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laborwelt 

Nr. 5 / 2009 – 10. Jahrgang 

Analyse von Krebs-Pathways 

Überwindung der Therapie- 

Resistenz von Tumoren durch 

Apoptose-Sensitivierung 

Marktübersicht: 

PCR 

MicroRNA-Signaturen: Auf 

der Spur der Haupt akteure 

der Metastasierung 

Identifikation neuer 

Protein-Biomarker für das 

Pankreaskarzinom

Normalized Cell Cell Index Cell Index Index 

5 

Cells in Real-Time! 

5 

4 

5 

4 

3 

4 

3 

2 

3 Seed 

2 Cells 

1 Seed 

2 Cells 

1 Seed 

0 Cells 

1 

0 

0 


Treatment 

Treatment 

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20 40 60 

Control 

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Krebs: Vielfalt der 

Signale... 

Statistisch gesehen erkrankt jeder dritte Erwachsene im Laufe seines 

Lebens an Krebs, 30% bis 40% werden nach heutiger Definition geheilt, 

sie überleben nach Operation und Chemo-, Strahlen-, Hormon- oder gezielter 

Therapie mehr als fünf Jahre. Allerdings sterben die meisten von 

ihnen trotzdem – nur später, denn 90% der Todesfälle sind nicht auf das 

Primärkarzinom oder -sarkom zurückzuführen, sondern kommen durch die 

Bildung von Metastasen zustande. Kaum ein Tag vergeht, an dem nicht eine 

Meldung über einen Durchbruch in der Krebstherapie verlautbart wird. 

Doch das höchst heterogen zusammengesetzte Tumorgewebe entzieht 

sich diversen Therapiestragegien, zum Beispiel durch Entwicklung von 

Therapieresistenzen, Immuntoleranz des Tumor-induzierenden Zellklons 

etc. In dieser LABORWELT-Themenausgabe „Krebs - Analyse von Signalwegen“ 

stellen wir neue molekularbiologische Strategien zur Erforschung, 

Diagnose und Behandlung von Krebs vor, die in das Netzwerk deregulierter 

Apoptose-, Zellzyklus- und Wachstumshormon-Schalter eingreifen. 

Eine neue Strategie, die die Fähigkeit von Tumoren unterlaufen soll, nach 

mehrfacher Behandlung, Resistenzen gegen verschiedenste Therapieformen 

auszuprägen, hat die Arbeitsgruppe von Sebastian Wesselborg vom 

Universitätsklinikum Tübingen entwickelt (vgl. Seite 4). Mittels Sensitivierung 

des Tumors für den durch TRAIL (TNF-related apopoptosis-nducing 

ligand) vermittelten programmierten Zelltod erzielten sie erste Erfolge. 

microRNA-Schalter, die den todbringenden Prozess der Metastasierung 

steuern, beschreibt ein US-Team um Carlo Croce. Mit Hilfe von Microarray- 

Untersuchungen haben die Forscher von der Thomas Jefferson University 

durch Vergleich von Primärtumoren und Metastasen eine miRNA-Signatur 

aus differentiell exprimierten miRNA-Genen und Gewebemarkern 

entdeckt (vgl. Seite 12). Aus Sicht des Brustkrebs- und Signaltransduktionsspezialisten 

Ralf Hass von der MHH können allerdings Mono- und 

auch Kombinationstherapien den unterschiedlichen Ausprägungen der 

Metastasierung nur bedingt gerecht werden (vgl. Seite 15) – er nennt 

Argumente für eine Individualtherapie. 

Dies sind nur wenige Ausschnitte aus dem weiten Spektrum an Beiträgen 

dieser Themenausgabe. Übrigens, sind sie auf der Biotechnica? Dann 

freuen wir uns über Ihren Besuch an Stand E11 in Halle 9. 

In diesem Heft 

Marktübersicht: PCR 

Thomas Gabrielczyk 

Egal ob PCR-Entdecker Kary Mullis die Polymerase-Kettenreaktion nun 

nie ohne psychedelische Drogen entdeckt hätte, wie Journalisten berichten 

– sie ist aus keinem Labor wegzudenken.Derzeit entwickelt sie 

sich vom reinen Forschungstool zumWerkzeug der molekularen Diagnostik. 

Den aktuellen Stand präsentieren die Anbieter ab Seite 36. 

Inhalt 

Editorial | Inhalt 

Blitzlicht Apoptose-Sensitivierung 

4 Überwindung der Therapieresistenz durch Akt/PKB-Inhibition 

Sebastian Wesselborg et al., Universitätsklinikum Tübingen 

Blitzlicht Genomics 

8 Erworbene Änderungen der Kopienzahl in AML-Genomen 

Burkhard Ziebolz, Roche Applied Science, Penzberg 

Wissenschaft RNA-Interferenz 

12 MicroRNAs – Haupakteure der Metastasierung 

Carlo Croce et al., Comprehensive Cancer Center, Ohio State University 

Report Metastasierung 

15 Brustkrebs und Metastasierung – Vorteile einer Individualtherapie 

Ralf Hass, Medizinische Hochschule Hannover 

Blitzlicht Multikinase-Inhibitoren 

18 Experimentelle Therapie von Flt3-ITD-positiven AML-Patienten 

Andreas Burchert et al., Universität Marburg 

Blitzlicht DNA-Methylierungsanalyse 

23 BEAMing: Sensitive Plasmadiagnostik in der Onkologie 

Frank Diehl et al., Inostics GmbH, Hamburg 

Blitzlicht Proteomics 

26 Detektion neuer Tumor-assoziierter Biomarker des 

Pankreaskarzinoms 

Georg Martin Fiedler, Joachim Thiery et al., Universität Leipzig 

Blitzlicht Protein-Microarrays 

29 Sensitive, quantitative Analyse von Signalwegen 

Ulrike Korf et al., Deutsches Krebsforschungszentrum Heidelberg 

Blitzlicht Kongress 

33 Weltkongress der Stammzellforscher in Leipzig 

Blitzlicht Bibliometrie 

34 Leistungsmessung in der Forschung – Erfordernis oder 

Vermessenheit? 

Stefan Hornbostel, Markus von Ins, 

Institut für Forschungsinformation und Qualitätssicherung (iFQ), Bonn 

Service Marktübersicht 

36 Polymerase-Kettenreaktion 

46 Stellenmarkt 

50 Verbände 

51 Produktwelt 

53 Termine 

54 Ausblick/ Impressum 

Titel: Analyse von Krebssignalwegen 

Fluoreszenzmikroskopische Aufnahme eines in Kultur 

gewachsenen epithelialen Monolayers aus Brustkrebszellen 

Foto: © Roche 

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LABORWElT 10. Jahrgang | Nr. 5/2009 | 3


Überwindung der 

Therapieresistenz durch 

Akt/PKB-Inhibition 

Dr. Björn Stork, Dipl.-Biochem. Alexandra Dieterle, Prof. Dr. Sebastian Wesselborg, 

Universitätsklinikum Tübingen 

Zahlreiche Tumore entwickeln nach mehrmaliger Behandlung Resistenzen gegen konventionelle 

Chemotherapie und Bestrahlung,aber auch gegen neuartige,zielgerichtete Agenzien wie denTNFrelated 

apoptosis-inducing ligand (TRAIL).Deshalb steht die Überwindung derTherapieresistenz im 

Fokus bei der Enwicklung neuer Therapiekonzepte. Der PI3K/Akt-Signalweg ist in vielen Tumoren 

konstitutivaktiviert undträgt zurVermittlungvonTherapieresistenzenbei.Dementsprechendzielen 

verschiedene therapeutische Strategien auf die Inhibition dieses Überlebenssignalweges.Der Akt- 

InhibitorTriciribin (TCN) sensitiviert Prostatakarzinomzellen für dieTRAIL-induzierte Apoptose.Die 

beobachtete Sensitivierung hängt entscheidend vom Akt-Aktivierungsszustand ab.Ausschließlich 

Prostatakrebszellen,die konstitutiv aktives Akt aufweisen,werden für dieTodesrezeptor-induzierte 

Apoptose sensitiviert. Sowohl TRAIL- als auch TCN-Derivate werden aktuell in klinischen Studien 

getestet. Ihre kombinierte Anwendung könnte einen möglichen Therapieansatz darstellen, um 

Hormon-refraktäre Prostatakarzinome zu eliminieren, welche häufig gegen konventionelle Chemotherapeutika 

und Bestrahlung resistent sind. 

A B 

Abb. 1: TCN verstärkt die TRAIL-induzierte Apoptose in PC-3-Zellen. A. PC-3-Zellen wurden mit 

10 µM TCN, 40 ng/mL TRAIL oder der Kombination der beiden Substanzen für 24 h behandelt. 

Die Apoptose wurde durch die Anfärbung hypodiploider Zellkerne mit Propidiumiodid 

und anschließender Durchflusszytometrie bestimmt. B. PC-3-Zellen wurden 

mit 0,1% DMSO (Lösungsmittelkontrolle; Bahn 1),TCN (10 µM; Bahn 2),TRAIL (40 ng/mL; 

Bahnen 3-6),TRAIL und TCN (TCN wurde für eine Stunde vorinkubiert; Bahnen 7-10) oder 

TRAIL,TCN und dem Caspase-Inhibitor QVD (10 µM; Bahn 11) für die angegebenen Zeiten 

behandelt. Die Immunoblots wurden mit anti-PARP- oder anti-Vinculin-Antikörpern 

durchgeführt. 

Ein Haupthemmnis, das der effektiven Behandlung 

maligner solider Tumoren entgegensteht, 

ist die Entwicklung von Resistenzen 

gegenüber Chemotherapeutika oder Bestrahlung. 

Verschiedene Mechanismen tragen zur 

Resistenzvermittlung bei – unter anderem 

sind auf molekularer Ebene die Inhibition von 

Zelltod-Signalwegen, die Inaktivierung von Seneszenzprogrammen, 

die Induktion protektiver 

Autophagie, epigenetische Veränderungen, 

die Vermehrung von Tumorstammzellen und 

die Aktivierung von Überlebenssignalwegen 

beteiligt. Das Verständnis und die Überwindung 

solcher Therapieresistenzen ist unser zentraler 

Forschungsschwerpunkt im Rahmen des Sonderforschungsbereiches 

773 der Universität 

Tübingen. 

Krebserkrankungen sind die zweithäufigste 

Todesursache weltweit, und das Prostatakarzinom 

eine Hauptursache der krebsbedingten 

Mortalität bei Männern. Gegenwärtige Therapien 

umfassen die Prostatektomie sowie die 

Chemo- und Radiotherapie 1 . Patienten mit rezidiver 

sowie metastasierender Krebserkrankung 

werden durch den Entzug androgener Hormone 

behandelt 1 . Dieses kann zu Androgen-unabhängigen 

Prostatakarzinomen führen, die eine ausgeprägte 

Resistenz gegenüber der Chemotherapie 

aufweisen, und die Lebenserwartung auf 

durchschnittlich 15 bis 20 Monate verkürzen 2 . Im 

Allgemeinen wirken Radio- und Chemotherapie 

DNA-schädigend und aktivieren den intrinsischen 

mitochondrialen Apoptose-Signalweg. 

Im vergangenen Jahrzehnt konnte gezeigt 

werden, das der extrinisische Todesrezeptorweg 

ebenfalls ein geeignetes Ziel für die Krebstherapie 

ist. Dabei zeigte sich, dass der TNF-related 

apoptosis-inducing ligand (TRAIL) in verschiedenen 

Tumorzellen die Apoptose induziert, nicht 

jedoch in normalen Zellen 3, 4 . Dementsprechend 

werden derzeit rekombinantes TRAIL, TRAIL- 

Varianten oder agonistische Antikörper in 

verschiedenen klinischen Studien getestet 5 . 

Viele Tumorzellen entwickeln jedoch im Verlauf 

der Therapie eine TRAIL-Resistenz. Ein aktueller 

Forschungsschwerpunkt besteht in der Analyse 

der Mechnismen, die zur TRAIL-Resistenz in 

Tumoren führen und eine Re-Sensitivierung 

von Tumorzellen für eine TRAIL-Behandlung ermöglichen. 

Verschiedene molekulare Faktoren, 

die Tumorzellen eine TRAIL-Resistenz verleihen, 

wurden bislang beschrieben, zum Beispiel. 

Decoy-Rezeptoren, cFLIP, nuclear factor (NF)-κB, 

oder anti-apoptotische Kinasen wie Akt (Proteinkinase 

B). Insgesamt könnte die kombinierte 

Verwendung von TRAIL oder TRAIL-Rezeptor- 

Agonisten mit Agenzien, die Tumorzellen für 

die TRAIL-induzierte Apoptose sensitivieren, die 

molekulare Basis für eine erfolgreiche Behandlung 

von Krebserkrankungen darstellen. 

Der Akt-Inhibitor Triciribin 

Neben der Inaktivierung von Apoptose-Signalwegen 

kann auch die übermäßige Aktivierung 

von Überlebenssignalwegen Therapieresistenzen 

von Tumorzellen bewirken. In Prostatakarzinomen 

konnten verschiedene Mechanismen 

identifiziert werden, durch die die Aktivität von 

Akt hochreguliert wird – unter anderem die 

Überexpression von Akt, der Verlust des negativen 

Akt-Regulators Phosphatase and tensin 

homolog deleted on chromosome 10 (PTEN) 

durch Deletion, Mutation oder epigenetische 

Veränderungen, Überexpression von Wachstumsfaktor-Rezeptoren 

oder Überexpression 

der PI3-Kinase 2 . Die Hälfte aller Prostatakarzinom-Patienten 

zeigt eine Inaktivierung von 

PTEN; dieser Anteil ist bei Patienten mit Metastasen 

oder Androgen-unabhängigen Formen 

sogar noch höher 2 . Aktiviertes Akt unterstützt 

das Überleben einer Zelle sowohl durch die 

Inhibition pro-apoptotischer Faktoren (Bad, 

Caspase-9, forkhead transcription factors, p53) 

als auch durch Aktivierung anti-apoptotischer 

Faktoren (Mcl-1, XIAP, NF-κB) 6 . 

Der Akt-Inhibitor Triciribin (TCN) unterdrückt 

die Phosphorylierung und dementsprechend 

die Kinaseaktivität aller drei Akt-Isoformen 7 . 

4 | 10. Jahrgang | Nr. 5/2009 LABORWElT

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Abb. 2: Sensitivierung der Tumorzelle für die TRAIL-induzierte Apoptose durch Akt-Inhibition. 

Die konstitutive Aktivierung von Akt in Tumorzellen führt zur Inhibition der TRAILvermittelten 

Apoptose und dementsprechend zur Therapieresistenz (links). Die TCNvermittelte 

Inhibition von Akt ermöglicht die Sensitivierung von Tumorzellen für die 

TRAIL-induzierte Apoptose und damit die Eliminierung des Tumors. 

Es konnte gezeigt werden, dass TCN anti- 

Tumor-Aktivität gegenüber Zellen aufweist, 

die konstitutiv aktives Akt besitzen 8 . TCN ist 

spezifisch für Akt und zeigt keine inhibitorische 

Wirkung auf PI3K, PDK1, PKC, SGK, PKA, Stat3, 

Erk-1/2 oder JNK 7 . Darüber hinaus konnte in 

Xenograft-Modellen gezeigt werden, dass TCN 

das Tumorwachstum humaner Krebszellen 

inhibiert, die eine anomale Expression beziehungsweise 

Aktivierung von Akt aufweisen. 

Im Gegensatz dazu wurde das Wachstum von 

Tumorzellen, die eine normale Expression oder 

Aktivität von Akt zeigen, nicht beeinflusst 8 . TCN 

wird auch als Akt pathway inhibitor API-2 oder 

trizyklisches Nukleosid bezeichnet und wurde 

in den frühen achtziger Jahren als Inhibitor der 

DNA-Synthese identifiziert. Es konnte gezeigt 

werden, dass TCN präklinische Aktivität gegen 

Leukämien und Karzinome besitzt, und TCN 

wurde in verschiedenen klinischen Studien der 

Phase I und II eingesetzt 7 . Da als zytotoxisches 

Therapeutikum eingesetzt, wurden in der 

Mehrzahl der Studien hohe Triciribin-Dosen 

verwendet, um eine maximale klinische Wirksamkeit 

zu erzielen 7 . Dementsprechend zeigte 

TCN zwar antitumorale Eigenschaften in einigen 

Patienten, hatte aber Nebenwirkungen 

wie Hepatotoxizität, Hypertriglyceridämie, 

Thrombozytopenie oder Hyperglykämie 7 . Da 

TCN spezifisch Akt inhibiert, ist anzunehmen, 

dass Tumore mit hoher Akt-Aktivität auch auf 

geringere Dosierungen reagieren. Deshalb wird 

TCN momentan wieder in zwei klinischen Stu- 

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dien der Phase I eingesetzt (www.clinicaltrials. 

gov, NCT00363454 und NCT00642031). Bei einer 

der beiden Studien muss vor der Behandlung 

der Probanden eine erhöhte Akt-Aktivität per 

Immunhistochemie nachgewiesen werden. 

Triciribin sensitiviert für die 

TRAIL-induzierte Apoptose 

Verschiedene Arbeitsgruppen konnten zeigen, 

dass eine Inaktivierung des PI3K/Akt-Signalweges 

zu einer Sensitivierung von Prostatakarzinomzellen 

für die TRAIL-induzierte Apoptose 

führt 9-11 . Dementsprechend haben wir den 

Effekt von TCN auf die TRAIL-induzierte Apoptose 

in der Prostatakarzinomzelllinie PC-3 

untersucht. TCN inhibiert die Akt-Phosphorylierung 

und -Aktivität in PC-3-Zellen 12 . Des 

Weiteren konnten wir demonstrieren, dass 

TCN die Todesrezeptor-abhängige Apoptose 

verstärkt. In Abbildung 1 (vgl S. 4) ist gezeigt, 

dass die Inhibition des Akt-Signalweges zu 

einer erhöhten Empfindlichkeit gegenüber 

TRAIL führt. Apoptose wurde zum einen durch 

die durchflusszytometrische Messung hypodiploider 

apoptotischer Zellkerne (links), zum 

anderen durch den Nachweis der Spaltung 

des Caspase-Substrats PARP per Immunoblot 

detektiert (rechts). In weitergehenden Experimenten 

konnten wir bestätigen, dass diese 

TCN-vermittelte Sensitivierung kritisch von 

der Expression und Aktivität von Akt abhängt. 

So hatte TCN keinen sensitivierenden Effekt in 

PC-3-Zellen, in denen die Akt-Expression per 

siRNA herunterreguliert war, oder in der Prostatakarzinomzelllinie 

Du145, welche kein kon- 

stitutiv aktiviertes Akt besitzt 12 . Offensichtlich 

verstärkt TCN die TRAIL-induzierte Prozessierung 

und die damit verbundene Aktivierung 

des pro-apoptotischen Proteins Bid. Gegenwärtig 

werden weitere Studien durchgeführt, 

um den exakten molekularen Mechanismus 

der TCN-vemittelten Sensitivierung für die 

TRAIL-induzierte Apoptose zu entschlüsseln. 

Neben TCN werden momentan weitere Akt- 

Inhibitoren in klinischen Studien getestet, 

darunter Perifosin (Keryx), GSK690693 (GSK), 

VQD002 (Vioquest) oder MK2206 (Merck & 

Co.) 13 . In Abbildung 2 ist die TCN-vermittelte 

Sensitivierung für die TRAIL-induzierte Apoptose 

schematisch zusammengefasst. Da 

sowohl TCN- als auch TRAIL-Derivate klinisch 

getestet werden, könnte die kombinierte Anwendung 

einen vielversprechenden therapeutischen 

Ansatz für die Eliminierung Hormonrefraktärer 

Prostatakarzinome darstellen, 

welche resistent gegen die konventionellen, 

DNA-schädigenden Chemotherapeutika oder 

Bestrahlung sind. 

Literatur 

[1] Lee, J.T., Lehmann, B.D., Terrian, D.M., Chappell, W.H., Stivala, 

F., Libra, M., Martelli, A.M., Steelman, L.S., McCubrey, J.A., Cell 

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Hamilton, A.D., Polokoff, M., Nicosia, S.V., Herlyn, M., Sebti, 

S.M., Cheng, J.Q., Cancer Res 64 (2004), 4394-4399. 

[9] Chen, X., Thakkar, H., Tyan, F., Gim, S., Robinson, H., Lee, C., 

Pandey, S.K., Nwokorie, C., Onwudiwe, N., Srivastava, R.K., 

Oncogene 20 (2001), 6073-6083. 

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Leander, K.R., McAvoy, E., Robinson, R.G., Duggan, M.E., Lindsley, 

C.W., Zhao, Z., Huber, H.E., Jones, R.E., Mol Cancer Ther 4 

(2005), 271-279. 

[11] Whang, Y.E., Yuan, X.J., Liu, Y., Majumder, S., Lewis, T.D., Vitam 

Horm 67 (2004), 409-426. 

[12] Dieterle, A., Orth, R., Daubrawa, M., Grotemeier, A., Alers, S., 

Ullrich, S., Lammers, R., Wesselborg, S., Stork, B., Int J Cancer 

125 (2009), 932-941. 

[13] Engelman, J.A., Nat Rev Cancer 9 (2009), 550-562. 

Korrespondenzadresse 

Prof. Dr. Sebastian Wesselborg 

Innere Medizin I 

Medizinische Klinik 

Universitätsklinikum Tübingen 

Otfried-Müller-Str. 10 

72076 Tübingen 

Tel.: +49-(0)7071-29-84113 

Fax: +49-(0)7071-29-5865 

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Blitzlicht Genomforschung 

Erworbene Veränderungen 

der Kopienzahl in AML- 

Genomen 

Dr. Burkhard Ziebolz, Roche Applied Science GmbH, Penzberg 

Zytogenetische Analysen der Akuten Myeloischen Leukämie (AML) haben die Identifikation von 

Genen beschleunigt, die mit der AML-Pathogenese verknüpft sind. Um die von der Auflösung her 

limitierten zytogenetischen Studien zu komplementieren und zusätzliche bei AML veränderte 

Gene aufzuspüren, wurde eine genomweite Kopienzahl-Analyse durchgeführt. Es wurde dazu 

paarweise an verschiedenen Stellen entnommene normale sowieTumor-DNA eingesetzt,die von 86 

erwachsenen Patienten mit de novo-AML stammten,und mit SNP-Arrays mit 1,85 Millionen Features 

untersucht 1 .Die erworbenenen Änderungen der Kopienzahl (engl.Copy number alterations,CNAs), 

dieaufüblichenPlattformenmit einerhohenRatefalsch-positiverErgebnissebehaftet sind,wurden 

mittels einer ultradichten, Array-gestützten komparativen Genom-Hybridierungs-(CGH)Plattform 

validiert (Roche/NimbleGen CGH 12x135K-Array, Roche Applied Science, Penzberg). 

