auch endotheliale Progenitorzellen oder periphere Stammzellen zu
transplantieren, die selbst eine de novo GefÅÖbildung im Sinne einer Vasculogenese
induzieren oder eine Arteriogenese im Zielgebiet unterstÄtzen kÑnnen (32).
5.2 Angiogeneseinduktion im hier dargestellten Modell
In unserem Modell bedienten wir uns des zell-basierten Gentransfers. Der Vorteil dieses
Verfahrens liegt vor allem darin, dass es die Gentherapie, im Gegensatz zur direkten
Transfektion des Gewebes, kontrollierbar macht, da hier eine definierte Anzahl von Genen,
auf eine definierte Anzahl von Zellen gebracht wurde. Die Anzahl der dadurch transfizierten
Zellen wurde bestimmt und die daraus resultierende Proteinfreisetzung konnte noch in vitro
mittels ELISA gemessen werden. Dann wurde eine genau definierte Anzahl dieser Zellen in
ein vorher festgelegtes Gebiet implantiert. HierfÄr wurden Fibroblasten isogener Ratten
entnommen und diese adenoviral mit dem gewÄnschten Gen (VEGF 165 oder GFP) transfiziert.
Als IschÅmiemodell diente uns der McFarlane Lappen. Dieser –von McFarlane 1965 (59)
etablierte- musculokutane Lappen bezeichnet ein Gebiet von 2x8 cm GrÑÖe auf dem RÄcken
der Ratte mit einer randomisierten Blutversorgung, die von der Lappenbasis stammt. Die
Zellen wurden dabei in den Panniclus carnosus injiziert. Aufgrund der GrÑÖe und des
Aufbaus des Lappenmodells war die zu erwartende Nekrose bei unbehandeltem Gebiet immer
um 50%, wenn man davon ausgeht, dass bei randomisierten Lappen bei einem
GrÑÖenverhÅltnis von 1:2 gerade noch eine ausreichende Durchblutung gewÅhrleistet ist und
dieses Modell ein GrÑÖenverhÅltnis von 1:4 beinhaltete. Es konnte somit also nicht nur
histologisch und mikroangiographisch die Anzahl der BlutgefÅsse im behandelten Gewebe
ermittelt, sondern direkt auch die therapeutische Konsequenz im klinischen Verlauf
gemessen werden.
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