Es fanden sich insgesamt 201 somatische CNAs 

in den 86 AML-Genomen (Median: 2,34 CNAs 

pro Genom), wobei die nach Französisch-amerikanisch-britischem 

(FAB) System klassifizierten 

M6- und M7-Genome die meisten Veränderungen 

enthielten (10-29 CNAs per Genom). 24% der 

AML-Patienten mit normaler Zytogenetik – also 

ohne jede Chromosomenaberration – zeigten 

CNAs. Zusätzlich wiesen 40% der Patienten mit 

anomalem Karyotyp CNAs auf, wie SNP-Analysen 

ergaben – davon einige in wiederkehrenden 

CNA-Regionen. In 27 der 50 wiederauftretenden 

Regionen unter 50 Mb Größe waren die exprimierten 

mRNA-Mengen signifikant verändert. 

In den 86 Genomen wurden zudem acht DNA- 

Abschnitte identifiziert, bei denen beide Kopien 

von einem Elternteil stammten (uniparentale 

Disomie, UPD); sechs dieser UPDs traten in 

Proben mit normalem Karyotyp auf. Zusammengenommen 

enthielten 34 der 86 untersuchten 

AML-Genome (40%) Veränderungen, die mittels 

zytogenetischer Analyse nicht erfasst worden 

waren, davon enthielten 98% Gene. Von den 

86 Genomen zeigten bei dieser Auflösung 43 

Abb. 1: Roche/NimbleGens Array-CGH, der zur Validierung der ansonsten oft falsch-positiv 

ermittelten kleinen CNAs in AML-Patientenmaterial eingesetzt wurde 

(entsprechend 50%) keine CNAs oder UPDs. Mit 

Hilfe des hier vorgestellten wertungsneutralen 

hochaufgelösten Genom-Screenings konnten 

zahlreiche Gene identifiziert werden, die zuvor 

nicht mit AML in Zusammenhang gebracht 

wurden, die aber – im Zusammenspiel mit 

bereits bekannten Onkogenen und Tumorsuppressorgenen 

– möglicherweise relevant für die 

Krankheitsentstehung sind. 

Akute myeloische Leukämie 

Die akute myeloische Leukämie (AML) ist eine 

heterogene Gruppe von Krankheiten, die derzeit 

anhand von Anomalien der Knochenmark- 

Morphologie, des Karyotyps, erworbener Mutationen 

und Veränderungen der Genexpression 

klassifiziert werden 1-3 . Obgleich die Identifikation 

spezifischer Genmutationen verbesserte Behandlungsergebnisse 

für einige AML-Patienten 4 

erbracht hat, existiert eine enorme klinische 

Heterogenität, die möglicherweise die Anwesenheit 

bislang unerkannter, initiierender und zusammenwirkender 

Mutationen widerspiegelt. 

Die Entdeckung somatischer Mutationen im 

Erbgut von AML-Patienten mit normalem und 

anomalen Karyotyp verspricht daher, das Verständnis 

der AML zugrundeliegenden Genetik 

voranzubringen und kann zu einer verbesserten 

Patientenklassifikation und Therapie beitragen. 

Die Entdeckung zuvor uncharakterisierter 

mutierter Gene durch Kopienzahl-Analyse mittels 

SNP-Arrays wurde unlängst für die Akute 

Lymphoblastische Leukämie (ALL) beschrieben 5 . 

Mit den eingesetzten SNP-Array-Plattformen lassen 

sich in Krebszellen Genomamplifikationen, 

Deletionen und der SNP-bedingte Verlust der 

Heterozygotie (loss of heterozygosity, LOH) detektieren 

sowie Regionen uniparentaler Disomie 

(UPD), also Kopienzahl-neutrale LOH-Ereignisse. 

Anfängliche Studien mit SNP-Arrays und Chipgestützter 

komparativer Genom-Hybridisierung 

(CGH) legten nahe, dass sowohl Änderungen 

der Kopienzahl als auch der UPD verbreitet in 

AML-Genomen auftreten 6-12 . Allerdings wurden 

in diesen Studien niedrig-auflösende Arrays 

eingesetzt, oft stammte die Referenz-DNA nicht 

von normalen Zellen desselben Patienten, und 

die Änderungen der Kopienzahl wurde nicht 

mit einer unabhängigen Plattform validiert. 

Dies limitiert die Unterscheidung zwischen 

erworbenen (somatischen) CNAs und erblichen 

Kopienzahl-Variationen (CNVs), die in allen 

Individuen auftreten. Des weiteren werden 

zusätzliche Validierungsverfahren benötigt, um 

zwischen tatsächlichen Ereignissen und falschpositiven 

Signalen zu unterscheiden, welche 

extrem häufig bei Verwendung der verbreiteten 

Plattformen auftreten. Um diese Limitationen 

zu überwinden und Gene sicher zu identifizieren, 

die in AML-Genomen somatisch verändert 

sind, wurde die Genome-weite Human-SNP- 

Array-Plattform 6.0 (Affymetrix) eingesetzt, um 

paarweise entnommene Tumor-DNA- sowie 

normale DNA-Proben von 86 erwachsenen de 


novo-AML-Patienten zu screenen. Ein zur Validierung 

eingesetzter hochdicht gespotteter, 

maßgeschneiderter Roche/NimbleGen CGH 

12x135K-Array (medianer Sondenabstand 245 

Bp) (vgl. Abb. 1) ermöglichte es, die ansonsten 

hohe Rate an Falsch-positiven signifikant zu 

vermindern. 

Es wurden im Mittel 2,34 CNAs pro Genom 

identifiziert, von denen 76% ein bekanntes 

Krebsgen betrafen. Insgesamt 50 wiederholt 

auftretende CNAs unter 50Mb konnten in den 

86 Genomen aufgespürt werden, und 32 davon 

enthielten Gene, die zuvor nicht in Zusammenhang 

mit AML gebracht wurden. UPDs waren 

eher in Proben mit normalem Karyotyp anzutreffen. 

Die Hälfte der im Rahmen der Studie 

getesteten AML-Genome wiesen weder CNAs 

noch UPDs auf – ein Hinweis darauf, dass möglicherweise 

andere Methoden, wie etwa schnelle 

Genomsequenzierungs-Verfahren, eingesetzt 

werden müssen, um die verbleibenden genetischen 

Veränderungen zu entdecken, die an der 

AML-Pathogenese beteiligt sind. 

Patientenkollektiv 

86 erwachsene Patienten mit de novo-AML, 

für die ausreichend DNA-Proben aus der Haut 

(gesund) oder zwei voneinander unabhängigen 

Punktionen an verschiedenen Stellen des 

Knochenmarks (Tumor) vorlagen, wurden für 

die Studie ausgewählt. Die „paarweisen“ Proben 

gestatten es, erworbene CNAs von erblichen 

CNVs zu unterscheiden. Die Fälle wurden nach 

Diagnose und Knochenmark-Banking gemäß 

FAB-System klassifiziert. Die Patienten hatten 

unterschiedlich ausgeprägte zytogenetische 

Veränderungen (FAB-Klassen M0-M7), und 

zeigten im Mittel 64% unreife Myeloblasten 

(Spanne: von 30% bis 100%), jene Unterklasse 

von Leukozyten, deren Reifungsstörung der AML 

zugrunde liegt. 

Erworbene CNAs 

Mittels SNP-Arrays wurden 201 erworbene 

Änderungen der Kopienzahl (CNAs) in 38 der 86 

AML-Genome gefunden, die jedes Chromosom 

mindestens einmal, und Bereiche zwischen 35 

Kb (34 Sonden) und 250 Mb (146.524 Sonden) 

betrafen. Im Mittel traten 2,34 CNAs pro AML- 

Genom auf (Spanne 0-30), wobei Deletionen 

häufiger waren als Amplifikationen Die 201 

CNAs umfassten alle FAB-Sybtypen, allerdings 

zeigten M6- und M7-Subtypen signifikant mehr 

CNAs pro Genom als alle anderen Klassen. 

Von den 201 CNAs korrespondierten 125 

(62%) mit Änderungen, die bereits zytogenetisch 

detektiert worden waren, 76 (38%) wurden 

ausschließlich mit SNP-Arrays detektiert. 

Davon waren 32 größer als 1 Mb. 26 davon 

wurden mittels des unabhängigen Custom- 

NimbleGen-CGH 12x135K-Arrays (Roche NimbleGen) 

validiert. Zwei der 32 CNAs mit einer 

Größe von 1 Mb traten an einer bekannten 

Translokationsbruchstelle auf. 

198 der 201 analysierten Loci enthielten 

bekannte Gene, 154 zumindest ein Gen, das 

zuvor in Zusammenhang mit Krebs oder AML 

bzw. Störungen der Myeloztendifferenzierung 

(„Myelodysplasien“, MDS) gebracht wurden 13 . 

38% der CNAs mit einer Größe an der Nachweisgrenze 

zytogenetischer Untersuchungen 

(5Mb) enthielten mindestens ein Krebs- oder 

AML/MDS-assoziiertes Gen – deutlich mehr 

als erwartet. Im Gegensatz zu akkumulierten 

Krebs-, AML/MDS- und annotierten Genen 

war in CNAs einer Größe von 1 bzw. 5 MB keinerlei 

Anreicherung von microRNA-Genen zu 

beobachten. 

Insgesamt wurden mit Hilfe des GISTIC- 

Algorithmus 14 in den 201 CNAs 12 chromosomale 

Regionen identifiziert, die in mehreren 

AML-Genomen signifikant verändert waren. 

Dabei zeigten sich acht Deletionen von Genen, 

die mit Krebs und/oder AML/MDS assoziert 

sind (3p14.1: FHIT, 5q31.1: CTNNA1, 12p12.3: ETV6, 

16q22.1: CBFB, 17p13.1: TP53, 17q11.2: NF1) sowie 

vier Amplifikationen (8q23.2: MYC, 11q23.3: MLL 

und 21q22.2: ETS2), die alle eine entsprechend 

der Gen-Dosis veränderte Expression zeigten. 

In fünf Patienten fanden sich zwei veränderte 

Regionen (17q11.2 und 21q22.2), die mit einer 

Verschlechterung des Gesamtüberlebens 

assoziiert waren. 

Zusätzlich wurden 32 wiederholt auftretende 

CNA-Regionen identifiziert (19 Deletionen und 

13 Amplifikationen). Von diesen enthielten 

sechs Gene, die zuvor nicht in Zusammenhang 

mit Krebs oder AML/MDS gebracht wurden. Bei 

43 der in 15 der 32 CNA-Regionen identifizierten 

Genen zeigte sich gegenüber nicht veränderten 

Zellen eine signifikante Änderung der mRNA- 

Expression, deren Beteiligung an der AML- 

Pathogenese nun geklärt werden kann. 

Eine Klassifikation in vorteilhafte, neutrale 

und nachteilige zytogenetische Kategorien 

nach CALGB 1 ermöglichte erwartungsgemäß 

eine Prognose hinsichtlich des Gesamt- und 

progressionsfreien Überlebens. In Patienten 

mit normaler Cytogenetik ermöglichte die 

Gesamtzahl an CNAs dagegen keine entsprechende 

Aussage. 

Identifikation von Translokationen 

und Genmutationen 


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Es wurden 23 zytogenetisch definierte balancierte 

Rearrangements identifiziert, die in einem 

Viertel der Metaphasechromosomen von 22 

Patienten mit nicht-komplexen Karyotypen 

auftraten. Mit Hilfe der SNP-Arrays wurden 

die CNA-Regionen identifiziert, die an den 

Bruchstellen der Rearrangements liegen. Diese 

(t(15;17) (q22;q21), und eine mit inv(16) (p13q22) 

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+CNA 

+UPD 

10% (8) 

Normaler Karyotyp Anomaler Karyotyp 

+CNA 

+UPD 

1% (1) -CNA 

+UPD 

5% (4) 

-CNA 

-UPD 

27% (23) 

-CNA +CNA 

+UPD +UPD 

1% (1) 1% (1) 

deuten darauf hin, dass die Rearrangements 

im Gegensatz zu zytogenetischen Befunden 

nicht balanciert zu sein scheinen. Zudem wurde 

ein Deletionsendpunkt identifiziert, der sich an 

einer verbreiteten Translokations-Bruchstelle 

im NUP98-Gen auf Chromosom 11p15 befand, 

obgleich bei dem betroffenen Patienten keine 

zytogenetischen Translokationen gefunden 

worden waren. Kryptische Translokationen des 

NUP98- und NSD1-Gens (5q35.3) wurden bereits 

zuvor für AML beschrieben, diese können bei 

zytogenetischen Untersuchungen übersehen 

werden 16-17 . Daher screenten wir in der Probe 

nach solchen Translokationen und fanden mittels 

RT-PCR ein NUP98-NSD1-Fusionstranskript 

der Exons 12 bzw. 6, aber nicht sein reziprokes 

Gegenstück. Beim Screening zusätzlicher 179 

AML-Proben fanden sich zwei weitere Proben 

mit kryptischen Fusionstrans kripten. 

Wiederauftretende CNA-Region in ALL-Genomen 

enthalten oft mutierte Gene, die auch 

in Proben ohne Veränderungen der Kopienzahl 

verändert sind. Um zu überprüfen, ob dieses 

Phänomen auch bei AML auftritt, wurde eine 

fokale CNA auf Chromosom 12p12.3 untersucht, 

die in drei AML-Patienten auftrat. Dieser Chromosomenbereich 

enthält das ETV6-Gen, das 

in AML-Patietenen oft mutiert und transloziert 

vorliegt 19-20 . Tatsächlich enthielten drei von 180 

Proben nicht-synonyme SNP-Varianten des 

Gens (P4A, R105Q, and R202Q) in Abwesenheit 

einer CNA. Die Analyse gesunder Haut-DNA, 

für die allerdings nur Probenmaterial eines 

Patienten zur Verfügung stand, bestätigte, dass 

R105Q eine erworbene, zuvor nicht beschriebene 

Mutation ist. 

+CNA 

-UPD 

22% (19) 

-CNA 

-UPD 

23% (20) 

Partielle uniparentale Disomie 

+CNA 

-UPD 

10% (9) 

Abb. 2: Genetische Veränderungen in AML-Genomen. Die Grafik (aus [1]) zeigt den relativen 

Anteil von AML-Proben mit anomalem (rot, n=20) und normalem (weiß, n=36) Karyotyp 

mit (+) sowie ohne (–) CNAs und UPDs, Details siehe Text. 

Mit Hilfe unabhängig voneinander, an unterschiedlichen 

Stellen vom selben Patienten 

entnommener (paarweiser) normaler und 

Tumor-DNA konnten in Tumor-Proben mit 

SNP-LOH (loss of heterogosity – eine Allel- 

Imbalance, die auf den Verlust eines der Allele 

oder die erhöhte Kopienzahl eines der Allele 

zurückgeht) identifiziert werden. Ein LOH in 

Abwesenheit einer CNA entspricht dabei einer 

UPD. Es wurden in sieben der untersuchten 

86 Proben acht UPD-Regionen identifiziert. 

Diese traten gehäuft in zytogenetisch normalen 

AML-Genomen auf (15% vs. 3.8%). Alle 

UPD-Regionen dehnten sich bis zum Ende des 

betroffenen Genoms aus und variierten in der 

Größe (11-95 Mb). 

Fazit 

Zusammengenommen zeigen die ermittelten 

Ergebnisse, dass AML-Genome – zumindest 

bei der hier erzielten Auflösung von 35K – nicht 

inherent instabil zu sein scheinen. Auch zeigte 

sich eine bemerkenswerte Heterogenität der 

in jedem AML-Genom mutierten Gene, wobei 

in dieser Studie nicht die für die Pathogenese 

ebenfalls potentiell relevante DNA-Methylierung 

erfasst wurde. Da sich in den meisten 

der untersuchten AML-Genome nur eine 

geringe Zahl erworbener CNAs zeigte, steht 

zu vermuten, dass mutierte Gene in diesen 

Regionen eine wichtige Rolle bei der AML- 

Pathogenese spielen. Die in sehr kleinen CNAs 

auftretenden Gene wie etwa STAG2, PRMT2, 

USP10 oder C8orf4 eignen sich hervorragend, 

um diese Arbeitshypothese zu überprüfen. 

Denn bisher wurde keines dieser mittels des 

hier vorgestellten Genom-weiten hochaufgelösten 

Genom-Screening identifizierten Gene 

mit der AML-Pathogenese in Zusammenhang 

gebracht. AML-Genome die in Folgestudien 

mit der hier präsentierten Identifizierungs/ 

Validierungsstrategie untersucht werden, 

dürften zur Etablierung eines umfassenden 

Kataloges von Genkandidaten führen, die potentiell 

zur AML-Pathogenese beitragen. 

Obgleich in der vorliegenden Studie zahlreiche 

in anderen Studien 6, 8, 10-12 entdeckte große 

CNA-Regionen bestätigt werden konnten, 

gibt es auch zahlreiche Diskrepanzen, die 

sich im Wesentlichen auf drei grundlegende 

Unterschiede im experimentellen Design 

zurückführen lassen. Erstens, der eingesetzte 

SNP-Array hat eine vier- bis zehnfach höhere 

Auflösung als die in früheren Studien eingesetzten 

Plattformen. Es wurden durchgehend 

paarweise Tumor- und Kontrollproben desselben 

Patienten eingesetzt. Drittens: Alle identifizierten 

kleinen CNAs, die naturgemäß eine 

außerordentlich hohe Rate an Falsch-positiven 

aufweisen, wurden mit einer unabhängigen, 

orthogonalen Plattform (RocheNimbleGen) 

validiert. Dies erlaubte es eindeutig die erworbenen 

somatischen CNA und UPD-Regionen 

in AML-Genomen von erblichen CMVs zu unterscheiden, 

was zuvor ohne Validierung und 

Einsatz paarweiser Proben nicht möglich war. 

CNAs und UPD sind danach – im Gegensatz 

zu früher publizierten Ergebnissen – bei der 

AML nicht so häufig wie bei ALL, ein starkes 

Argument, noch höherauflösende genomische 

Studien durchzuführen, um die an der 

AML-Pathogenese beteiligten Genmutationen 

systematisch zu katalogisieren und funktionell 

zu charakterisieren. Dafür empfiehlt sich 

eine Kombination existierender Plattformen 

wie die traditionelle Zytogenetik mit FISH, 

SNP-Arrays, Array-CGH und gezielten Next- 

Generation-Sequencing-Verfahren. 

Literatur 

[1] Walter MJ, Payton JE, Ries RE, Shannon WD, Deshmukh H, 

Zhao Y, Baty J, Heath S, Westervelt P, Watson MA, Tomasson 

MH, Nagarajan R, O‘Gara BP, Bloomfield CD, Mrózek K, Selzer 

RR, Richmond TA, Kitzman J, Geoghegan J, Eis PS, Maupin R, 

Fulton RS, McLellan M, Wilson RK, Mardis ER, Link DC, Graubert 

TA, DiPersio JF, Ley TJ. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Aug 

4;106(31):12950-5 

Eine umfassende Literaturliste kann beim Autor angefordert werden 


Dr. Burkhard Ziebolz 

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82377 Penzberg 

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MicroRNAs: Hauptakteure 

in der Metastasierung 

Raffaele Baffa MD 1,5 , Matteo Fassan MD 2 , Anne Rosenberg MD 3 , Carlo M. Croce MD 4 , 1 Thomas Jefferson 

University, Kimmel Cancer Center, Philadelphia, 2 University of Padova, 3 Thomas Jefferson 

University, Kimmel Cancer Center, Philadelphia, PA, 4 Comprehensive Cancer Center, Ohio State 

University, Columbus OH. 5 aktuelle Anschrift: Medimmune, Gaithersburg, MD. 

Metastasierender Krebs ist das Ergebnis einer Reihe komplexer Prozesse, die zahlreiche Veränderungen 

auf molekularer Ebene umfassen.Die Entdeckung nicht-codierender microRNAs (miRNAs), 

die die Genexpression durch mRNA-Abbau oder Translationshemmung modulieren, hat das 

Verständnis dieser Komplexität ein gutes Stück vorangebracht. Verschiedenen Studien zufolge 

können miRNAs als Tumorsuppressoren und auch als Onkogene wirken,und ihr Nachweis könnte 

von diagnostischer und prognostischer Relevanz sein.Die Ergebnisse aktueller in vitro- und Expressionsprofilierungsstudien 

zeigen, dass spezifische miRNAs direkt an der Metastasierung beteiligt 

sind und sowohl als Diagnose-Werkzeug zur Charakterisierung metastasierenderTumore als auch 

als Biomarker für das Therapiemonitoring geeignet erscheinen. Daneben könnten sie künftig als 

neuartige und gezielte Arzneimittel eingesetzt werden. 

Trotz jahrelanger Anstrengungen, Biomarker 

für Krebs beim Menschen zu identifizieren, hat 

kein Biomarker solch ein Aufsehen erregt wie 

die microRNAs. microRNAs (oder miRNAs) sind 

eine Familie endogener, 19 bis 25 Nucleotide 

kleiner, nicht-codierender RNA-Genprodukte, 

die die Genexpression modulieren, indem sie 

gezielt an mRNA binden 1,2 . Im Menschen ist 

miRNA-Aberration ein Kennzeichen von Krankheit, 

auch für Krebs. Tatsächlich werden miRNAs 

gewebespezifisch exprimiert, und Änderungen 

der miRNA-Expression in einem Gewebe kann 

mit Krankheitszuständen korreliert werden. 

Die in der Evolution konservierten miRNAs 

sind an grundlegenden biologischen Vorgängen 

beteiligt, unter anderem dem Zellzyklus, der 

Differenzierung, Entwicklung, dem Stoffwechsel 

und der Alterung 1,2 . Das menschliche Genom 

enthält schätzungsweise 1.000 miRNA-Gene, 

von denen angenommen wird, dass sie ein 

Drittel aller Gene regulieren 1,2 . Oft befinden sich 

miRNA-Gene in mit Krebs assoziierten genomischen 

Regionen, wie etwa Minimal regions 

of amplification (MAR), Loss of heterozygosity 

(LOH), fragilen Stellen und üblichen Bruchstell- 

Regionen in oder in der Nähe von Onkogenen 

oder Tumorsuppressorgenen 3 . 

MiRNAs werden zunächst von der RNA-Polymerase 

II als lange, primäre Transkripte synthetisiert, 

die nachfolgend mit Caps versehen und 

polyadenlyliert werden. Diese Transkripte werden 

von der Drosha RNase III-Endonuclease in 

ca. 70 Nucleotide lange Haarnadel-prä-miRNAs 

prozessiert und durch Ran-GTP/Exportin aus 

dem Zellkern transportiert 5 . Prä-miRNAs werden 

im Zytoplasma von Dicer weiterbearbeitet, bis 

ein 19 bis 25 Nucleotide langer Doppelstrang entstanden 

ist. Ein Strang davon wird in den RNAinduced 

silencing complex (RISC) aufgenommen 

und verwendet, um die Expression von Zielgenen 

zu regulieren. Die Bindung von miRNAs an die 

3’-untranslatierte Region (UTR) der mRNA mit 

perfekter oder fast-perfekter Sequenzkomplementarität 

induziert den mRNA-Abbau. Dagegen 

führt eine nicht-perfekte Komplementarität 

oft zur Translationshemmung. Der aus sieben 

Tab. 1: Repräsentative miRNAs, die in metastatischem Krebs abberrant exprimiert werden, 

und ihre bedeutendsten putativen Gene 

miRNA Locus Expression in Metastasen Targetgene Referenzen 

miR-10b 2q31.1 Hochreguliert HOXD10 [4, 14] 

miR-21 17q23.1 Hochreguliert 

PDCD4, PTEN, RECK, 

TPM1, MASPIN 

miR-373 19q13.41 Hochreguliert CD44 [12] 

miR-520c 19q13.41 Hochreguliert CD44 [12] 

miR-520c 19q13.41 Hochreguliert CD44 [12] 

miR-34c 11q23.1 Herunterreguliert E2F3 [13] 

miR-148a 7p15.2 Herunterreguliert TGIF2 [13] 

miR-200 family 1p36.33 12p13.31 Herunterreguliert ZEB1, SIP1 [11] 

miR-205 1q32.2 Herunterreguliert ZEB1, SIP1 [11] 

miR-335 7q32.2 Herunterreguliert SOX4, TNC [10] 

bis acht Nucleotiden bestehende Seed-Strang 

von miRNAs am 5’-Ende ist entscheidend für 

die wirksame Zielsteuerung, und miRNAs mit 

ähnlicher Seed-Sequenz können – zumindest 

theoretisch – die Expression einer ähnlichen 

Untergruppe von Genen regulieren 1-3 . 

In in vitro-Studien konnte gezeigt werden, 

dass eine aberrante Expression von miRNAs zur 

Karzinogenese beiträgt, indem die Expression 

von Proto-Onkogenen angekurbelt und jene 

von Tumorsuppressorgenen gehemmt wird. 

Die Deregulierung solcher “Oncomirs” ist bei 

verschiedensten Krebserkrankungen beobachtet 

worden, und die miRNA-Expression wurde 

mit molekularbiologischen Charakteristika 

korreliert, was belegt, dass miRNA-Signaturen 

dazu dienen können, die biologischen und klinischen 

Eigenschaften von Krebs zu beschreiben 1-3 . 

Zudem zeigte sich in vivo auch ein Zusammenhang 

zwischen der miRNA-Expression und der 

Entstehung experimenteller Tumore 1-3 . Obgleich 

miRNAs aber eine klare Rolle bei der Onkogenese 

spielen, ist der Beitrag, den miRNAs zur 

bösartigen Entartung humaner Tumore leisten, 

erst unlängst untersucht und charakterisiert 

worden 4-14 . 

miRNAs und Metastasierung 

Metastasierender Krebs ist die Haupttodesursache 

bei Patienten mit soliden Tumoren. Die 

Ausprägung des metastatischen Phänotyps ist 

ein multifaktorieller Prozess und das Ergebnis 

der unerklärten Wechselwirkung molekularer 

Faktoren wie dem epigenetischen Silencing, 

von Transkriptionsfaktoren, Signalwegen und 

Wachstumsfaktoren. Bislang wurde die Rolle 

des metastatischen Ausstreuens falsch eingeschätzt. 

Tatsächlich sind bereits kleine Tumore in 

frühem Stadium in der Lage, Mikrometastasen 

zu bilden, die sich über den ganzen Körper ausbreiten 

können, aber selten zu soliden, klinisch 

relevanten Sekundärtumoren führen. 

Während der vergangenen Jahrzehnte wurden 

molekulargenetische Studien durchgeführt, 

um Gene und Genprodukte zu untersuchen, die 

den Metastasierungsprozess antreiben. Gleichwohl 

ist der prognostische und diagnostische 

Wert dieser Genveränderungen angesichts der 

Heterogenität des Metastasierungsprozesses 

und der fokalen Natur der Veränderung von 

Onkogenen und Tumorsuppressorgenen bislang 

begrenzt. In jüngerer Zeit häuft sich die Zahl 

der Berichte, die miRNAs eine wichtige Rolle als 

Promotoren und Suppressoren der Krebsprogression 

und der Metastasierung zusprechen 

(vgl. Tabelle). Dies ist nicht nur beachtenswert, 

weil sie ein neues Untersuchungsfeld eröffnen, 

sondern auch weil mit ihnen neue Pathways 

offengelegt wurden, die in die Metastasierung 

involviert sind. 

Der erste dazu von Ma et al. veröffentlichte 

Bericht 4 beschrieb die unterstützende Rolle 

von miR-10b bei der Invasion und Metastasierung 

von Brustkrebs. Während miR-10b in 

12 | 10. Jahrgang | Nr. 5/2009 LABORWElT 

[6-9, 14]

den meisten Fällen von Brustkrebs gegenüber normalem Brustgewebe 

herunterreguliert war, wurde die microRNA in rund 50% aller Fälle von 

metastasierendem Brustkrebs überexprimiert. In vitro hatte die ektopische 

Expression von miR-10b keinen Effekt auf die Zellproliferation, vergrößerte 

aber die Fähigkeit zur Migration und Invasivität. Darüber hinaus zeigten 

in vivo-Studien, dass miR-10b-überexprimierende Tumore sich invasiv 

verhielten und eine hochgradige Vaskularisierung zeigten. Das hochregulierte 

miR-10b hemmt den Translationsprozess der mRNA, die das 

Homöobox-D10-Protein (HOXD10) codiert, was zur verstärkten Expression 

des wohlbekannten und gut charakterisierten pro-metastatischen 

Gens RHOC führt. Weiter gestützt wurden diese Daten dadurch, dass die 

HOXD10-Expression in Brusttumoren zunehmender Malignizität immer 

mehr verschwindet. Allerdings konnte die Assoziation von miR-10b mit der 

Brustkrebs-Metastasierung in einer großen Zahl von Fällen von Brustkrebs 

im Frühstadium nicht bestätigt werden 5 . 

Deregulierung der miRNA-Expression 

Der intiale Befund der Deregulation der miRNA-Expression bei metastasierendem 

Krebs konnte auch in weiteren Fällen demonstriert werden. Zum 

Beispiel zeigte sich, dass die weitverbreitete, bei Krebs überexprimierte 

miRNA miR-21 am Erwerb der invasiven und metastatischen Eigenschaften 

von Darmkrebs- und Brustkrebs-Zelllinien beteiligt ist, indem diese gezielt 

auf zahlreiche Tumorsuppressorgene wirkt, wie etwa PTEN, PDCD4, 

RECK, TPM1 und MASPIN 6,7,14 . Zudem wurde die miR-21-Überexpression 

in Zusammenhang mit fortgeschrittenen klinischen Stadien und der 

Lymphknoten-Metastasierung bei Brustkrebs und dem hepatozellulären 

Karzinom gebracht 8,9 . Ähnlich wie miR-10b beeinträchtigten auch miR-373 

und miR-520c nicht die Zellproliferation, aber unterstützten in vitro die 

Migration und Invasion von Krebs-abgeleiteten Zelllinien 12 . Diese beiden 

miRNAs besitzen ähnliche Seed-Sequenzen, was nahelegt, dass sie einen 

überlappenden Satz von Gen-Targets regulieren könnten. Tatsächlich 

erwies sich CD44 – das einen Zelloberflächenrezeptor für Hyaluronsäure 

(Hyluronan) codiert – unter neun gemeinsamen potentiellen Gentargets 

als direktes Ziel beider miRNAs. In Krebsproben war miR373 hochreguliert, 

wenn die Tumoren Lymphknoten-Metastasen aufwiesen, und die miR- 

373-Expression zeigte eine inverse Korrelation zur CD44-Expression. 

Im Gegensatz zu anderen Studien, identifizierten Tavazoie et al. 10 erstmals 

miRNAs mit Metastasen-supprimierenden Eigenschaften. Beim 

Vergleich metastatischer Absiedlungen mit unselektierten parentalen 

Brustkrebszellen fanden sie, dass miR-335, miR-126 und miR-206 in den 

metastatischen Proben durchgehend herunterreguliert. Untermauert 

werden diese Daten dadurch, dass eine niedrige Expression von miR-335 

und miR-126 mit einem geringen Metastasen-freien Überleben in klinischen 

Proben korrelierte. In vitro-Analysen zeigten, dass miR-335 durch 

Abzielen auf die Transkriptionsfaktoren SOX4 und TNC (TCN codiert 

Tenascin, eine Komponente der extrazellulären Matrix) als Metastasen- 

Suppressor wirkt. 

Gregory und Mitarbeiter 11 fanden, dass alle fünf Mitglieder der miRNA- 

200-Familie (miR-200a, miR-200b, miR-200c, miR-141 and miR-429) 

sowie miR-205 auf die E-Cadherin-Repressoren ZEB1 und SIP1 zielen. 

Außerdem wurde gezeigt, dass diese miRNAs in solchen Zellen merklich 

herunterreguliert waren 11 , die eine epitheliale-mesenchymale Transition 

(EMT) durchlaufen hatten, der offenbar eine frühe Beteiligung der 

miRNA-Deregulierung beim Annehmen des metastatischen Phänotyps 

zugrundeliegt. Eigentlich ist die EMT ein Prozess, bei dem epitheliale 

Tumorzellen durch extrazelluläre Zytokine wie TGF-b oder intrazelluläre 

Regiesignale, wie etwa onkogenes Ras, stimuliert werden, ihre epitheliale 

Polarität zu verlieren und stattdessen mesenchymale Phänotypen mit 

stärkeren Migrations- und Invasions-Eigenschaften anzunehmen. Aus 

diesem Grund wird EMT als der initiierende und entscheidende Schritt 

im Metastasierungsprozess betrachtet. Diese Befunde wurden durch vier 

andere unabhängige Studien bestätigt 15 . 

Interessanterweise wird die Expression von miRNA-Genen, genau 

wie bei Protein-codierenden Genen, von der epigenetischen Regulation 


Porvair rose ad Laborwelt DE exb:Layout 1 11/2/09 11:07 

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Abb. 1: Im Zuge der Metastasierung veränderte microRNAs, die als spezifische therapeutische 

Targets dienen könnten 

beeinflusst. Lujambio et al. 13 identifizierten 

bei der Untersuchung der Rolle des mit der 

DNA-Methylierung assoziierten Silencings von 

Tumorsuppressor-miRNAs in Metastasen ein 

spezifisches metastatisches miRNA-Hypermethylierungsprofil. 

Schließlich fanden wir auf der Suche nach 

einer spezifischen miRNA-Expressions-Signatur 

für den metastatischen Phänotyp solider Tumore 

mit Hilfe vergleichender Microarray-Analysen 

von Primärtumoren und davon abgeleiteten 

Metastasen eine umfassende miRNA-Signatur. 

Diese besteht aus 15 über- und 17 unterexprimierten 

miRNAs und vier verschiedenen organspezifischen 

miRNA-Signaturen 14 . 

Einige andere Hauptaspekte müssen noch 

untersucht werden, darunter der Einfluss 

der metastatischen Mikroumgebung auf die 

miRNA-Expression der Tumorzelle. Gleichwohl 

bestätigen die Berichte, dass spezifische mi- 

RNA-Gene direkt an der Krebsmetastasierung 

beteiligt sind – und unterstreichen damit die Bedeutung 

dieser neuen Klasse nicht-codierender 

RNAs bei der Translation von Biomarkern zur 

Diagnose, Prognose und für die Einschätzung 

des Therapieansprechens bei metastatischem 

Krebs. 

miRNAs – von der Laborbank 

zum Krankenbett 

Das miRNA-Profiling eröffnet die Unterscheidung 

normaler und pathologischer Läsionen 

und die Identifikation von Genexpressionssignaturen, 

die mit bestimmten Krebsphänotypen 

(wie dem metastatischen) assoziiert sind 3 . Es 

wurde bereits gezeigt, dass aberrante miRNA- 

Expressions-Signaturen in metastatischen 

Krebs involviert sind 9,14 , und eine einfache 

Profilierungsmethode könnte helfen, Krebspatienten 

zu identifizieren, die wahrscheinlich 

Metastasen oder Rückfälle entwickeln. 

Weil von diversen Organen abgeleitete 

Metastasen besondere organspezifische 

miRNA-Signaturen zeigen 14 , könnte die miRNA- 

Expressionsanalyse auch als neuartige, einfache 

Profilierungsmethode eingesetzt werden, um 

das Ausgangsorgan zu identifizieren, zum Beispiel 

bei Metastasen unbekannten Ursprungs. 

Auf diese Art und Weise repräsentieren genomweite 

Profilierungsansätze – ergänzt durch 

Funktionsstudien, die die Über- bzw. Unterexpression 

von miRNAs beinhalten – den Ansatz, 

der am wahrscheinlichsten zu Fortschritten im 

jungen Forschungsfeld der nicht-codierenden 

RNAs führen wird 1-3 . Dazu kommt, dass miRNAs 

– im Gegensatz zu mRNAs – in vivo langlebig 

und in vitro stabil sind, was ein entscheidender 

Vorteil im klinischen Rahmen sein könnte und 

die Analyse Formalin-fixierter, Paraffin-eingebetteter 

(FFPE) Proben gestattet 14 . Diverse Berichte 

haben bereits eine hohe Reproduzierbarkeit und 

Genauigkeit des miRNA-Expressions-Profilings 

in archivierten FFPE-Proben des Menschen belegt. 

In diesem Zusammenhang muss allerdings 

betont werden, dass auch wenn FFPE-Proben als 

unverzichtbares Werkzeug für die Biomarker- 

Entdeckung und – Validierung betrachtet 

werden, diese andererseits nicht immer kompatibel 

mit modernen Genomics-Technologien 

sind wie etwa Genexpressions-Arrays, weil die 

mRNA während der Fixierung und Bearbeitung 

abgebaut wird. Das Öffnen der Histopathologie- 

Archive gut annotierter FFPE-Proben für die 

miRNA-Expressionsprofilierung verspricht eine 

neue Ära der systematischen molekularen Begutachtung, 

die sich durch eine fortgeschrittene 

histopathologische und klinische Charakterisierung 

der Proben auszeichnet. 

Aus therapeutischer Sicht wird ein zunehmendes 

Verständnis der molekularen Rolle von 

miRNAs im Metastasierungsprozess maßgeblich 

zur Identifikation alternativer, therapeutisch 

interessanter molekularer Pathways beitragen. 

Darüber hinaus empfehlen sich miRNAs per se 

durch ihre Stabilität als neue attraktive Therapeutika. 

Dazu kommt, dass miRNA-basierte 

shRNAs die Genexpression starker inhibieren 

als traditionelle Haarnadel-shRNAs 1-3 . 

Eine Sequenz-spezifische Hemmung der 

miRNAs kann mit chemisch stabilisierten 

und optimierten Antisense-Oligonucleotiden 

erzielt werden. Außerdem wurde die Funktion 

einer neuen Klasse chemisch modifizierter, mit 

Cholersterin konjugierter Antisense-RNAs, der 

„Antagomirs“, als spezifische und wirksame 

Silencer endogener miRNAs in Mäusen nachgewiesen 

1-3 . 

Obgleich spannend, muss eine miRNAbasierte 

Gentherapie von metastasierendem 

Krebs erst den Nachweis erbringen, dass 

Targets hochwirksam gehemmt und das 

Patientenüberleben bei minimaler Toxizität 

signifikant verlängert werden. Darüber hinaus 

erfordert die Entwicklung miRNA-basierter 

Therapien einen wirksamen Transport zum 

Wirkort. 

Weitere Funktionsstudien sind essentiell, 

um die Bedeutung der miRNA-Expression in 

Metastasen weiter aufzuklären. Nichtsdestotrotz 

hat die miRNA-Revolution begonnen 

und wird zweifellos die künftige Behandlung 

metastatischer Patienten beeinflussen. 

Literatur 

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A., Zanetti, K.A., Ye, Q.H., Croce, C.M., Tang, Z.Y., Wang, X.W., 

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Cespedes, M., Blanco, D., Montuenga, L.M., Rossi, S., 

Nicoloso, M.S., Faller, W.J., Gallagher, W.M., Eccles, S.A., 

Croce, C.M., Esteller, M., Proc Natl Acad Sci USA 105 (2008), 

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J.P., Gardiman, M., Rugge, M., Gomella, L.G., Croce, C.M., 

Rosenberg, A., J Pathol. 219(2):214-221 (2009). 

[15] Korpal, M., Kang, Y., RNA Biol 5 (2008), 115-119. 


Prof. Carlo M Croce 

Ohio State University 

1082 Biomedical Research Tower 

460 W. 12 th Avenue, Columbus, OH 43210 

Tel.: +1-(0)614-292-4930 

Fax: +1-(0)614-292-3558 

carlo.croce@osumc.edu. 



Brustkrebs und 

Metastasierung – Vorteile 

einer Individualtherapie 

Ralf Hass, AG Biochemie und Tumorbiologie, Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe, MHH 

Brustkrebs als primär maligne Entartung im Brustdrüsengewebe ist bei Frauen die nach wie vor 

häufigste Tumorerkrankung und auch krankheitsbedingte Todesursache. Sehr viel seltener wird 

Brustkrebs auch bei Männern diagnostiziert. Bei den histopathologisch unterschiedlichen Brustkrebsarten 

(etwa ductal, lobulär, medullär, tubulär) und der Identifizierung des Rezeptorstatus 

(Östrogen- und Progesteronrezeptor sowie Her2/neu) auf den Tumorzellen gibt es derzeit eine 

entsprechende Auswahl an therapeutischen Ansatzformen wie Chemo-, Hormon-, Antikörperund 

Strahlentherapie. Neben diesen relativ unspezifischen Mitteln stellt die Entwicklung und 

der zunehmende Einsatz kleiner inhibitorischer Moleküle – etwa zum Blockieren wachstumsstimulatorischer 

intrazellulärer Signalkaskaden – einen deutlich fokussierteren molekularen Therapieansatz 

dar. Allerdings sind diese Signalwege nicht unbedingt spezifisch für Brustkrebszellen, 

sondern eher präsent in allen hochproliferativen Geweben im Körper, wie in den verschiedenen 

Epithelien. Aufgrund der Heterogenität von Brustkrebserkrankungen sind diese pauschalen 

Therapieschemata daher nicht immer erfolgreich und verfehlen teilweise gänzlich die erhoffte 

Wirkung. Durch eine generelle Proliferationsinhibition wird natürlich auch die Regenerationsfähigkeit 

wichtiger Gewebe stark eingeschränkt, was die Gewebshomoöstase und das notwendige 

metabolische Gleichgewicht stört und somit zu extrem unangenehmen Nebenwirkungen bis hin 

zur ungewollten Generation von Kollateralerkrankungen führen kann. 

Hier ließen sich – durch die ausgedehnte Testung 

patientenspezifischer Tumorzellen aus 

Tumorbiopsien ex vivo mit Hilfe standardisierter 

zellbasierter Assays – gezieltere Therapieansätze 

eher auf individueller Basis entwickeln 

um damit ein optimiertes Therapieschema für 

jeden einzelnen Brustkrebs zusammenstellen 

zu können. Für einen derart individualisierten 

Ansatz ist es gelungen, eine Technologie zur 

Anzüchtung von Brustkrebsprimärkulturen zu 

entwickeln1 , wobei Brustkrebszellen mittlerweile 

länger als zwei bis drei Jahre permanent 

aus einem Tumorgewebe gewonnen werden 

können. Um die Reproduzierbarkeit dieser 

individuellen Brustkrebsprimärkultur-Technologie 

zu gewährleisten, haben eine Reihe von 

molekularen Untersuchung zur Expression bestimmter 

Zelloberflächenrezeptoren und etwa 

zur Expression des Alterungsmarkers Senezenzassoziierte-b-Galactosidase 

(SA b-gal) und 

zur Telomeraseaktivität gezeigt, dass die aus 

dem Tumorgewebe ständig proliferierenden 

„human breast cancer-derived epithelial cells“ 

185x32mm_SW_dt_oR 30.01.2008 19:41 Uhr Seite 1 

(HBCEC) im Lauf der Jahre ihre ursprünglichen 

zellbiologischen und funktionellen Eigenschaften 

nicht signifikant verändern, sofern 

nicht metastasenähnliche Aktivierungen wie 

die epithelial-mesenchymale Transition (EMT) 

auftreten2 . Darüber hinaus zeigen die Primärkulturen 

aus Brustkrebsgewebe verschiedener 

Patienten erwartungsgemäß Unterschiede in 

der Reaktion auf diverse chemotherapeutische 

Agenzien, und zwar nicht nur zwischen den individuellen 

HBCEC-Populationen von verschiedenen 

Spendern, sondern auch gegenüber einer 

Primärzellkultur aus nicht-tumorigenem – also 

normalem Brustgewebe2 . Diese Technologie zur 

Anzucht individueller Brustkrebsprimärkulturen 

könnte daher einerseits dazu dienen, individuelle 

patientenorientierte Therapieschemata zu 

entwickeln und zu optimieren. Andererseits 

könnte sie im pharmazeutischen Bereich eine 

primärkulturbasierte Screening-Plattform zur 

Identifizierung von brustkrebsspezifischen 

Biomarkern und zum Testen neuer Therapeutikagruppen 

bieten. 

KRAEBER GMBH & CO 

P H A R M A Z E U T I S C H E R O H S T O F F E 

WIR SIND DER SPEZIALIST FÜR BLUTFRAKTIONIERUNGEN 

Da eine Individualtherapie aber noch nicht 

etabliert ist, bleiben die bislang anwendbaren, 

relativ unspezifischen Brustkrebstherapien 

mit entsprechenden Nebenwirkungen 

zunächst das Mittel der Wahl. Dabei ist der 

nach wie vor empfehlenswerteste Ansatz die 

frühestmögliche Diagnose von Brustkrebs mit 

unmittelbarer operativer Tumorentfernung 

und nachfolgender Therapie. Allerdings ist der 

Erfolg eines therapeutischen Ansatzes neben 

der Patientenverträglichkeit auch limitiert 

durch die Art des Tumors und eine mögliche 

Infiltration von Lymphknoten. Doch auch ohne 

diagnostizierbare Lymphknotenmetastasen 

ergeben sich Risiken eines möglichen und nach 

heutigen Standards schwer oder nicht mehr 

therapierbaren Tumorrezidivs. 

Disseminierte Tumorzellen 

Neben Mikrometastasen können teilweise parallel 

zu einem Brustprimärtumor sogenannte 

disseminierte Tumorzellen (DTCs) identifiziert 

werden, die z.B. im Knochmark, aber auch in 

anderen Geweben wie dem peripheren Blut oder 

den Lymphknoten assoziiert sind. Diese DTCs 

bleiben nach einer operativen Entfernung des 

Primärtumors im Körper erhalten und werden 

für ein Wiederauftreten, also ein Rezidiv der 

Tumorerkrankung in Form von Gewebsmetastasen 

verantwortlich gemacht 3 . Wieso dauert 

es dann aber eine lange Zeit – teilweise Jahre 

, oder bei östrogenrezeptor-positiven Brusttumoren 

auch Jahrzehnte, bis sich aus solchen 

DTCs möglicherweise Organmetastasen bilden? 

Offensichtlich ist die Metastasierung ein aus 

mehreren Entwicklungsschritten bestehender 

zellbiologischer Prozess, der in unterschiedlichen 

Tumoren (z. B. Kolonkarzinom im Gegensatz zum 

Mammakarzinom) mit unterschiedlicher Kinetik 

abläuft, wobei möglicherweise auch „schlafende“ 

Tumorzellen auf entsprechende Trigger hin 

erst aktiviert werden. Ebenso kann eine Tumorgenese 

oder die Generation metastatisch aktiver 

Tumorzellen auch im Rahmen von Fehlsteuerungen 

eines reversiblen Entwicklungsprozesses, 

also einer Retrodifferenzierung oder Verjüngung 

eines Entwicklungsstands entstehen 4 . 

Das Potential für DTCs zur Metastasierung 

kann initial verstärkt werden durch Signale, die 

auch eine epithelial-mesenchymale Transition 

(EMT) induzieren. Diese zellbiologische Veränderungen 

von einem Zelltyp in einen anderen 

mit völlig neuen metabolischen Eigenschaften 

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Serum, Plasma, Albumin, Hemoglobin, Hemin, Hematoporphyrin, Thrombin und Lohnherstellung.


wird u.a. kontrolliert durch aberrante Aktivität 

bestimmter Transkriptionsfaktoren wie TWIST1, 

SNAI1 und SNAI2. Ebenso favorisieren Modulatoren 

von Wachstumsfaktorrezeptor-Signalen 

wie Metadherin eine EMT. Auf transkriptioneller 

Ebene wird eine Suppression der beiden miR-126 

und miR-335, zwei nicht kodierende RNAs, mit 

EMT und der Initiation von metastatischem 

Wachstum in Verbindung gebracht. Für eine 

derartige zellbiologische Veränderung wie der 

EMT, aber auch für eine Adaptation an metastatische 

Bedingungen müssen die Tumorzellen 

entsprechend flexible Differenzierungsfähigkeiten 

entwickeln – also Eigenschaften, die üblicherweise 

Vorläufer- oder Stammzellen besitzen. 

Obwohl es Hinweise auf Zellpopulationen mit 

stammzellähnlichen Eigenschaften in Brustkrebsgewebe 

und -primärkulturen gibt 2 und 

auch eine Retrodifferenzierung reifer Brustepithelzellen 

zurück in Vorläuferstadien denkbar 

ist 4 , fehlen bislang ausreichend experimentelle 

Nachweise auf Einzelzellebene, um eine Beteiligung 

von Tumorstammzellen an einer EMT 

oder Metastasierung durch Differenzierung 

zu belegen. EMT kann in Langzeitkulturen von 

Brustkrebsbiopsien beobachtet werden und 

zeigt eindrucksvoll, wie sich die Morphologie 

und parallel dazu natürlich die Funktionalität der 

Tumorzellen durch die Expression völlig neuer 

Zellmarker verändert (Abb. 1). 

Von Primärzellen zu Metastasen 

Für eine erfolgreiche Metastasierung müssen 

die DTCs nach Verlassen des Primärtumorverbandes 

zunächst in der Zirkulation überleben, 

um dann an einem Zielorgan anzudocken. 

Bei disseminierten Brustkrebszellen ist diese 

sogenannte Latenzperiode sehr lang. Das 

heißt, dass die DTCs ihr Zielorgan erst finden 

müssen, um sich zunächst langsam an die neue 

Mikroumgebung des Zielorgans adaptieren zu 

können. Nachdem die DTCs ihren Stoffwechsel 

angepasst und sich dort eine neue lebensfähige 

Umgebung geschaffen haben, kann die 

Abb. 1: Lichtmikroskopische Vergrößerung einer epithelial-mesenchymalen Transition (EMT) 

von Primärkulturen während der Langzeitkultur nach 241 Tagen aus einer Gewebsbiopsie 

eines ductalen Mammakarzinoms. Auf der linken Seite des Tumorgewebes wachsen 

epitheliale Tumorzellen aus, mit der Morphologie von tumorigenen HBCEC (morphologisch 

lassen sich HBCEC und HMEC nicht differenzieren). Im Gegensatz dazu wachsen 

nach 241 Tagen bei diesem Tumor plötzlich auf der entgegengesetzten Seite des Tumorgewebes 

langgezogene stromaähnliche Zellen aus, was tumorspezifisch auftritt, da dieses 

Phänomen bei Brusttumoren anderer Patienten zu anderen Zeitpunkten auftreten 

kann. Charakterisierungsexperimente haben ergeben, dass die HBCEC auf der linken 

Seite zu 99% Cytokeratine exprimieren sowie den Oberflächenrezeptor CD44, wogegen 

diese Population CD90-negativ ist. Im Gegensatz dazu zeigen die auf der rechten Seite 

aus dem Tumorgewebe jetzt auswachsenden stromaähnlichen Zellen keine Expression 

von Cytokeratinen mehr, und die Expression von CD44 ist reduziert. Dafür exprimiert 

diese Population signifikant den Marker CD90. Diese Ergebnisse deuten daraufhin, dass 

während der Langzeitkultur des Brusttumorgewebes innerhalb einer Subkultur ein Teil 

des Gewebes funktionell verändert wird, wobei die vorher auswachsenden epithelialen 

Zellen jetzt mit einer mesenchymal-stromaartigen Morphologie und Funktionalität 

auswachsen. In der nachfolgenden Weiterkultur dieses Tumorgewebestückes setzte sich 

diese EMT fort und zeigte dann innerhalb kürzester Zeit (2 bis 3 Subkulturen) wenig bis 

keine HBCEC mehr und nur noch das Auswachsen der stromaähnlichen Zellpopulation. 

Proliferationsmaschinerie der organassoziierten 

Tumorzellen aktiviert werden, und es kommt zur 

Koloniebildung und zur Bildung von Mikrometastasen. 

Aufgrund ihres invasiven Wachstums 

infiltrieren diese Tumorzellkolonien dann das 

Wirtsorgan und bilden entsprechende Metastasen 

aus. Durch diese mehrstufigen Veränderungen 

der ursprünglichen Primärtumorzellen 

während der Adaptation ihres Stoffwechsels 

an die Mikroumgebung des zu infiltrierenden 

Organs verändern sich natürlich auch ihre zellbiologischen 

Eigenschaften, wodurch sich auch 

Modifikationen in der Sensitivität gegenüber 

Therapieansätzen im Gegensatz zum Primärtumor 

ergeben. Dies bedeutet, dass einerseits mit 

einer Chemo-, Hormon- oder Antikörpertherapie 

erfolgreich ein Primärtumor behandelt werden 

kann, diese Strategie bei Tumormetastasen aber 

vollkommen versagen kann, weil diese Zellen 

im Rahmen ihrer zellbiologischen Adaptation 

nicht mehr entsprechende Rezeptoren exprimieren 

oder sogar entsprechende Resistenzen 

entwickelt haben. Ein denkbarer Lösungsansatz 

solcher schwer oder mit derzeitigen 

Standardmethoden nicht mehr therapierbarer 

Metastasen wäre auch hier die Entwicklung 

eines individuellen Therapieschemas durch die 

Charakterisierung von metastatischen Primärkulturen 

und der Identifizierung potentieller 

metastatischer Biomarker. 

Bildung von DCTs 

Für die Metastasierung von Brustkrebszellen 

sind einige wichtige Faktoren und molekulare 

Prozesse identifiziert worden, die die Voraussetzungen 

zur möglichen Bildung von DTCs 

schaffen. Hierzu gehören u.a. die verstärkte 

Expression von Matrixmetalloproteinasen 

(bspw. MMP-1 und MMP-2), die durch erhöhte 

Enzymaktivität zu einem vermehrten Abbau 

der Extrazellularmatrix beitragen, um dadurch 

einzelnen Tumorzellen mehr Mobilität zu 

verleihen, sich aus dem Tumorzellverband zu 

lösen 5 . Weitere identifizierte Faktoren in metastatischen 

Brustkrebszellen sind die verstärkte 

Expression von Prostaglandin G/H-Synthase-2 

(COX2) sowie Epiregulin, einer der Liganden 

von epidermalen Wachstumsfaktorrezeptoren 

(EGF-Rs), zur Verstärkung des Zellwachstums 

metastasierender Tumorzellen 5 . Hierzu tragen 

auch TGFb-induzierte angiopoetische Faktoren 

bei. Gerade TGFß vermittelte Metastasierung 

in Knochengewebe konnte vor kurzem über 

multimodale mikro-PET (positron emission 

tomography) in einer Zeitkinetik mit Hilfe von 

zwei markierten Brustkrebszelllinien mit unterschiedlichen 

metastatischen Kapazitäten 

dargestellt werden 7 . Ein weiterer Faktor, der in 

metastasierenden und auch rezidivierenden 

Brustkrebszellen identifiziert wurde, ist das 

Enzym Lysyloxidase (LOX), was auch durch 

eine hypoxische Umgebung aktiviert wird. 

Bemerkenswert an diesen Faktoren ist, dass 

die meisten von ihnen auch eine wichtige Rolle 


in normalen Brustepithelien spielen, wobei 

insbesondere MMPs, EGF-Liganden und LOX 

wichtige regulatorische Funktionen während 

des Alterungsprozesses von normalen Brustepithelzellen 

übernehmen. So konnte in einem 

etablierten Alterungsmodell mit normalen 

Brustepithelzellen (HMEC) aufeinanderfolgender 

Kulturpassagen in vitro ein neuer Mechanismus 

identifiziert werden, wobei MMPs (speziell 

MMP-7) während des Alterungsprozesses von 

normalen HMEC herunterreguliert werden 

und so einen funktionellen Zusammenhang 

zwischen diesen Faktoren herstellt. Dabei lässt 

sich in jungen, proliferativ aktiven HMEC extrazellulär 

eine Co-Lokalisation von MMP-7 mit 

der Heparin-bindenden Form von EGF (HB-EGF) 

nachweisen, die über einen trimeren Komplex 

mit multistrukturellen transmembranen Heparansulfat-Proteoglycanrezeptoren 

von CD44 die 

MMP-7- katalysierte Spaltung von proHB-EGF in 

sHB-EGF (soluble HB-EGF) vermittelt und gleichzeitig 

eine sterische Assoziation zu den EGF- 

Rezeptoren ErbB1 und ErbB4 herstellt, für eine 

nachfolgende Aktivierung durch die Bindung 

von sHB-EGF an diese Rezeptoren 6 . Die daraufhin 

rezeptorvermittelte intrazelluläre Signalkaskade 

über eine Reihe von Proteinkinasen und den 

Transkriptionsfaktor Fra-1 vermittelt im Zellkern 

ein Proliferationssignal und wirkt gleichzeitig 

als Repressor für Tropoelastin, ein Substrat von 

LOX und LOX-ähnlichen Enzymen (LOXL1 bis 

LOXL5) zur extrazellulären Synthese von Elastinassoziierten 

Strukturen der Extrazellularmatrix. 

Interessanterweise werden diese Signalwege 

während der HMEC- Alterung umgekehrt. In 

seneszenten und nicht mehr proliferativ aktiven 

HMEC ist die Expression von MMP-7 herunterreguliert, 

und es findet keine Assoziation zwischen 

dem verbleibenden MMP-7 und HB-EGF 

mehr statt, so dass ein sHB-EGF-vermitteltes 

Proliferationssignal unterbleibt und durch die 

fehlende Aktivierung von Fra-1 keine Repression 

des Tropoelastingens mehr erfolgt. Als Konsequenz 

daraus produzieren die seneszenten 

HMEC verstärkt Tropoelastin und durch eine 

gleichzeitig signifikant erhöhte LOX-Aktivität 

werden verstärkt Elastinfasern gebildet, was 

die Komposition und die biophysikalischen Eigenschaften 

der Extrazellularmatrix und damit 

der Mikroumgebung der Brustepithelzellen signifikant 

veränder 6 . Durch die große Bedeutung 

der Mikroumgebung von Brustkrebszellen für 

ein Metastasierungsverhalten wie etwa das 

Elastinnetzwerk der Lunge, könnten Deregulationen 

in der Signalkaskade und der Funktion von 

alterungsassoziierten Faktoren auch kausale Bedeutung 

für neoplastische Entartungen haben, 

zumal eine Großzahl von Mammakarzinomen 

alterungsassoziiert, also bei Frauen mittleren 

Alters bzw. postmenopausal entstehen. 

Neuere Erkenntnisse aus der Arbeitsgruppe 

von Joan Massagué vom Memorial Sloan- 


Kettering-Krebszentrum in New York zeigen 

zudem, dass die Faktoren COX2 und HB-EGF 

unter anderem an einer Metastasierung von 

Brustkrebszellen nicht nur in die Lunge, sondern 

auch in das Gehirn beteiligt sind. Ein weiterer 

Faktor, a-2,6-Sialyltransferase wirkt hier offenbar 

organspezifisch und verändert die Oberflächeneigenschaften 

der Brustkrebszellen durch 

den Umbau diverser Glykoproteine, was die 

Anheftung der Tumorzellen an den Gefäßwänden 

im Gehirn stabilisiert, um so die Blut-Hirn- 

Schranke aus Endothelzellen und Astrozyten zu 

durchdringen 8 . 

Metastasen-spezifische Therapien 

Angesichts der zunehmenden Diversifizierung 

von Brustkrebstumorzellen im Rahmen der 

Metastasierung – also während der Adaptation 

an eine organspezifische Umgebung – können 

standardisierte Mono- als auch Kombinationstherapien 

nur einen begrenzten Wirkungsgrad 

erzielen. Unter gesundheitsökonomischen 

Aspekten wären metastasenspezifische Therapeutika 

oder eine Individualtherapie mit 

einem spezifischen Wirkungsspektrum initial 

natürlich deutlich kostenintensiver, allerdings 

würden sich bei größeren Therapieerfolgen 

langfristig die Folgekosten wiederum minimieren. 

Literatur 

[1] Hass, R., Primärzellen aus Brusttumoren für die Diagnostik 

und individuelle Tumor-Therapie, Labrorwelt 7(1), 40 (2006) 

[2] Hass, R. & Bertram C. Characterization of human breast cancer 

epithelial cells (HBCEC) derived from long term cultured 

biopsies. J. Exp. & Clin. Cancer Res., in press (2009) 

[3] Pantel, K. & Brakenhoff, R. H. Dissecting the metastatic 

cascade. Nature Rev. Cancer 4, 448–456 (2004) 

[4] Hass, R. Rejuvenation in distinct cell populations - what does 

it mean? Exp Gerontol. (2009) 

[5] Nguyen DX, Bos PD, Massagué J. Metastasis: from dissemination 

to organ-specific colonization. Nature Rev. Cancer 9, 

274-284 (2009) 

[6] Bertram C, Hass R Cellular senescence of human mammary 

epithelial cells (HMEC) is associated with an altered MMP-7/ 

HB-EGF signaling and increased formation of elastin-like 

structures. Mech Aging Dev (2009) 

[7] Serganova I, Moroz E, Vider J, Gogiberidze G, Moroz M, 

Pillarsetty N, Doubrovin M, Minn A, Thaler HT, Massague J, 

Gelovani J, Blasberg R. Multimodality imaging of TGFbeta 

signaling in breast cancer metastases. FASEB J. 23, 2662- 

2672 (2009) 

[8] Bos PD, Zhang XH, Nadal C, Shu W, Gomis RR, Nguyen DX, 

Minn AJ, van de Vijver MJ, Gerald WL, Foekens JA, Massagué 

J. Genes that mediate breast cancer metastasis to the brain. 

Nature 459, 1005-1009 (2009) 


Prof. Dr. Ralf Hass 

Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe 

AG Biochemie und Tumorbiologie 

Medizinische Hochschule Hannover 

D-30625 Hannover 

Tel.: +49-(0)511-532-6070 

Fax: +49-(0) 511-532-6071 

www.mh-hannover.de/4122.html 

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Experimentelle Therapie 

von Flt3-ITD-positiven 

AML-Patienten 

PD Dr. Andreas Burchert, Dr. Stephan Metzelder, Prof. Dr. Andreas Neubauer, 

Philipps Universität Marburg, Universitätklinikum Gießen und Marburg GmbH 

Die akute myeloische Leukämie (AML) ist eine lebensbedrohliche Erkrankung und hat vor 

allem im höheren Alter eine schlechte Prognose 1 . Einer der wichtigsten prognosebestimmenden 

Faktoren bei der AML ist die Zytogenetik. Je nach Aberration wird zwischen Hoch-, 

Intermediär- und Niedrigrisikogruppen unterschieden. Patienten mit normalem Karyotyp 

haben ein intermediäres Risiko. Allerdings weist etwa ein Drittel dieser Patienten eine 

bestimmte Mutation im Flt3-Gen auf (Flt3-ITD), die mit einer zur zytogenetisch definierten 

Hochrisikogruppe vergleichbar schlechten Prognose assoziiert ist 2-4 . So erleiden ca. 35% der 

Flt3-ITD-Patienten innerhalb der ersten beiden Jahre nach konventioneller AML-Chemotherapie 

ein Rezidiv 5,6 . Eine Stammzelltransplantation kann das Rezidivrisiko im Vergleich zu 

einer konventionellen Chemotherapie nur zu einem gewissen Grad verringern 6 . 

Das Flt3-Gen kodiert für eine Rezeptortyrosinkinase, 

die normalerweise in hämatopoetischen 

Vorläuferzellen exprimiert wird. 

Der enzymatisch inaktive Flt3-Rezeptor wird 

nach Binden des Flt3-Liganden aktiviert und 

reguliert dann biologische Prozesse wie 

Überleben, Differenzierung und Wachstum 

(Abb. 1A). Die Flt-3-Ligandenbindung führt 

zu einer Rezeptordi- bzw. -oligomerisation 

und einer Flt3-Konformationsänderung, die 

eine Transphosphorylierung von Tyrosinresten 

sowie Substratphosphorylierungen 

zur Folge hat (Abb. 1A). Auf diese Weise 

werden verschiedene, Flt3 nachgeschaltete 

Signalwege, wie der Ras-, Stat-5 und 

PI3K-Akt-Signalweg, ligandenabhängig 

aktiviert (Abb. 1A). Nach Internalisation des 

Liganden-Rezeptorkomplexes limitiert sich 

Abb. 1: Schematische Darstellung der Aktivierung der Flt-3-Rezeptortyrosinkinase und der 

davon abhängigen Signaltransduktionswege. A. Flt-3-Liganden-abhängige Aktivierung. 

B. Konstitutive, ligandenunabhängige Flt3-Aktivierung. Sorafenib inhibiert Flt3- 

ITD durch Bindung in der Kinasedomäne und Verhinderung von Auto- und Substratphosphorylierung. 



die Flt3-Liganden-induzierte Signaltransduktion 

von selbst. Dies ist bei der Flt-3- 

ITD (interne Tandemduplikation)-Variante 

nicht der Fall (Abb. 1B). Die ITD-Mutation 

befindet sich im juxtamembranären Teil des 

Flt-3-Rezeptors (Abb. 1B). Sie führt zu einer 

ligandenunabhängigen Oligomerisation und 

damit zur konstitutiven Phosphorylierung 

und Aktivierung aller von Flt-3 abhängenden 

anti-apoptotischen und pro-proliferativen 

Signalwege (Abb. 1B). 

Grundlage für eine Flt-3-Inhibition 

mit Sorafenib bei AML-Patienten 

Sorafenib (BAY-43-9006, Nexavar®) ist ein 

Multikinaseinhibitor, der zunächst als Inhibitor 

der Raf-Kinase für die Behandlung 

unterschiedlicher Tumorenentitäten entwickelt 

wurde. In zellbasierten Assays zeigte 

sich, dass Sorafenib neben Raf auch andere 

Rezeptortyrosinkinasen wie VEGFR-2, VEG- 

FR-3 und PDGFR-alpha sowie die Flt3-Kinase 

hemmt. Interessanterweise inhibiert Sorafenib 

auch die mutierte Flt3-Kinase (Flt3-ITD) 

im niedrigen nanomolaren Bereich und damit 

sogar deutlich effektiver als den Wildtyp- 

Flt-3 Rezeptor 7 . Dies führt zu einer Hemmung 

der enzymatischen Aktivität von Flt3-ITD und 

der Flt3-ITD-abhängigen Signaltransduktion 

(Abb. 1B). Sorafenib ist in den Indikationen 

fortgeschrittenes Leberzellkarzinom 8 sowie 

metastasiertes Nierenzellkarzinom in den 

USA und in Europa zugelassen. 

Der bei AML-Patienten häufig überexprimierte 

oder mutierte Flt3-Rezeptor stellt 

ein interessantes Molekül für eine gezielte 

therapeutische Intervention dar. Die AML ist 

allerdings eine genetisch heterogene Erkrankung, 

was erklärt, warum die Resultate des 

Einsatzes unterschiedlicher Flt3-Inhibitoren 

in Phase I- und II-Monotherapiestudien an 

unselektierten AML-Patienten ernüchternd 

ausfielen 9 . Es gibt allerdings fundierte Rationalen, 

die für den Einsatz von Flt3-Inhibitoren 

wie Sorafenib speziell bei Flt3-ITD-positiven 

AML-Patienten sprechen: 

I Flt3-ITD ist ein AML-spezifisches therapeutisches 

Target, welches eine prognostisch 

sehr ungünstige Subgruppe von AML- 

Patienten definiert. 

I Die therapeutischen Optionen und Prognose 

bei Rezidiv einer Flt3-ITD-positiven 

AML sind schlecht. 

I Das (Expressions-)Niveau von Flt3-ITD 

korreliert invers mit dem Überleben 10 . 

I Flt3-ITD-induzierte Transformation (u.a via 

Aktiverung von Akt) führt zu onkogener 

Abhängigkeit 11 . Im Leukämie-Xenograftmodell 

und in einer Phase I-Studie konnte 

gezeigt werden, dass eine Blockade von 

Flt3-ITD in Flt3-ITD-abhängigen, hämatopoetischen 

Vorläuferzellen zur potenten 

Apoptoseinduktion in vitro und in vivo 

führt7 . 

I Flt3-ITD ist offensichtlich für den Erhalt 

des malignen Phänotyps des AML-Klons 

notwendig, da 90% bis 100% der Flt3- 

ITD-positiven AML-Patienten auch im 

Rezidiv Flt3-ITD-positiv bleiben oder Flt3- 

ITD überexprimieren. Dies unterstreicht, 

dass die Flt3-ITD-Mutation eine die AML 

„treibende“ Aberration ist, die auch im 

fortgeschrittenen Verlauf der Erkrankung 

ein relevantes therapeutisches Zielmolekül 

sein sollte. 

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Therapieeffizienz von Sorafenib 

bei Flt3-ITD positiver AML 

Zhang et al. konnten in einer Phase I-Studie 

mit 16 AML-Patienten eine klinisch relevante 

Aktivität von Sorafenib in sechs von sieben 

Flt3-ITD-positiven AML-Patienten zeigen, 

nicht aber in Flt3-ITD-negativen AML7 . Die 

berichtete Therapiedauer war aber mit 21 

bis 70 Tagen kurz. Safaian et al. publizierten 

einen Fall mit extramedullärem Rezidiv 

einer Flt3-ITD- positiven AML. Hier führte 

Sorafenib zu einer kompletten molekularen 

Remission12 . 

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Ansprechen auf Sorafenib bei Flt3-ITDpositiven 

AML der Marburger Kohorte 

In der Marburger Kohorte von Patienten mit 

rezidivierter oder therapierrefraktärer Flt3- 

ITD-positiver AML konnte die therapeutische 

Effizienz von Sorafenib bei sechs Patienten 

auch nach langfristiger Einnahme (Median: 

81 Tage, Spanne: 13-221 Tage) belegt werden 13 . 

Es wurden insgesamt zwei Patienten vor, drei 

Patienten nach und ein Patient sowohl vor 

als auch nach allogener Stammzelltransplantation 

(SCT) mit Sorafenib-Monotherapie 

in einer Dosierung von 200mg bis 800mg 

täglich therapiert. 

Sorafenib vor allogener SCT 

Von den drei Patienten, die vor SCT behandelt 

worden waren, konnten im weiteren Verlauf 

zwei erfolgreich allogen transplantiert 

werden. Diese hatten zuvor unter Sorafenib- 

Monotherapie jeweils klinisch bedeutsame 

Remissionen erreicht, ohne dass eine Chemotherapie 

durchgeführt werden konnte. 

Wie exemplarisch in Abbildung 2 an Patient 

Nr. 5 zu ersehen, erfolgte das Sorafenib- 

Ansprechen rasch. Die unerwartet zügige 

periphere Blastendepletion – in diesem Fall 

auch verbunden mit einer partiellen peripheren 

Blutbildregeneration – war durchweg 

bei allen Patienten bereits innerhalb der 


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LABORWElT 10. Jahrgang | Nr. 5/2009 | 21 

European Biotechnology Guide 

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Volume 2 

European Biotechnology Industry Guide


Abb. 2: Skizzierung der konventionellen Vortherapie und klinisches Ansprechen einer Flt3- 

ITD-positiven, Chemotherapie-refraktären Patientin auf die Sorafenib-Monotherapie. 

Unten: Sorafenib führt innerhalb kurzer Zeit zu einer deutlichen Erholung des peripheren 

Blutbildes. (Bestrahlung (roter Blitz), komplette molekulare Remission (grüne 

Kreise), C-(Cytarabin), ICE (2. Induktion nach ICE-Schema); + (allogene Stammzelltransplantation), 

roter Kreis: hämatologisches Rezidiv, FLAMSA - Rezidivtherapieprotokoll 

ersten sieben Therapietage zu beobachten. 

Dies bestätigte in vivo die bereits in vitro 

zu beobachtende Sensitivität von Flt3-ITD 

gegenüber Sorafenib 7 . Intrazelluläre Messungen 

der Aktivierung des Flt3-ITD Substrates 

Stat-5 bei Patient Nr. 5 zeigen zudem, dass 

Sorafenib die Flt3-ITD-Signaltransduktion 

schon innerhalb von Stunden nach Erstgabe 

und auch anhaltend danach hinreichend 

blockiert (Abb. 2). 

Sorafenib nach allogener SCT 

Vier der sechs Marburger Patienten erlitten 

ein hämatologisches Rezidiv nach allogener 

SCT. Für diese Patientengruppe gibt es nur 

sehr limitierte therapeutische Optionen, 

zumal wenn vor Rezidiv bereits eine chronische 

„graft versus host“ (GvH)-Erkrankung 

vorlag. 

Zwei der vier Marburger Patienten erreichten 

in dieser Situation unter Sorafenib eine 

anhaltende komplette molekulare Remission. 

Die beiden anderen Patienten überlebten 

jeweils 211 und 221 Tage, wobei nur bei einem 

dieser Patienten eine Sorafenib-Resistenz 

nachgewiesen wurde. Hervorzuheben ist, 

dass es bei drei der vier Patienten unter Sorafenib 

zu einem ansteigenden Spenderchimärsimus 

kam, was mit dem Wiederaufflammen 

einer milden GvH-Erkrankung verbunden war. 

Dieser klinische Verlauf deutet darauf hin, 

dass Sorafenib keine ausgeprägten immunsuppressiven 

Eigenschaften hat und somit im 

therapeutischen Kontext einer SCT synergis- 


tische Wirkungen durch die Kooperation mit 

einer „graft versus leukemia“ (GvL)-Reaktion 

zu erwarten sein können. Vergleichbare Erfahrungen 

existieren bereits für Imatinib bei 

BCR/ABL-positiven Leukämien. 

Fazit 

Der Stellenwert einer Sorafenib-Monotherapie 

in der Behandlung der Flt3-ITD- 

positiven AML ist derzeit noch nicht klar 

definiert. Basierend auf den vorliegenden 

Daten könnte Sorafenib allerdings bereits 

heute für bestimmte Patienten mit Flt3-ITDpositiver 

AML vor oder nach allogener SCT 

eine klinisch interessante therapeutische 

Alternative darstellen. Hierzu gehören Patienten, 

bei denen intensive Therapieverfahren 

nicht durchführbar sind oder Chemotherapierefraktäre 

Patienten, bei denen der Zeitraum 

bis zur Durchführung einer allogenen SCT 

überbrückt werden muss. Sorafenib könnte 

aber auch schon früher, zur Verhinderung 

eines Rezidivs eingesetzt werden. 

Die Begündung für dieses Vorgehen wäre 

ein angenommener optimaler Synergismus 

zwischen Sorafenib und GvL-Effekt, da sich 

letzterer auf der Basis minimaler Resterkrankung 

besser etablieren kann. Eine randomisierte 

klinische Studie zur Überprüfung 

dieses Konzepts befindet sich derzeit in 

Vorbereitung. 

In Deutschland wird aktuell die Kombination 

von Chemotherapie mit Sorafenib oder 

anderen Flt3-Inhibitoren wie Midostaurin 

(PKC412) in Phase II- und III-Studien unter Leitung 

von Prof. Dr. Hubert Serve (Uniklinikum 

Frankfurt) und Prof. Dr. Gerhard Ehninger 

(Uniklinikum Dresden) bei Patienten mit und 

ohne Flt3-ITD-Mutation getestet. Diese Studien 

werden dazu beitragen, den Stellenwert 

einer Flt3-Inhibition zusätzlich zur Standardchemotherapie 

in der Erstlinienbehandlung 

von AML-Patienten besser zu definieren. 

Literatur 

[1] Appelbaum FR, Rosenblum D, Arceci RJ, et al: End points 

to establish the efficacy of new agents in the treatment of 

acute leukemia. Blood 109:1810-6, 2007 

[2] Rombouts WJ, Blokland I, Lowenberg B, et al: Biological 

characteristics and prognosis of adult acute myeloid leukemia 

with internal tandem duplications in the Flt3 gene. 

Leukemia 14:675-83, 2000 

[3] Kottaridis PD, Gale RE, Frew ME, et al: The presence of a 

FLT3 internal tandem duplication in patients with acute 

myeloid leukemia (AML) adds important prognostic information 

to cytogenetic risk group and response to the first 

cycle of chemotherapy: analysis of 854 patients from the 

United Kingdom Medical Research Council AML 10 and 12 

trials. Blood 98:1752-9, 2001 

[4] Thiede C, Steudel C, Mohr B, et al: Analysis of FLT3-activating 

mutations in 979 patients with acute myelogenous 

leukemia: association with FAB subtypes and identification 

of subgroups with poor prognosis. Blood 99:4326-35, 

2002 

[5] Gale RE, Hills R, Kottaridis PD, et al: No evidence that FLT3 

status should be considered as an indicator for transplantation 

in acute myeloid leukemia (AML): an analysis of 

1135 patients, excluding acute promyelocytic leukemia, 

from the UK MRC AML10 and 12 trials. Blood 106:3658- 

65, 2005 

[6] Bornhauser M, Illmer T, Schaich M, et al: Improved outcome 

after stem-cell transplantation in FLT3/ITD-positive 

AML. Blood 109:2264-5; author reply 2265, 2007 

[7] Zhang W, Konopleva M, Shi YX, et al: Mutant FLT3: a 

direct target of sorafenib in acute myelogenous leukemia. 

J Natl Cancer Inst 100:184-98, 2008 

[8] Llovet JM, Ricci S, Mazzaferro V, et al: Sorafenib in advanced 

hepatocellular carcinoma. N Engl J Med 359:378-90, 

2008 

[9] Knapper S: FLT3 inhibition in acute myeloid leukaemia. Br 

J Haematol 138:687-99, 2007 

[10] Gale RE, Green C, Allen C, et al: The impact of FLT3 

internal tandem duplication mutant level, number, size, 

and interaction with NPM1 mutations in a large cohort of 

young adult patients with acute myeloid leukemia. Blood 

111:2776-84, 2008 

[11] Brandts CH, Sargin B, Rode M, et al: Constitutive activation 

of Akt by Flt3 internal tandem duplications is necessary 

for increased survival, proliferation, and myeloid transformation. 

Cancer Res 65:9643-50, 2005 

[12] Safaian NN, Czibere A, Bruns I, et al: Sorafenib (Nexava ® ) 

induces molecular remission and regression of extramedullary 

disease in a patient with FLT3-ITD(+) acute myeloid 

leukemia. Leuk Res 33:348-50, 2009 

[13] Metzelder S, Wang Y, Wollmer E, et al: Compassionate-use 

of sorafenib in Flt3-ITD positive acute myeloid leukemia: 

sustained regression prior and post allogenic stem cell 

transplantation. Blood, 2009 

Danksagung 

Dr. Burchert und Dr. Neubauer werden durch die DFG, die Deutsche 

José Carreras Leukämiestiftung und einen Grant der UKGM 

GmbH unterstützt. 


PD Dr. med. Andreas Burchert 

Philipps-Universität Marburg 

Klinik für Hämatologie, Onkologie und 

Immunologie 

35043 Marburg 

Tel.: +49-(0)6421-586 5611 

Fax: +49-(0)6421-586 5613 

burchert@staff.uni-marburg.de 


Blitzlicht DNA-Methylierung 

BEAMing: Sensitive 

Plasmadiagnostik in 

der Onkologie 

Wiebke Peters, Dr. Philipp Angenendt und Dr. Frank Diehl, Inostics GmbH, Hamburg 

Pro Jahr erkranken rund 3,2 Millionen Menschen in Europa an Krebs – am häufigsten sind die 

Lunge und der Dickdarm betroffen 1 . Krebs ist trotz heutiger Behandlungsmöglichkeiten eine 

Krankheit mit oft tödlichem Ausgang. Die Situation ließe sich dramatisch verbessern, wenn 

die Krankheit im Frühstadium entdeckt würde und die Behandlung besser auf den jeweiligen 

Patienten abgestimmt werden könnte. Neben neuartigen bildgebenden Verfahren werden 

daher zunehmend in vitro-Diagnostikansätze verfolgt, die auf der Analyse tumorspezifischer 

genetischer und epigenetischer Marker im Blutplasma basieren. Im Unterschied zu etablierten 

Diagnostikverfahren wird von den zielgerichteten molekularen Markern eine bessere 

klinische Sensitivität und Spezifität sowie eine molekulare Charakterisierung des Tumors 

für verbesserte Therapieentscheidungen erwartet. BEAMing ist eine neue Technologie, mit 

der kleinste Mengen an tumorspezifischer DNA in Blutplasma quantitativ gemessen werden 

können 2 . Dies ermöglicht es, Tumore in einem frühen Stadium nicht-invasiv zu detektieren 

und unmittelbar den Behandlungserfolg einer Therapie abzuschätzen. 

Die Erforschung der molekularen Grundlagen 

der Tumorentstehung hat dazu geführt, dass 

heute neue diagnostische Markerstrategien 

entwickelt werden können. Diese bieten die 

Möglichkeit, Tumorerkrankungen bereits in 

einer frühen – und damit für die Heilung besten 

Phase – zu entdecken. Weiterhin konnte 

gezeigt werden, dass ein Zusammenhang 

zwischen molekularen Eigenschaften der Tumoren 

und dem Behandlungserfolg besteht, 

was zunehmend eine Personalisierung der 

Arzneimitteltherapie ermöglicht. Einer der 

spezifischsten Tumormarker ist die Veränderung 

der DNA-Sequenz, wie zum Beispiel 

somatische Punktmutationen in Genen, die 

direkt für die Entstehung von Krebs verantwortlich 

sind. Weiterhin rückt die Entwicklung 

von diagnostischen Tests auf Grundlage 

von Blutplasma in den Fokus, da Blut einfach 

und wiederholt gewonnen werden kann. Die 

Detektion mutierter DNA-Moleküle im Blut 

erscheint daher als außerordentlich attraktiver 

diagnostischer Ansatz in der Onkologie. 

Bisher gestaltete sich die praktische Anwendung 

dieser Strategie allerdings schwierig, da 

hierfür analytische Verfahren mit hoher Sensitivität 

und Selektivität benötigt werden. 

BEAMing-Technologie 

Die BEAMing-Technologie ist eine hochsensitive 

quantitative Technologie, die kleinste 

Mengen mutierter oder methylierter DNA 


nachweisen kann, die zuvor vom Tumor in 

das Blut abgegeben wurden und dort zirkulieren 

3,5 . Die Abkürzung BEAMing steht dabei für 

die Komponenten des Assays: Beads, Emulsion, 

Amplification und Magnetics. Es handelt 

sich bei dem Verfahren um eine gezielte Amplifikation 

von DNA-Einzelmolekülen auf der 

Oberfläche von magnetischen Mikropartikeln 

(Beads) in einer Wasser-in-Öl-Emulsion 3 . Das 

Resultat einer BEAMing-Reaktion ist somit 

die Umwandlung einzelner DNA-Moleküle in 

fluoreszierende Mikropartikel, welche mit Hilfe 

der Durchflusszytometrie detektiert und 

quantifiziert werden können. Der entscheidende 

Amplifikationsschritt findet in den 

Wassertröpfchen einer Emulsion statt und 

kann somit millionenfach mit geringstem 

Reagenzienverbrauch durchgeführt werden. 

Dieser Ansatz ermöglicht heute eine Miniaturisierung, 

bei der statt einer Reaktion pro 

Gefäß mehr als 10 8 PCR-Reaktionen gleichzeitig 

möglich sind. BEAMing ermöglicht eine 

unabhängige Analyse der DNA-Sequenz, bei 

der die techniche Sensitivität lediglich von 

der Anzahl der eingesetzten DNA-Moleküle 

abhängt. In der Anwendung hat sich eine 

Sensitivität von 0.01%, das heißt dem Nachweis 

von einem mutierten oder methylierten 

DNA-Molekül in der Gegenwart von 10.000 

Wildtyp-DNA-Fragmenten, als praktisch 

erwiesen. 

Die Detektion von Mutationen im Blutplasma 

auf Basis der BEAMing-Technologie lässt 

sich in mehrere Arbeitsschritte unterteilen 

(Abb. 1 A): 

Probenvorbereitung & Präamplifikation: Jede 

Analyse beginnt mit der DNA-Isolierung aus 

Blutplasma oder anderen klinischen Proben. 

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Blitzlicht DNA-Methylierung 

Hierbei kann die Menge des Startmaterials 

stark schwanken. Studien haben gezeigt, 

dass sich in einem Milliliter Plasma zwischen 

4 ng und 750 ng frei zirkulierender humaner 

genomischer DNA befinden kann 2 . Nach der 

DNA-Isolierung wird die zu untersuchende 

DNA-Region mit Hilfe einer konventionellen 

PCR amplifiziert. Dieser Schritt ermöglicht 

die Anreicherung der DNA-Moleküle und 

zugleich die Einführung von universellen Tag- 

Sequenzen, welche die weiteren Arbeitsschritte 

vereinfachen. 

Emulsions-PCR: Die DNA der Präamplifikation 

wird verdünnt und dient als Ausgangsmaterial 

für die Emulsions-PCR. Der PCR-Ansatz enthält 

die Komponenten einer konventionellen PCR 

(z.B. Nukleotide, Polymerase), ein spezielles 

Öl-Emulgator-Gemisch sowie magnetische 

A B 

Mikropartikel, an die ebenfalls universelle 

Tag-Sequenzen gekoppelt sind. Die wässrige 

Phase wird mit dem Öl emulgiert, so dass Millionen 

einzelner Wassertröpfchen mit einem 

Durchmesser von 3µm bis 10 µm einen Reaktionsraum 

für separate PCR-Reaktionen bilden 

(Abb. 1 B). In den Wassertröpfchen befindet 

sich statistisch nur ein einzelnes DNA-Molekül 

und ein magnetisches Partikel. Während der 

Reaktion werden die einzelnen DNA-Moleküle 

in den Tropfen auf der Partikeloberfläche mit 

Hilfe der gekoppelten Tag-Sequenzen vervielfältigt 

(Abb. 1 C). 

Hybridisierung: Nach der PCR wird die Wasser- 

und Ölphase wieder getrennt, so dass 

sich die Mikropartikel in der wässrigen Phase 

befinden. Mit Hilfe einer sequenzspezifischen 

Hybridisierung mit fluoreszenzmarkierten 

Abb. 1: A: Schematische Darstellung der BEAMing-Technologie. B: Lichtmikroskopische Aufnahme 

von Wasser-in-Öl-Emulsionen mit magnetischen Mikropartikeln (Durchmesser 

1 µm) C: Schematische Darstellung der DNA-Amplifikation auf der Oberfläche eines 

magnetischen Mircopartikels D: Durchflusszytometer-Diagramm einer Patientenprobe 

mit Mutationen (rote Partikel) 

C 

D 

DNA-Sonden wird die auf dem Mikropartikel 

gebundene DNA markiert. Das Ergebnis der 

Hybridisierung sind Partikel, die – je nach 

Mutationsstatus – mit einem der beiden Farbstoffe 

markiert sind. Die Analyse der Mikropartikel 

erfolgt mit einem Durchflusszytometer, 

das mehrere tausend Partikel pro Sekunde 

quantifizieren kann (Abb. 1 D). Die Anzahl der 

gemessenen Partikel entspricht somit der 

Häufigkeit der Wildtyp- und Tumor-DNA in 

der Plasmaprobe. 

Da Tumore je nach Stadium und Ursprungsorgan 

ein spezielles Mutationsspektrum 

aufweisen, ist die Entwicklung verschiedener 

Plasmatests erforderlich. Für häufig mutierte 

Gene, wie PIK3CA, BRAF, KRAS, TP53 und APC 

stehen bereits BEAMing-Assays zur Verfügung. 

Die offene Architektur der BEAMing-Technologie 

ermöglicht eine schnelle Etablierung weiterer 

Mutations- und Methylierungstests. 

Anwendung der BEAMing-Technologie 

in der Onkologie 

Die sensitive Detektion somatischer Mutationen 

in Blutplasma und anderem klinischen 

Probenmaterial mit der BEAMing-Technologie 

kann zur Entwicklung neuartiger in vitro- 

Diagnostika in der Onkologie genutzt werden. 

Schwerpunktmäßig könnten Bluttests im 

Bereich der Versorgung von Krebspatienten 

nach erfolgter Diagnose eingesetzt werden. 

Dabei lassen sich verschiedene klinische Anwendungsgebiete 

unterscheiden (Abb. 2). 

Therapieauswahl 

Es ist bekannt, dass zielgerichtete molekulare 

Krebstherapeutika nur in relativ kleinen Patientengruppen 

effizient wirken. Die Schwierigkeit 

bei der routinemäßigen Verwendung und 

Entwicklung dieser Medikamente ist deshalb, 

die geeigneten Patientenpopulationen vorab 

auszuwählen. Für einige Krebsarten wurden 

bereits bestimmte DNA-Mutationen entdeckt, 

die zur Patientenauswahl dienen. So sind 

therapeutische Antikörper wie Erbitux® oder 

Vectibix® nur wirksam bei Patienten mit dem 

KRAS-Wildtyp-Gen. In der Praxis ist ein solcher 

Nachweis für einen Teil der Patienten schwierig, 

da der Mutationsnachweis bis vor kurzem 

nur an Tumorgewebe selbst durchgeführt werden 

konnte, die Gewinnung des Tumorgewebes 

durch Biopsie oder operativen Eingriff aber 

mit Risiken und erheblichen Kosten verbunden 

ist. Ein prädiktiver Bluttest eröffnet hier eine 

bessere Patientenversorgung. 

Therapieverlauf 

Im Verlauf einer Behandlung könnte mit BEAMing 

auch bestimmt werden, ob eine Therapie 

erfolgreich ist, ob also die Tumorzellen durch 


Abb.2: Anwendungsgebiete der BEAMing-Technologie in der Onkologie: Therapieauswahl, 

Therapieverlauf und Nachsorge 

das Medikament selektiv absterben. Diese Erkenntnisse 

würden – falls erforderlich – einen 

schnelleren Therapiewechsel ermöglichen oder 

die Entwicklung neuer Behandlungsmethoden 

beschleunigen. In einer Studie mit 18 Darmkrebspatienten 

konnte bereits gezeigt werden, 

dass die Menge der Tumor-DNA im Blut mit der 

Größe und Invasivität des Tumors korreliert 4 . In 

diesen Patienten lag die Anzahl deer mutierten 

DNA-Moleküle zwischen 1 und 1833 (Median 

39). Dies bildet den Ausgangspunkt für weitere 

Studien, um den Nutzen dieser Art von Plasmadiagnostik 

zu evaluieren. 

Nachsorge 

Ziel der Krebs-Nachsorgeuntersuchungen ist 

es, einen wiederauftretenden Tumor möglichst 

früh zu erkennen, so dass therapeutisch 

eingegriffen werden kann. Mit der BEAMing- 

Technologie könnten im Rahmen der Nachsorge 

nicht entfernter Resttumor oder kleinste 

wiederkehrende Metastasen nachgewiesen 

werden. 

In Patienten mit metastasiertem Kolonkarzinom 

konnte dies bereits gezeigt werden 4 . So 

konnte wenige Wochen nach einer Behandlung 

in 15 von 16 Fällen (94%) ein Wiederauftreten 

der Tumorerkrankung vorhergesagt 

werden. Denkbar ist ebenfalls, dass BEAMing 

in der Früherkennung über eine regelmäßige 

Blutabnahme Krebserkrankungen schon vor 

dem Auftreten klinischer Symptome detektiert. 

Diese frühen Tumore könnten dann 

durch einen operativen Eingriff entfernt 

werden. Neben der Blutplasmadiagnostik ist 

– beispielsweise beim Kolonkarzinom – auch 

die Anwendung von BEAMing auf Stuhlproben 

möglich 5,6 . 

Abschließend lässt sich sagen, dass BEAMing 

neue Wege in der Krebsdiagnostik eröffnet. Es 

ist eine nicht-invasive Detektion von Tumoren 

unterschiedlicher Organe über das Blutplasma 

möglich. Des Weiteren eignet sich das 

Verfahren zur begleitenden Diagnostik bei 

Krebstherapien, da die Wirksamkeit von Therapieansätzen 

schnell abgeschätzt, und die 

Therapie gegebenenfalls angepasst werden 

kann. All diese Ansätze verfolgen das Ziel, die 

Krebsbehandlung effektiver und kostengünstiger 

zu machen, so dass die Mortalitätsrate 

in Zukunft gesenkt werden kann. 

Literatur 

[1] Coleman M.P., Alexe D.M., Albreht T., McKee, M., Institute 

of Public Health of the Republic of Slovenia (2008) 

www.euro.who.int/Document/E91137.pdf 

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Diaz L.A. Jr, Goodman S.N., David K.A., Juhl H., Kinzler 

K.W., Vogelstein B., PNAS 102 (2005), 16368-16373. 

[3] Dressman D., Yan H., Traverso G., Kinzler K.W., Vogelstein 

B., PNAS 100 (2003), 8817-8822. 

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Bjerregaard N.C., Laurberg S., Levin B., Juhl H., Arber N., 

Moinova H., Durkee K., Schmidt K., He Y., Diehl F., Velculescu 

V.E., Zhou S., Diaz L.A. Jr, Kinzler K.W., Markowitz 

S.D., Vogelstein B., Nature Biotechnology (2009) 21, 

858-863 

[6] Diehl F., Schmidt K., Durkee K.H., Moore K.J., Goodman 

S.N., Shuber A.P., Kinzler K.W., Vogelstein B. Gastroenterology 

135 (2008), 489-498. 


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Detektion neuer Tumorassoziierter 

Biomarker 

des Pankreaskarzinoms 

Dr. Georg Martin Fiedler, Dr. Alexander Leichtle, Dr. Uta Ceglarek und Prof. Dr. Joachim Thiery, 

Institut für Laboratoriumsmedizin, Klinische Chemie und Molekulare Diagnostik, 

Universität Leipzig 

Das Pankreaskarzinom ist eine Tumorerkrankung mit sehr schlechter Prognose und fehlender 

Möglichkeit einer frühzeitigen serologischen Diagnostik. Die Proteom- und Peptidomanalytik 

eröffnet neue Möglichkeiten, Biomarker zu entdecken. Voraussetzung dafür sind jedoch die 

Standardisierung der Präanalytik, eine sensitive Analytik und neue leistungsfähige Verfahren der 

Bioinformatik. Unter Berücksichtigung dieser Vorbedingungen gelang uns in einer klinischen Studie 

der Nachweis des Plättchenfaktors 4 (PF4) als neuem Biomarker für das Pankreaskarzinom. 

Abb. 1: Studiendesign; modifiziert nach Fiedler et al. (2009) 10 

Die rasante Entwicklung der Peptidomanalytik 

mit Hilfe massenspektrometrischer 

Verfahren eröffnet neue Perspektiven für die 

Identifikation krankheitsassoziierter Zielmoleküle 

und Aufklärung von Signalkaskaden 1 . 

Allerdings stellen die Dynamik des Proteoms, 

komplexe Matrixeffekte und der weite Konzentrationsbereich 

der Proteine im Blut und 

anderen humanen Untersuchungsproben 

besondere Anforderungen an die Analytik 2 . 

Darüber hinaus sind neue bioinformatische 

Methoden der Datenanalyse sowie spezielle 

Studienplanungen erforderlich, um aus den 

umfangreichen Proteom- und Peptidomdaten 

medizinisch nutzbare Ergebnisse zu gewinnen 

sowie die Probleme des „multiplen Testens“ 

und der „Falsch-positiven“ zu reduzieren 3 . 

Wir haben uns daher in den vergangenen 

Jahren zunächst auf systematische Untersu- 

chungen zu Störfaktoren und Einflussgrößen 

der Peptidomanalytik unterschiedlicher humaner 

Untersuchungsproben konzentriert. 

Die Untersuchungen führten wir mit der 

Matrix-assistierten Laserdesorptions/Ionisations-Time-of-Flight-Massenspektrometrie 

(MALDI-TOF-MS) nach Vorfraktionierung mit 

Magnetpartikeln unterschiedlicher Oberflächenfunktionalitäten 

(MB-HIC C8, MB- 

IMAC Cu und MB-WCX) durch. Auf der Basis 

dieser detaillierten Untersuchungen konnten 

wir erstmals standardisierte präanalytische 

Vorgaben für die Gewinnung, Aufarbeitung 

und Lagerung von Patientenproben erstellen, 

um die Validität und Reproduzierbarkeit 

klinischer Befunde sicherzustellen 4-7 . In 

Kooperation mit dem Institut für Mathematik 

II der Freien Universität Berlin (Gruppe 

Prof. Schütte, DFG Forschungszentrum für 

Mathematik „Matheon“) und mit Microsoft 

Research (Cambridge, UK) haben wir zudem 

eine neue Analysesoftware für die Auswertung 

von Proteombefunden entwickelt 

(„Proteomics.net“, www.msproteomics.net) 8 . 

Die Analysesoftware zeichnet sich durch eine 

besonders sensitive Detektion einzelner Kandidatenpeaks 

aus. Sie bietet die Möglichkeit 

der statistischen Evaluation anhand verschiedener 

Peakfeatures. 

Pankreaskarzinom 

Unsere Vorarbeiten bilden eine wesentliche 

Voraussetzung für die nachfolgenden klinischen 

Peptidomanalysen. In einer von uns 

initiierten klinischen Studie mit den Chirurgischen 

Universitätskliniken Leipzig und 

Heidelberg fokussierten wir uns zunächst auf 

die Serum-Peptidomanalytik von Patienten 

mit Pankreaskarzinom. Hierbei handelt es 

sich um eine der bösartigsten soliden Tumorerkrankungen 

des Gastrointestinaltraktes. In 

Deutschland macht das Pankreaskarzinom 

etwa 3% aller Krebserkrankungen aus. Eine 

Heilungschance besteht nur, wenn der oft 

lange symptomfreie Tumor in einem sehr 

frühen Stadium erkannt und vollständig 

operativ entfernt werden kann. Daher liegt 

die 5-Jahres-Überlebensrate unter 8%. 

Tumormarker der ersten Wahl beim Pankreaskarzinom 

ist das „Carbohydrate Antigen 

19-9“ (CA 19-9). Die Sensitivität für den 

Nachweis eines Pankreaskarzinoms wird 

in der Literatur für CA 19-9 jedoch mit nur 

67-92%, die Spezifität mit 68-92% angegeben 

9 . Tumormarker der zweiten Wahl ist 

das „Carcino embryonale Antigen (CEA)“, das 

gegenüber CA 19-9 eine noch geringere Sensitivität 

und Spezifität aufweist 9 . Aufgrund 

dieser für diag nostische Zwecke zu geringen 

Sensitivität und Spezifität sind CA 19-9 und 

CEA nicht in der Lage, als Einzelmarker oder 

in Kombination bestimmte Tumorformen 

exakt zu diagnostizieren und Frühstadien 

der Tumore präzise nachzuweisen. Diese 

aktuell unzureichenden labormedizinischen 

Möglichkeiten zur serologischen Diagnose 

des Pankreaskarzinoms erhöhen den Druck, 

neue valide Biomarker zu entwickeln. Da die 

Mehrzahl der heute in der Routinediagnostik 

verwendeten Tumormarker aus der Gruppe 

der Proteine stammt, besteht die Hoffnung, 

dass mit Hilfe gezielter Proteom- oder Peptidomanalysen 

neue krankheitsassoziierte 

Biomarker für eine präzise und frühzeitige 

Diagnose des Pankreaskarzinoms gefunden 

werden können 1 . 

Klinische Peptidomanalytik am 

Beispiel des Pankreaskarzinoms 

Im Rahmen einer klinischen Studie (Abb. 1) 

wurden in einer !Discovery-Studie“ mittels 


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MB-MALDI-TOF-MS (Bruker Daltonik, Bremen) 

die Serumpeptidomprofile von Patienten 

mit Pankreaskarzinom (p) und gesunden 

Kontrollprobanden (c) aus den Chirurgischen 

Universitätskliniken Leipzig (Prof. Dr. J. Hauss) 

(A) und Heidelberg (Prof. Dr. Dr. hc M. Büchler) 

(B) zunächst direkt (Ap nach Ac (roter 

Pfeil) bzw. Bp nach Bc (oranger Pfeil) und 

dann verschränkt (Ap nach Bc (blauer Pfeil) 

bzw. Bp nach Ac (grüner Pfeil) mit Hilfe von 

„proteomics.net“ analysiert und miteinander 

verglichen. Der verschränkte Vergleich hatte 

zum Ziel, frühzeitig ein „Overfitting“ auf 

Spezifika der Studienzentren zu vermeiden 

und damit die Rate der „Falsch-positiven“ zu 

reduzieren. 

Abb. 2: ROC-Kurven für das Modell aus den 

Tumormarkern CA19-9 und CEA 

(blaue Linie) sowie deren Kombination 

mit dem Kandidatenpeak 

m/z 3884 („Area under the ROC“, 

AUROC=0,983, rote Linie) für das Gesamtkollektiv 

(n=120). 

Das Ergebnis der Discovery-Studie waren 

Massenpeaks, die eine signifikante Trennung 

der Serumproben von Patienten und 

Gesunden in den vier Gruppenvergleichen 

ermöglichten. 

Die Massenpeaks, die in allen Gruppenvergleichen 

(Ap nach Ac, Bp nach Bc sowie 

Ap nach Bc, Bp nach Ac) als signifikant trennendes 

Merkmal auftraten (exemplarisch 

dargestellt als „Diskriminator D“) wurden 

anschließend im Rahmen der „externen 

Validation“ an unabhängig und ebenfalls 

standardisiert gesammelten Serumproben 

von Patienten mit Pankreaskarzinom und gesunden 

Kontrollprobanden der Chirurgischen 

Universitätsklinik Leipzig (C) allein und in 

Kombination mit den etablierten Tumormarkern 

CA 19-9 und CEA mittels ROC-Analysen 

auf ihre gruppentrennenden Eigenschaften 

untersucht. Anschließend wurde mit unterschiedlichen 

Verfahren (LC-MALDI-TOF/ 

TOF-MS, direkte MALDI-TOF/TOF-MS, in silico- 

Suche innerhalb der SwissProt-Datenbank) 

eine Identifikation der den Kandidatenmassen 

zugrundeliegenden Peptide angestrebt. Es 

folgte eine antikörperbasierte Bestätigung 

des identifizierten Peptids mit Hilfe von Antikörper-Capture 

Beads und MALDI-TOF-MS. 

Zum Abschluss wurde eine direkte Validation 

und Quantifizierung mit einem ELISA (Roche, 

Mannheim) in Serumproben von Patienten 

mit Pankreaskarzinom (n=60) und chronischer 

Pankreatitis (n=26) sowie bei Gesunden 

(n=60)) durchgeführt. 

Ergebnisse 

Im Rahmen unserer klinischen Studie gelang 

es uns, mittels MB-MALDI-TOF-MS-Analytik 

den Massenpeak m/z 3884 im Serum als 

Peptidommarker des Pankreaskarzinoms zu 

detektieren. 

Wie die ROC-Analysen in Abbildung 2 

zeigen, erhöhte die zusätzliche Bestimmung 

dieses Kandidatenpeaks die Sensitivität und 

Spezifität der labormedizinischen Tumordiagnostik 

in Verbindung mit den etablierten 

Tumormarkern CA 19-9 und CEA deutlich 10 . 

Eine in silico-Suche innerhalb der SwissProt- 

Datenbank ergab als mögliches Kandidatenpeptid 

ein Fragment von Plättchenfaktor 4 

(PF4). Mit Hilfe von Anti-PF4-gekoppelten 

MB-IAC-Prot-G-Magnetpartikeln und anschließender 

MB-MALDI-TOF-MS gelang die 

antikörperbasierte Bestätigung von PF4 als 

zugrundeliegendem Peptid. In der abschließenden 

Validation und immunologischen 

Quantifizierung mittels ELISA konnte gezeigt 

werden, dass die PF4-Konzentration im Serum 

von Patienten mit Pankreaskarzinom 

signifikant niedriger ist als bei gesunden 

Kontrollpersonen und auch bei Patienten mit 

Pankreatitis 10 . Dieser Befund ist unerwartet 

und spannend. Er ist möglicherweise auf eine 

bisher noch nicht aufgeklärte proteolytische 

Aktivität im Serum der Tumorpatienten 

zurückzuführen. Vor einer möglichen Einführung 

in die klinische Praxis muss unser hier 

vorgestellter Befund zu PF4 noch in größeren 

klinischen Studien weiter evaluiert werden. 

Darüber hinaus müssen die Anforderungen an 

den PF4-ELISA gezielt auf die neue Indikation 

hin weiterentwickelt und entsprechend der 

Richtlinie der Bundesärztekammer (RILIBÄK) 

zur Qualitätssicherung laboratoriumsmedizinischer 

Untersuchungen standardisiert 

werden. 

Fazit 

Die Peptidomanalytik in der Klinischen Chemie 

und Laboratoriumsmedizin besitzt ein herausragendes 

Zukunftspotential für die Entdeckung 

neuer krankheitsassoziierter Marker. 

Allerdings wird die MALDI-TOF-MS-Analytik 

noch durch ihre zu geringe Sensitivität und 

Trennschärfe limitiert. Aktuelle Fortschritte 

in der selektiven Probenfraktionierung, 

hochauflösende massenspektrometrische 

Verfahren sowie neue LC-MS/MS-Methoden 

zur direkten Quantifizierung versprechen 

künftig eine wesentlich sensitivere und spezifischere 

Analyse von Peptiden und Proteinen 

in sehr niedrigen Konzentrationsbereichen 1 . 

Hierdurch könnte in Zukunft eine nachhaltige 

Vernetzung der Genomanalytik mit der 

Peptidom- oder Proteomanalytik zur Aufklärung 

der pathophysiologischen Basis und der 

ungeklärten Varianz häufiger Erkrankungen 

erreicht werden. 

Literatur 

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proteomic strategy for clinical biomarker discovery. 

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peptidome profiling of human urine by magnetic bead 

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[5] Baumann, S., Ceglarek, U., Fiedler, G. M., Lembcke, 

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ionization time-of-flight mass spectrometry. Clin. 

Chem. 51, 973-80 (2005). 

[6] Bruegel, M., Planert, M., Baumann, S., Focke, A., Bergh, 

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Labormedizin? Laborwelt 6, 15-17 (2005). 

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carcinoembryonic antigen assays in detecting cancer of 

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[10] Fiedler, G. M., Leichtle, A. B., Kase, J., Baumann, 

S., Ceglarek, U., Felix, K., Conrad, T., Witzigmann, 

H., Weimann, A., Schutte, C., Hauss, J., Buchler, 

M. & Thiery, J. Serum peptidome profiling revealed 

platelet factor 4 as a potential discriminating Peptide 

associated with pancreatic cancer. Clin Cancer Res 15, 

3812-9 (2009). 


Prof. Dr. med. Joachim Thiery 

Institut für Laboratoriumsmedizin, Klinische 

Chemie und Molekulare Diagnostik 

Universität Leipzig 

Liebigstraße 27 

04103 Leipzig 

thiery@medizin.uni-leipzig.de 


Protein-Microarrays: 

Sensitive quantitative 

Analyse von Signalwegen 

Frauke Henjes, Frank Götschel, Heiko Mannsperger, Johanna Sonntag, Ulrike Korf; 

Molekulare Genomanalyse, Deutsches Krebsforschungszentrum, Heidelberg 

Proteinen kommt bei der Identifizierung von neuen Krankheitsmarkern und bei der Entwicklung 

gezielter Therapien eine besondere Bedeutung zu, da sie die Funktionsträger der 

Zelle sind. Von Seiten der klinischen Forschung sowie der Systembiologie besteht daher 

ein großer Bedarf an zuverlässigen quantitativen Daten, die in vielen Proben gleichzeitig 

erhoben werden können. Diesem Anspruch kommen die charakteristischen Merkmale von 

Protein-Microarray-Technologien, wie hohe Probenkapazität und hohe Sensitivität, entgegen. 

Protein-Microarrays liefern als Antikörper-basiertes Verfahren zuverlässige Daten für 

gezielte Fragestellungen und sind daher sowohl für die zielgerichtete klinische Forschung 

wie auch die systematische Analyse von Signalwegen eine vielversprechende experimentelle 

Plattform. In jüngerer Zeit haben sich Protein-Microarrays insbesondere bei der Erforschung 

von krebsrelevanten Signalwegen bewährt. 

Abb. 1: Wachstumsfaktor-vermittelte Signaltransduktion. Gezeigt werden EGFR und sein Ligand 

EGF, ERBB3 und sein Ligand HRG sowie der ligandenunabhängig agierende Rezeptor 

ERBB2. Diese Rezeptoren müssen miteinander dimerisieren, um nachgeordnete Signaltransduktionswege 

zu aktivieren. Funktionelle Dimere sind EGFR/EGFR, EGFR/ERBB2, 

EGFR/ERBB3 sowie ERBB2/ERBB3. 

In biologischen Systemen werden extrazelluläre 

Signale mit hoher Geschwindigkeit 

weitervermittelt und in die zellulären 

Abläufe integriert. Bei der Regulation des 

physiologischen Gleichgewichtes spielen 

unterschiedliche biochemische Vorgänge eine 

Rolle, von denen viele über posttranslationale 

Modifizierungen von Proteinen, wie etwa die 

Phosphorylierung- und Dephosphorylierung 

von Proteinen, vermittelt werden. 

So werden membranständige Rezeptortyrosinkinasen 

(RTK) durch das Andocken 

spezifischer Liganden aktiviert, zum Beispiel 

des epidermalen Wachstumsfaktors (EGF). 

Für die Weitervermittlung des Signals in die 

Zelle muss der Rezeptor mit einer anderen RTK 

dimerisieren (Abb. 1). In die Signalweitergabe 

sind zahlreiche intrazelluläre Lipid- und Proteinkinasen 

eingebunden. Rückkopplungsschleifen 

sorgen gleichzeitig für eine Integration 

der Information in parallel stattfindende 

zelluläre Signalprozesse beziehungsweise 

auch für ein Abschalten des Rezeptors. 

Zahlreiche Tumoren produzieren anstelle 

der normalen Version mutierte Varianten 

einer bestimmten Rezeptortyrosinkinase, da 

sie auf diese Weise einen Überlebensvorteil 

gewinnen und ihre Zellteilung und somit auch 

das Tumorwachstum vorantreiben können. 

So sind für den Rezeptor des Epidermalen 

Wachstumsfaktors (EGFR) verschiedene 

aktivierende Mutationen beschrieben, die 

Blitzlicht Microarrays 

beispielsweise in Tumoren der Lunge identifiziert 

wurden 1 . Eine andere erfolgreiche 

Strategie von Tumoren für die Sicherung eines 

schnelleren und nicht regulierten Wachstums 

ist die verstärkte Expression eines bestimmten 

Rezeptors. In vielen Tumoren der Brust 

wird beispielsweise HER2, ein dem EGFR 

strukturell verwandtes Membranprotein, 

überproduziert. Im Gegensatz zu EGFR kann 

HER2 auch ohne Andocken eines extrazellulären 

Liganden sein wachstumsaktivierendes 

Signal in die Zelle weitergeben und auf 

diese Weise die Malignität eines Tumors 

verstärken 2 . Gegen beide Rezeptoren wurden 

gezielte Therapeutika entwickelt, die bereits 

in der klinischen Anwendung sind 3 . In der 

klinischen Praxis sind jedoch nur rund 30% 

der gezielten Therapeutika wirksam, und in 

vielen Fällen entwickeln Tumoren während 

einer langfristigen Behandlung Resistenzen 

gegen die Therapie. Offensichtlich verfügen 

Tumoren über molekulare Mechanismen, die 

es ihnen erlauben, die Wirkung der gezielten 

Therapeutika zu umgehen. 

Bislang sind die Mechanismen der intrazellulären 

Regulationsprozesse jedoch nur unzureichend 

verstanden, da viele Signalwege 

durch Knotenpunkte miteinander verknüpft 

sind und als komplexe Netzwerke fungieren. 

Exakte zeitaufgelöste und quantitative Analysen 

miteinander interagierender Signalwege 

können jedoch hilfreiche Anhaltspunkte 

zu zell- oder tumorspezifischen Regulationsvorgängen 

liefern. In den vergangenen 

Jahren wurden Protein-Microarrays als experimentelle 

Plattform für quantitative und 

dynamische Analysen des Phosphoproteoms 

eingesetzt. Protein-Microarrays übertreffen 

herkömmliche etablierte Methoden der 

Proteomik im Hinblick auf ihre große Probenkapazität, 

hohe Empfindlichkeit, sehr gute 

Reproduzierbarkeit quantitativer Daten und 

auch die Schnelligkeit der Analyse. So haben 

sich Protein-Microarrays als sensitives und 

effizientes Werkzeug für die Wirkstoffforschung 

sowie die Untersuchung individueller 

Tumorproben erwiesen. Insbesondere bieten 

sie eine ideale Grundlage für die quantitative 

und dynamische Analyse von Proteinkinasevermittelten 

Signalprozessen 

Reverse Phase Protein-Microarrays 

In der Reverse Phase Protein Microarray-Technologie, 

RPPA, werden die zu untersuchenden 

Proben in genau definierten Positionen auf einem 

Festphasenträger (Slide) aufgebracht. Die 

Abgabe der Proben auf die Slides erfolgt mit 

Hilfe eines sehr präzisen Roboters. Vergleichbar 

zu den Positionen einer Mikrotiterplatte 

lässt sich jede einzelne Position auf dem Slide 

und damit auch jede Probe genau adressieren 

(Abb. 2). In einem Druckvorgang können 

mehrere Hundert identische Replikat-Slides 

produziert werden. In den immobilisierten 



Lysat-Spot 

Zielprotein 

spezifischer 

1. Antikörper 

Nitrocellulose-beschichtete Objektträger 

mit jeweils zwei Subarrays 

Abb. 2: Prinzip der Reverse Phase Protein-Arrays (RPPA). Jeder Subarray kann mit einem anderen 

Antikörper ausgelesen werden. Auf diese Weise werden über viele Proben hinweg Expressionsprofile 

für ausgewählte Proteine erstellt, die anschließend mit Hilfe von bioinformatischen 

Verfahren miteinander verglichen werden können. 

Proben können mit Hilfe von Antikörpern 

Zielproteine spezifisch erkannt und markiert 

werden. Anschließend werden die an die Zielproteine 

gebundenen Antikörper mit Hilfe von 

fluoreszenzmarkierten Sekundärantikörpern 

und geeigneten Scannern sichtbar gemacht. 

Die Intensität des Fluoreszenzsignals entspricht 

dabei über einen sehr großen Bereich 

der Menge des Zielproteins auf dem Array. 

Mit Hilfe moderner Methoden der Datenanalyse 

und der Statistik lassen sich die Signale 

aller Proben auf den unterschiedlichen Slides 

NIR-markierter 

2. Antikörper 

Scan eines Objektträgers 

analysieren und vergleichen 4,5 . Die Stärke der 

RPPA-Technologie liegt darin, die Expression 

einer Vielzahl von Proteinen und Phosphoproteinen 

in verschiedenen Proben mit hoher 

Sensitivität und nur minimalem Probenbedarf 

miteinander vergleichen zu können. Von jeder 

Probe wird pro Slide ein Volumen von wenigen 

Nanolitern benötigt. In einem Tropfen von 

einem Nanoliter ist bereits das gesamte Proteom 

einer Zelle präsentiert. Da die Sensitivität 

des RPPA-Ansatzes im picomolaren Bereich 

liegt, lassen sich auch gering exprimierte 

Abb. 4: Prinzip Microspot-Immunoassay (MIA). Spezifische Fängerantikörper werden als Replikatspots 

in 16 identischen Subarrays auf den Träger gedruckt. Jeder Fängerantikörper 

erkennt sein Zielprotein. Ein zweites Epitop jedes Zielproteins wird nach Inkubation mit 

einem Cocktail aus spezifischen Detektionsantikörpern markiert und kann in einem weiteren 

Inkubationsschritt fluoreszenzmarkiert visualisiert werden. Mit Hilfe von geeigneten 

Standards können die Fluoreszenzsignale der Proben quantitativ analysiert werden. 

Dieser Ansatz ist insbesondere für quantitative Phosphoproteomics geeignet. 

Proteine und Phosphoproteine zuverlässig 

detektieren. Dank dieser hohen Sensitivität 

der RPPA-Technik können auch klinische Proben 

analysiert werden 6,7 , und die Motivation zur 

Etablierung der RPPA Strategie zielte ursprünglich 

darauf ab, die Limitationen etablierter 

Proteomanalyse-Methoden zu überwinden 

und eine adäquate Methode für quantitative 

Analysen von Proteinnetzwerken in klinischen 

Proben zu entwickeln 8 . Nicht zuletzt haben 

sich RPPA auch als hilfreiches Werkzeug für die 

Quantifizierung von Proteinen und Phosphoproteinen 

nach siRNA-basierten Knock-downs 

erwiesen 9,10 . 

Auch systembiologische Untersuchungen 

wie etwa die Analyse von zeitaufgelösten 

Messungen können mit Hilfe von RPPA 

effizient durchgeführt werden 11 . Bindet beispielsweise 

EGF an seinen Rezeptor EGFR, 

werden vielfältige Phosphorylierungsprozesse 

initiiert. Obwohl der EGFR in verschiedenen 

Zelllinien prinzipiell dieselben Signalwege 

nutzt, zeigt jede Zelllinie ihre ganz charakteristische 

Dynamik. Dies ist zunächst 

1 

0 10 20 30 40 50 60 

Abb. 3: EGF-induzierte Phosphorylierung der 

Proteinkinasen ERK in den humanen 

Brustkrebszelllinien HCC-1954, BT-474 

und MCF-7 


pERK phosphorylation 

2 

1.5 

BT474 HCC1954 MCF7 

time [min] 

überraschend, da sich die Expression des 

EGFR in den untersuchten Zelllinien nicht 

grundlegend unterscheidet. Trotzdem induziert 

EGF in den humanen Brustkrebszelllinien 

MCF-7 und BT-474 nur eine zeitlich begrenzte 

Phosphorylierung der Proteinkinase ERK1/2. 

In der humanen Brustkrebszelllinien HCC- 

1954 verläuft die Dynamik anders, und die 

Aktivierung der Proteinkinase ERK1/2 ist nach 

einer Stunde noch nicht wieder abgeklungen 

(Abb. 3). Offensichtlich ist nicht nur das bloße 

Vorhandensein des Rezeptors für die Dynamik 

der untergeordneten Prozesse verantwortlich, 

sondern auch das Repertoire an Dimerisierungspartnern 

oder intrazellulären Proteinen, 

die gemeinsam in die Signaltransduktion 

eingebunden sind. 

Microspot-Immunoassay 

Im Gegensatz zu den RPPA werden beim 

Microspot-Immunoassay (MIA) Fängermoleküle, 

beispielsweise Antikörper, auf den

CO 2 - Abfall oder Rohstoff? 

Möglichkeiten und Grenzen 

der CO2-Sequestrierung 

3.-4.11.2009, Zentrum für Umweltkommunikation, Osnabrück 

Im Rahmen dieser zweitägigen Konferenz zum Thema Abscheidung von CO soll unter technologischen, ökolo- 

2 

gischen und wirtschaftlichen Aspekten diskutiert werden, ob CO als Industrieabfall entsorgt oder als Rohstoff 

2 

zum Aufbau komplexer Kohlenstoffverbindungen genutzt werden kann. Dazu werden erste Ergebnisse der 

angewandten CO -Abscheidungs-, Transport- und Lagerungstechnologien verschiedener deutscher Pilotanla- 

2 

gen vorgestellt sowie Möglichkeiten der biologisch-chemischen Fixierung und Nutzung von CO aus aktuellen 

2 

Forschungsprojekten in Deutschland aufgezeigt. 

Unter anderem werden als Referenten sprechen 

Prof. Dr. Hartmut Graßl, Max-Planck-Institut für Meteorologie, Meteorologisches Institut der Universität Hamburg 

Prof. Dr. Manfred Fischedick, Vizepräsident, Wuppertal Institut für Klima, Umwelt, Energie 

Dr. Thomas Haas, Leiter Science-to-Business Center Biotechnologie, Creavis Technologies & Innovation, 

Evonik Degussa GmbH 

Prof. Dr. Walter Leitner, Leiter Institut für Technische Chemie und Makromolekulare Chemie, RWTH Aachen 

Dr. Wolfgang Rolland, Leiter Bergwirtschaft/Bergbaustrategie, Vattenfall Europe Mining AG 

Prof. Dr. Walter Trösch, Abteilungsleiter Umweltbiotechnologie und Bioverfahrenstechnik, Fraunhofer IGB 

Dr. Hilke Würdemann, Leiterin Bio-Geoengineering, Deutsches GeoForschungszentrum 

Registrierung und weitere Informationen unter www.biocom.de/events. 

Medienpartner: zertifiziert durch: 

BIOCOM Projektmanagement GmbH | Brunnenstraße 128 | 13355 Berlin | Germany 

www.biocom.de | events@biocom.de | Tel. +49 (0)30 264921-53 | Fax +49 (0)30 264921-66


Tab. 1: Quantitative Proteinmicroarray-Anwendungen 

Multiplexing-Kapazität RPPA MIA 

Anzahl Zielproteine 50-200 5-10 

Probenkapazität 2000-4000 10-20 

Signalbereich 10 3 -10 4 Größenordnungen 

Empfindlichkeit 

pERK [ng/mg lysate] 

1000 

750 

500 

250 

0 

0 10 20 30 40 50 60 

Träger gedruckt. Die Quantifizierung wird 

dann vergleichbar zu den klassischen ELISA- 

Techniken mit Hilfe eines zweiten Antikörpers 

durchgeführt, der ein weiteres Epitop des 

Zielproteins erkennt (Abb. 4). Im Microspot- 

Immunoassay (MIA) wird die ELISA-Strategie 

miniaturisiert und im Multiplex-Format für 

die gleichzeitige Quantifizierung mehrerer 

Phosphoproteine eingesetzt. Dank des miniaturisierten 

Maßstabs ändert sich die Konzentration 

des Analyten während der Messung 

nicht, und es werden exaktere Werte erhalten 

als mit Standard-ELISA-Techniken möglich 

ist 12 . Im miniaturisierten Maßstab werden die 

Fängerantikörper als winzig kleine Replikat- 

Spots auf Nitrozellulose-beschichtete Träger 

gedruckt. Da der Array aus Fängerantikörpern 

mehrfach – im gezeigten Beispiel 16-fach – 

auf den Slide gedruckt wird, entstehen nach 

einer Kompartimentierung der Oberfläche 

16 kleine Inkubationskammern von denen 

ein Teil für die Aufnahme einer multiplexen 

Verdünnungsreihe genutzt wird. Die übrigen 

Inkubationskammern stehen für Vermessung 

der biologischen Proben zur Verfügung. 

Die Detektion der spezifisch gebundenen 

Proteine erfolgt mit einem Cocktail aus Detektionsantikörpern 

und in einem zweiten 

Schritt die Visualisierung der Antikörper- 

Picomolar 

Femtogramm Protein/Spot 

time [min] 

Femtomolar 

Picogramm Protein/ml 

Readout Qualitative Änderungen Exakte Quantifizierung 

HGF 5ng/ml HGF 20ng/ml HGF 40ng/ml negative control 

Abb. 5: Dosisabhängige Aktivierung der Signaltransduktion durch den Hepatischen Wachtumsfaktor 

(HGF) in der Brustkrebszellinie HCC-1954. HGF bindet an seinen Rezeptor MET, der 

für die Weitergabe des Signals dimerisieren muss. In der Zelllinie HCC-1954 wird in erster 

Linie die Phosphorylierung von ERK1/2 aktiviert. 

Protein-Komplexe mit fluoreszenzmarkierten 

Sekundärantikörpern. Eine maßgeschneiderte 

Software berechnet die Konzentration eines 

jeden Analyten in der Probe 13 . Im Hinblick auf 

die Sensitivität können ohne weiteres femtomolare 

Mengen eines Analyten detektiert 

werden. Im Gegensatz zu den RPPA liefert 

dieser Ansatz sehr präzise quantitative Daten 

und ermöglicht auch Untersuchungen zur 

dosisabhängigen Aktivierung von Signalwegen 

(Abb. 5). 

Produktion von Protein-Microarrays 

Da Protein-Microarrays quantitative Aussagen 

der untersuchten biologischen Proben 

liefern sollen, ist die Reproduzierbarkeit 

und Standardisierung der experimentellen 

Parameter ein wichtiger Aspekt: So ist bei 

der Produktion der Arrays eine über viele 

Proben hinweg einheitliche Tropfengröße 

unverzichtbar. Geringe Unterschiede in der 

Tropfengröße (wenige Prozent) können durch 

geeignete Normalisierungsverfahren ausgeglichen 

werden. Die Abgabe der Proben auf 

den Festphasenträger kann dabei mit Hilfe 

eines direkten Kontakts zwischen Druckernadel 

und Slide realisiert werden. Andere Dru- 

cker geben in einem kontaktlosen Verfahren 

winzige Tropfenmengen ab. Im Hinblick auf 

die Zeit unterscheiden sich unterschiedliche 

Druckverfahren beträchtlich. Schnelle Drucker 

benötigen für die Probenabgabe auf eine 

vorgegebene Anzahl Slides nur eine halbe 

Stunde. Langsame Drucker brauchen für 

denselben Druckvorgang 15 bis 18 Stunden. 

Die Geschwindigkeit des Druckvorgangs 

ist bei der Produktion von Antikörperarrays 

von untergeordneter Bedeutung. Im Falle 

von RPPA ist die Zeit jedoch ein wichtiger 

Faktor, da in komplexen biologischen Proben 

biochemische Prozesse weiterlaufen, die 

möglicherweise auch zur Degradation des 

Zielproteins beitragen, und es sind daher 

schnelle Druckverfahren von Vorteil. 

Zusammenfassung 

Grundsätzlich besitzen Protein-Microarrays 

gegenüber Gel-basierten Techniken eine 

ausgesprochen hohe Probenkapazität, eine exzellente 

Sensitivität und einen großen dynamischen 

Bereich. Sowohl RPPA wie auch MIA sind 

mit der Untersuchung von klinischen Proben 

kompatibel. Dank ihrer hohen Sensitivität und 

Flexibilität sind Protein-Microarray-basierte 

Methoden eine exzellente Ausgangsbasis, um 

die Dynamik und Komplexität von biologischen 

Prozessen gezielt zu untersuchen. Protein- 

Microarrays sind darüber hinaus auch für die 

Wirkstoffforschung und die Entwicklung der 

individuellen Tumortherapie eine vielversprechende 

Plattform (Tabelle 1). 

Literatur 

[1] Bell, D.W. et al., J. Clin. Oncology, 23 (2005), 8081-8092. 

[2] Yarden, Y., Oncology, 61 (2001), 1-13. 

[3] Mendelsohn, J., Baselga, J., Oncogene, 19 (2000), 6550-6565. 

[4] Neeley, E.S. et al., Bioinformatics, 25 (2009), 1384-1389. 

[5] Zhang, L. et al., Bioinformatics, 25 (2009), 650-654. 

[6] Gulman, C. Et al., K.M., J Pathol., 218 (2009), 514-519. 

[7] Vasudevan, K. et al., Cancer Cell., 16 (2009), 21-32. 

[8] Paweletz, C.P. et al., Oncogene. 20 (2001), 1981-1989. 

[9] Sahin, O. et al., Proc Natl Acad Sci U S A., 104 (2007), 6579-6584. 

[10] Sahin, O. et al., BMC Syst Biol., 1 (2009), 1. 

[11] Löbke, C. et al., Proteomics, 8 (2008), 1586-1589. 

[12] Poetz, O. et al., Proteomics, 9 (2005), 2402-11. 

[13] Korf, U. et al., Proteomics, 8 (2008), 4603-4612. 


Dr. Ulrike Korf 

Quantitative Proteomics 

Deutsches Krebsforschungszentrum 

Im Neuenheimer Feld 580 

69120 Heidelberg 

Tel.: + 49-(0)6221-424765 

Fax: + 49-(0)6221-423454 

u.korf@dkfz.de 



Weltkongress für 

Regenerative Medizin: 

Forschungselite in Leipzig 

Thomas Gabrielczyk, Redaktion LABORWELT 

Aktuelle Forschung und mögliche Anwendungen von Stammzellen und des Tissue Engineerings, 

aber auch Technologien zur reproduzierbaren Kultivierung von Zellen und Geweben 

für den medizinischen Einsatz sowie Methoden, diese möglichst immunkompatibel zu 

implantieren, stehen im Mittelpunkt, wenn sich vom 29. bis 31. Oktober die Weltelite der 

Stammzellforscher auf der Weltkonferenz für Regenerative Medizin in Leipzig trifft (www. 

wcrm-leipzig.com/). Organisiert vom TRM Leipzig – dem deutschen Translationszentrum für 

die Regenerative Medizin – bietet der internationale Meeting eine Auswahl an Vorträgen, 

die jedem Vergleich standhält. Dass das Forschungsfeld hochdynamisch ist und methodisch 

signifikant vorangekommen ist, dokumentierte Ende September nicht zuletzt die Verleihung 

der als „US-Nobelpreise“ gehandelten Lasker-Awards an zwei Stammzellforscher – den Entdecker 

der induzierten pluripotenten Stammzellen, Shinya Yamanaka (Univ. Kyoto), und John 

Gurdon (Univ. Cambridge,UK), einem Pionier der Zellkerntransfer-Technologie. 

Abb.: Komplexe Ko-Kultivierung von Nerven- und Muskelzellen auf einem Bio-Nanofaser- 

Scaffold aus Polymilchsäure 

Gemäß der Interdisziplinarität des Forschungs- 

und Anwendungsfeldes Regenerative Medizin 

ist die thematische Spannweite der Vorträge in 

den fünf Themenschwerpunkten „Stem Cells“, 

„Tissue Engineering“, „Technology Development“, 

„Immunology and Signaling“ sowie „Regulatory 

Affairs“ sehr weit. So wird etwa John 

Hunt vom UK Centre for Tissue Engineering an 

der Universität Liverpool berichten, wie die Dip 

Pen-Nanolithographie (DPN®) eingesetzt werden 

kann, um den Phänotyp von Stammzellpopulationen 

durch definierte Zugabe benötigter 

Faktoren zu definieren und damit das Problem 

heterogener Zellpopulationen zu lösen, das einer 

medizinischen Anwendung von Stammzellen 

als Ersatzzellen oder in zellbasierten Assays 

derzeit noch entgegensteht. Jeffrey Karp vom 

US-Eliteinstitut MIT (Cambridge, USA) dagegen 

stellt biomimetische Adhäsive für den biomedizinischen 

Einsatz vor, die den adhäsiven 

Regionen des Geckofusses nachgebildet sind. 

Die vom britischen Start-up-Unternehmen 

Regentec Ltd. in Leipzig präsentierte Injectible 

scaffold-Technologie zielt darauf ab, im Körper 

eine definierte Mikroumgebung für Zellen zu 

schaffen, die zur Knochenreparatur eingesetzt 

werden. Die Entwicklung geeigneter resorbierbarer 

Gerüstmaterialien ist ein ständiges 

Arbeitsfeld des Tissue Engineering, aber auch 

der Stammzellforschung (vgl Abb.), über dessen 

Neuerungen die Forscher auf dem WCRM 

in Leipzig diskutieren werden. 

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Blitzlicht Bibiometrie 

Leistungsmessung in der 

Forschung – Erfordernis 

oder Vermessenheit? 

Prof. Dr. Stefan Hornbostel, Dr. Markus von Ins, 

Institut für Forschungsinformation und Qualitätssicherung iFQ, Bonn/ 

Kompetenzzentrum Bibliometrie für die deutsche Wissenschaft 

Die Reflexion von Wissenschaft auf und über sich selbst ist keineswegs neu. Ein deutlicher 

Wandel in der Art und Weise wie Wissenschaft über sich selbst räsoniert,setzte aber mit Beginn 

des 20. Jahrhunderts ein. Neben die Wissenschaftsphilosophie traten zunehmend empirische 

Untersuchungen des Verhaltens von Wissenschaftlern, des Forschungsprozesses und der 

(Selbst-)Steuerungsmechanismen, denen Wissenschaft unterliegt. Eine weitere Veränderung 

setzte Mitte der 1960er Jahre ein: Die elektronische Datenverarbeitung ermöglichte erstmals, 

die bis dahin nur in den „Zettelkästen“ der Bibliotheken vorhandenen Informationen über die 

wissenschaftliche Literatur elektronisch verfügbar zu machen. Die neue Technik ermöglichte 

auch einen weiteren Schritt, der mit dem Science Citation Index realisiert wurde: Nicht nur der 

bibliographische Nachweis wurde elektronisch gespeichert,sondern auch die Referenzen,die in 

der Literaturliste am Ende eines Aufsatzes genannt werden. Damit war es erstmals möglich, in 

großem Umfang Beziehungen zwischen Dokumenten – Referenzierungen und Zitierungen – zu 

analysieren. Im Gegensatz zu den schon weit früher zu Beginn des zwanzigsten Jahrhunderts 

eingeführten „Abstracting Services“ wie etwa „Chemical Abstracts“ und „Physics Abstracts“ 

(heute „INSPEC-Physics“), welche auf eine rein inhaltliche Erfassung der Literatur (Titel, Ausgabentitel 

und Abstracts) abzielten und zunächst nur den ersten Autorennamen enthielten, 

wurden in den bibliometrischen Datenbanken neben den Referenzen nach und nach auch 

sämtliche Autoren und die institutionellen Adressen der Autoren erfasst, um mit der Zunahme 

der Mehrfachautorschaft umgehen zu können. 

Obwohl diese Datenbanken zunächst dazu 

gedacht waren, amerikanische Wissenschaftler 

– insbesondere Naturwissenschaftler – bei der 

Suche in der schnell wachsenden Flut wissenschaftlicher 

Aufsätze effektiv zu unterstützen, 

entwickelte sich mit der Bibliometrie sehr bald 

ein eigenes Forschungsfeld, das diese Datenbanken 

als ein Abbild des Kommunikations- und 

Kooperationsprozesses in der Wissenschaft zu 

nutzen begann. Damit traten insbesondere Fragen 

nach den Kooperations- und Stratifikationsstrukturen 

im weltweiten Wissenschaftssystem 

in den Vordergrund. Ein Zitat wurde nicht mehr 

nur als eine intellektuelle Verbindungslinie 

zwischen Dokumenten betrachtet, sondern 

auch als eine soziale Handlung der bewussten 

Auswahl von Autoren und Texten, als eine Art 

„Anerkennungswährung“. Sichtbar wurde 

bei diesen Analysen unter anderem, dass die 

meisten untersuchten Phänomene nicht einer 

Normalverteilungen folgen, sondern in aller 

Regel sehr schief verteilt sind. War dies zunächst 

nur Anlass für akademische Debatten, bekamen 

die sichtbaren Ungleichheitsstrukturen spätestens 

seit den 1980er Jahren auch eine wissenschaftspolitische 

Bedeutung. Mit Evaluationen, 

Rankings, leistungsorientierter Mittelvergabe, 

öffentlicher Rechenschaftslegung, aber auch 

verstärktem institutionellem Management 

zunehmend autonomer werdender Hoch- 

schulen stieg die Bedeutung bibliometrischer 

Indikatoren deutlich an. Darauf reagierten auch 

die Anbieter der beiden weltweit wichtigsten 

Datenbanken Thompson Scientific (Web of 

Science) und Elsevier (Scopus). Beide bieten 

inzwischen Managementtools an (Institutional 

Citation Reports und SciVal). Darüber hinaus 

erhalten auch die Nutzer der Datenbanken eine 

ganze Reihe von bibliometrischen Indikatoren 

„frei Haus“ und unabhängig von diesen Datenbanken 

stehen im Internet Tools zur Verfügung, 

die – basierend auf Google – eine Reihe bibliometrischer 

Indikatoren anbieten. 

Dieses leicht zugängliche Angebot hat dazu 

geführt, dass in zunehmenden Maße für Qualitätssicherung, 

aber auch für die Beurteilung 

der wissenschaftlichen Leistung einzelner Wissenschaftler 

– nicht zuletzt im Rahmen von Berufungsverfahren 

– bibliometrische Indikatoren 

genutzt werden. Der im Wissenschaftssystem 

dominante Peer Review ist damit zwar nicht 

außer Kraft gesetzt, wohl aber selbst zunehmend 

durch die Nutzung von bibliometrischen 

Indikatoren gekennzeichnet. 

So erfreulich der leichte Zugang zu bibliometrischen 

Daten und die in den letzten Jahren 

deutlich verbesserte Datenqualität ist, so problematisch 

sind die folgenden Umstände: 

I die Theorieentwicklung hat mit der schnellen 

technischen Entwicklung nicht Schritt gehal- 

ten. Noch immer ist es etwas nebulös, was 

mit dem „Impact“ (den Zitationen) genau 

gemessen wird (vgl. Abb. 1). Dies wird umso 

bedeutsamer, als der Einsatz bibliometrischer 

Indikatoren für evaluative und distributive 

Zwecke alle Akteure anspornt, die Publikationstätigkeit 

auch unter strategischen 

Gesichtspunkten zu behandeln. Autorschaft 

kann so zum Verhandlungsgegenstand werden, 

Herausgeber können sanften Druck auf 

die Aufnahme von Referenzen aus eigenen 

Zeitschriften ausüben, und Autoren können 

schnell an die Grenzen „guter wissenschaftlicher 

Praxis“ stoßen. All dies beeinflusst 

seinerseits die Messung. 

Daten nicht einfach interpretierbar 

I Für Laien entziehen sich die Kennzahlen und 

Indikatoren jeder Zuverlässigkeitsprüfung, 

Validierbarkeit und Kontrolle. Eine solche 

ist nur unter erheblichem Aufwand und mit 

fundierten Detailkenntnissen zu erreichen. 

Die scheinbare „Objektivität“ der Kennzahlen 

verleitet zudem zu einem zunehmend 

unkritischen, gelegentlich naiven Umgang 

mit derartigen „Performanzindikatoren“. Dies 

ist umso gravierender, als die Daten Fehler 

und Unschärfen unterschiedlichster Art enthalten, 

wie etwa das Homonymenproblem 

(unterschiedliche Autoren gleichen Namens) 

und daraus resultierende Fehlzuordnungen 

von Publikationen und Zitationen, fehlerhafte 

Angaben der Autoren, falsche Klassifikation 

des Dokumententyps, unterschiedlich 

gute Fachgebiets- und Länderabdeckungen, 

etc. Je kleiner die analysierten Aggregate sind 

(im Extremfall eine Person) desto problematischer 

werden derartige Fehler. 

I Die Indikatoren, die inzwischen angeboten 

werden, sind keineswegs selbstevident; zur 

sachkundigen Interpretation ist vielmehr 

eine Fülle von Hintergrundwissen notwendig. 

Wie krass in der Praxis auch gegen einfache 

methodische Regeln verstoßen wird, 

zeigt die Verwendung von „Journal Impact 

Factors“ (JIF) zur Bewertung individueller 

wissenschaftlicher Leistungen. Die JIFs sind 

mit einigen Einschränkungen bestenfalls zur 

Charakterisierung von Zeitschriften geeignet, 

nicht aber zur Beurteilung individueller Leistungen. 

I Die meisten Indikatoren sind in ihren Ausprägungen 

von den disziplinären oder 

subdisziplinären Pubklikations- und Zitiergepflogenheiten 

abhängig. Ein Vergleich 

über (sub)disziplinäre Grenzen hinweg ist 

daher nur möglich, wenn zuvor eine geeignete 

Normierung stattgefunden hat. Solche 

Normierungen setzen feingranulierte Fachgebietsidentifikationen 

voraus, die ihrerseits 



Abb.1: An Subfields normalisierter Zitationsindex der führenden Forschungsuniversitäten. 

Jeder Punkt gibt an, inwieweit die Publikationen einer Universität mehr oder weniger 

als im weltweiten Durchschnitt wahrgenommen (zitiert) werden 2 

eine Analyse des Rohdatenmaterialsmit 

großem Aufwand erfordern. 

I Eine Erfassung der wesentlichen wissenschaftlichen 

Literatur mit vertretbarem 

Aufwand erschien zunächst in den Naturwissenschaften 

und medizinischen Wissenschaften 

besonders einfach, da in diesen 

sehr oft relativ wenige Fachzeitschriften die 

Mehrheit der Artikel im Fachgebiet enthalten 

(Bradfords Law). Entsprechend wurden andere 

Publikationskanäle wie Monographien, 

Sammelbände und Conference Proceedings 

gar nicht oder eher unsystematisch berücksichtigt. 

Bis heute ist dies eine Schwäche 

der beiden Zitationsdatenbanken, die sich 

bei Analysen nicht nur in den Sozial- und 

Geisteswissenschaften, sondern auch in der 

Informatik oder den Ingenieurwissenschaften 

unangenehm bemerkbar macht. Bibliometrische 

Indikatoren sind daher keineswegs 

für jedes Fachgebiet geeignet. 

Neben diese Problematik der Datengrundlage 

bibliometrischer Indikatoren gesellen sich 

weitere methodische Probleme: Die zugrundeliegenden 

„Publikationen“ und auch die „Zitationen“ 

sind nicht a priori vorgegeben, sondern 

es ist vielmehr definitionsbedürftig, welches die 

jeweils relevanten Prublikationsorgane sind. Wie 

sollen Publikationen und Zitate insbesondere bei 

der häufigen Mehrfachautorschaft zugeordnet 

werden? Wie sind die Beiträge der einzelnen 

Koautoren zu eruieren und zu gewichten? Sind 

die Publikationen alle gleich zu gewichten oder 

sollen etwa Aufwand, Umfang oder Informationsgehalt 

der Publikationen in die Gewichtung 

einfließen und wie sollen diese bemessen 

werden? Auch scheinbar einfache Fragen etwa 

nach der Zordnung von Zitaten zu Publikationen 

bergen eine Reihe von Problemen. 

Das Kompetenzzentrum Bibliometrie 

für die deutsche Wissenschaft 

Die gegenwärtige Situation wirkt ein wenig paradox: 

Durch die leichte Verfügbarkeit bibliometrischer 

Indikatoren droht ein mächtiges analytisches 

Werkzeug, durch unbedarfte Nutzung 

eine ganze Reihe nicht intendierter Wirkungen 

auszulösen. Vor diesem Hintergrund werden 

qualitativ hochstehende bibliometrische Analysen, 

eine elaborierte Indikatorik und informierte 

Nutzer immer wichtiger. Dies gilt umso mehr, 

als auch in der Forschungsförderung und 

-politik der Bedarf an fundierten und kritisch 

geprüften bibliometrischen Analysen und einer 

adäquaten Indikatorik sowie ein stark ansteigender 

Beratungsbedarf bei den Hochschulen 

im Rahmen der Entwicklung von Qualitätsmanagements- 

und Mittelverteilungssystemen zu 

erwarten ist. Während im Ausland in den letzten 

20 Jahren sehr leistungsfähige Einrichtungen 

entstanden sind, die sich auf bibliometrische 

Analysen spezialisiert haben, sind in Deutschland 

nur einige sehr kleine Arbeitsgruppen in 

den verschiedenen Teilgebieten der Wissen- 

Blitzlicht Bibliometrie 

schafts- und Technikforschung entstanden, die 

für diese fachübergreifende Aufgabe personell 

und technisch nur unzureichend gerüstet sind 

und eine langfristige Kompetenzakkumulation 

kaum leisten können. Für die Entwicklung neuer 

Methoden und Produkte aber auch für die Validierung 

und Qualitätsprüfung der Indikatoren 

ist jedoch eine kritische Masse und Breite der 

Kenntnisse unabdingbar. Um diese Defizite zu 

beheben, an die internationalen Entwicklungen 

anzuknüpfen und auch um komplementäre 

Erfahrungen und Kenntnisse zu bündeln, haben 

sich die das iFQ (Bonn), das IWT (Bielefeld), 

das Fraunhofer ISI (Karlsruhe) und das FIZ 

Karlsruhe zu einem Konsortium zusammengeschlossen. 

Seit Dezember 2008 fördert das 

BMBF den Aufbau dieses „Kompetenzzentrum 

Bibliometrie für die deutsche Wissenschaft“ 1 . 

Unter der Konsortialführerschaft des iFQ führt 

ein Steering Committee – bestehend aus den 

vier Projektpartnern – die Geschäfte des Konsortiums, 

ein wissenschaftlicher Beirat steht 

dem Kompetenzzentrum beratend zur Seite 

und entscheidet über die durchzuführenden 

Forschungsprojekte. Neben dem schrittweisen 

Aufbau einer bibliometrischen InHouse-Datenbank 

(Scopus und WoS) werden zunächst drei 

Ziele verfolgt: 

I die Vereinheitlichung der Autorennamen und 

der instiutionellen Adressen, auf der Basis der 

Erfahrungen der Konsortialpartner, 

I die Entwicklung geeigneter Normierungen 

für Publikations- Zitationsindikatoren und 

I eine Überprüfung und Erfassung der Robustheit, 

Validität und Verlässlichkeit der 

Datengrundlagen, die längerfristig in eine 

„Fehlerlehre“ münden soll, die auch Laien 

eine Hilfestellung bei der Interpretation der 

Daten liefert. 

Wenn diese Grundlagen geschaffen sind, sollen 

sich weitere Forschungs- und Anwendungsprojekte 

anschließen. Um die Nachwuchsausbildung 

in diesem Gebiet zu fördern, hat 

das Kompetenzzentrum aktuell drei Promotionsstellen 

ausgeschrieben. Für ein breiteres 

Publikum sollen in Zukunft „Summer Schools“ 

angeboten werden. 

Literatur 

[1] www.forschungsinfo.de/Projekte/Kompetenzzentrum_ 

Bibliometrie/projekte_bibliometrie.asp 

[2] European Commission EUR 23608 EN „A more researchintensive 

and integrated European Research Area – Science, 

Technology and Competitiveness key figures report 

2008/2009, p. 94 


Prof. Dr. Stefan Hornbostel 

IFQ Institut für Forschungsinformation und 

Qualitätssicherung 

Godesberger Allee 90, 53175 Bonn 

Tel./Fax: +49-(0)228-97273-0/-97273-49 

www.forschungsinfo.de 

hornbostel@forschungsinfo.de 


© European Communities, 2008

Marktübersicht PCR 

Marktübersicht: PCR 

Ob in Grundlagenforschung oder molekularer Diagnostik – die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) ist nach gut 20 Jahren als Arbeitspferd molekularbiologischer 

Labors nicht mehr wegzudenken. Trotz ausgefeilter und optimierter Amplifikationsprozesse gibt es immer wieder neue Optimierungen. 

Einen Überblick über das aktuelle Leistungsportfolio der Anbieter, die sich an der LABORWELT Produktumfrage beteiligt haben, gibt die 

vorliegende Marktübersicht. 

Applied Biosystems Deutschland GmbH 

Frankfurter Straße 129 B 

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Fax: +49-(0)6151-9670 5599 

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Analytik Jena AG 

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07745 Jena 

Tel.: +49-(0)3641-779400 

Fax: +49-(0)3641-77767776 

biosolutions@analytik-jena.de 

www.bio.analytik-jena.de 

Christiane Knippschild 

Firma/Kontakt Analytik Jena AG 

bio solutions 

Konrad-Zuse-Straße 1 

07745 Jena 

Tel.: +49-(0)3641-779400 

Fax: +49-(0)3641-77767776 

biosolutions@analytik-jena.de 

www.bio.analytik-jena.de 

Christiane Knippschild 

Produktname AlphaSC ® SpeedCycler ² StepOne Plus Real-Time PCR-System 

Einsatzgebiete RapidPCR-Thermocycler für jede PCR- Applikation RapidPCR-Thermocycler für alle PCR-Applikationen Real-Time quantitative PCR, Quantifizierung von 

Genexpression und SNP-Genotypisierung 

Thermocycler- und Detektionseinheit für Real- 

Time quantitative PCR 

höhere Heiz- und Kühlgeschwindigkeiten I RapidPCR Thermocycler 

für alle PCR-Applikationen I schnellster Thermocycler weltweit I 

ermöglicht PCR-Läufe in weniger als 8 Minuten I vier austauschbare 

Blöcke im Low Profile Rapid-Format (LPR) für geringsten Probenverbrauch, 

im Standard Profile Rapid (SPR) bzw. Standard Profile 

(SP) Format I Programmierung über externe, portable Bedieneinheit 

HID-Pro 320 mit 5,7“ graphischem Touchscreen, basierend auf 

Windows CE oder konventionell über die PC-Software rPCRsoft. 

Flexibel durch vier austauschbare Blöcke: Low Profile Rapid-Blöcke 

(LPR) für geringen Probenverbrauch und minimale Running 

Costs, Standard Profile Rapid-Blöcke (SPR) oder eine Kombination 

aus beiden Blockformaten I enorme Geschwindigkeit I zwei parallele 

PCR-Läufe mgl. I individueller und hoher Probendurchsatz I 

integrierter PC mit farbigem, graphischem Touchscreen basierend 

auf Windows CE mit klar strukturierter Menüführung, dadurch 

einfache PCR-Programmierung I Möglichkeit zur individuellen 

Farbgestaltung 

Kurzbeschreibung 

des Produktes 

Veriflex Peltier-Block für 96 x 0.1 ml PCR- 

Gefäße oder eine 96er PCR-Platte (0.1 ml),

tebu-bio GmbH 

Berliner Str. 255, 

63067 Offenbach 

Tel.: +49-(0)69 801013-0 

Fax: +49-(0)69 801013-20 

ingrid.kautner@tebu-bio. 

com 

Ingrid Kautner 

Biometra – Part of Analytik-Jena 

Rudolf-Wissell-Straße 30 

37079 Göttingen 

Tel.: +49-(0)551-506860 

Fax: +49-(0)551-5068666 


info@biometra.de 

Dr. Holger Densow 

BioCat GmbH 



Tel.: +49-(0)6221-7141516 

Fax: +49-(0)6221-7141529 

info@biocat.com 

www.biocat.com 

Dr. Elke Gamer 

BioCat GmbH 



Tel.: +49-(0)6221-7141516 

Fax: +49-(0)6221-7141529 

info@biocat.com 

www.biocat.com 

Dr. Elke Gamer 

Firma/Kontakt Applied Biosystems Deutschland 

Frankfurter Straße 129 B 

64293 Darmstadt 

Tel.: +49-(0)6151-9670 0 

Fax: +49-(0)6151-9670 5599 

germany.order@lifetech.com 

EuroTaq DNA Polymerase TProfessional Thermocycler CleanAmp Turbo Primer 

CleanAmp Precision Primer 

CleanAmp Nukleotide 

PRECISOR High-Fidelity DNA 

Polymerase 

Produktname TaqMan ® Array Gene Signature 96-Well 

Plates 

Die CleanAmp PCR-Primer 

und Nukleotide werden in der 

end-point und real-time PCR 

eingesetzt. 

Verschiedene PCR-Techniken I Reverse Transkription I Restriktionsverdau 

I Proteinkristallisation 

Qualitative PCR I Sticky-end- 

Klonierungen I Amplifikation 

von Standard-Templates 

Klonierungen, bei denen 

Sequenz genauigkeit wichtig 

ist I Blunt-end Klonierungen I 

Amplifikation von schwierigen 

Templates I Site-directed Mutagenesis 

PRECISOR High-Fidelity DNA- 

Polymerase ist eine thermostabile 

DNA-Polymerase, die 5’-3’ DNA- 

Polymerase und 3’-5’ Proofreading 

Exonuclease-Aktivitäten 

besitzt und mit hoher Sequenzgenauigkeit 

amplifiziert 

Einsatzgebiete Vorplattierte, lyophilisierte TaqMan ® 

Gene Expression Assays in 0.2 ml 

96-Well-Platten für spezifische Signalwege, 

biologische Prozesse und 

Krankheitsstatus 

Die CleanAmp PCR-Primer 

und CleanAmp-Nukleotide 

sind chemisch modifiziert mit 

hitzelabilen Gruppen und 

können ohne Veränderung der 

experimentellen Bedingungen 

eingesetzt werden. 

Mit dem TProfessional- und dem TProfessional Standard-Thermocycler 

bietet Biometra zwei Geräte für unterschiedliche Bedürfnisse. I Großes 

graphisches Display erlaubt intuitive Programmierung in Tabellen- oder 

graphischer Form I Quick Start-Funktion ermöglicht schnellen Zugriff auf 

zuletzt gestartete Programme I High Performance Smart Lid öffnet auf 

Knopfdruck und arretiert in geöffnetem Zustand I high speed-Silberblöcke 

erreichen Spitzenwerte bei Geschwindigkeit, Temperaturuniformität und 

sind wahlweise mit oder ohne Gradientenfunktion verfügbar I Für Hochdurchsatz-Ausrüstung 

mit 384 Well-Block möglich I Beim TProfessional 

Thermocycler lassen sich die Hochleistungsblockmodule in weniger als 10 

Sekunden austauschen und werden automatisch vom Gerät erkannt. 

EuroTaq DNA-Polymerase 

ist eine thermostabile DNA 

Polymerase (Thermus aquaticus 

YT1 DNA-Polymerase) 

Jede Packung TaqMan ® Array-Platten 

wird mit Plan der Plattenbelegung auf 

Daten-CD geliefert 


des Produktes 

Die chemische Modifikation 

blockiert die DNA-Polymerase 

vor der Hitzeaktivierung und 

verhindert die Entstehung 

von Primer-Dimeren und Mispriming 

allgemein. Aufgrund 

der erhöhten Spezifität lassen 

sich auch Proben mit sehr 

geringen Mengen an target 

zuverlässig amplifizieren. Die 

PCR-Reaktion kann auch mit 

preisgünstigeren thermophilen 

DNA-Polymerasen durchgeführt 

werden, es muss keine 

„hot start“-Polymerase verwendet 

werden. 

High Speed Silberblock, großes graphisches Display, Gradientenversion 

verfügbar, austauschbare Blöcke I Blockaustausch mgl. I Blockformate: 

60 well (0,5 ml) 96 well (0,2 ml), 384 well I 350 Programme I Temperaturbereich 

3°C-99 °C I Temperatugradient 40 °C I Temperaturuniformität 

(15s nach Start der Uhr) ± 0,15 °C bei 55 °C, ± 0,25 °C bei 70 °C ,± 

0,50 °C bei 95 °C I Kontrollgenauigkeit ± 0.1 °C I ¼ VGA Bildschirm, 

320 x 240 Pixel I tabellarische Programmierung (Easy Spreadsheet Programming 

(ESP), Graphische Programmierung I Softwareoptionen Wechsel 

zwischen graphischer und tabellarischer Programmierung, Grafik für 

Temperaturgradienten, Einstellbare Heiz- und Kühlrate, Ausführlicher 

Selbsttest, Service Files, Automatische Blockerkennung, PC-Kontrolle I 

Schnellstart der letzten 5 Programme I High Performance Smart Lid I 

Deckeltemperatur 30°C-99 °C I Max. Stromverbrauch 480 Watt I sehr 

leise I RS232 serieller Anschluss I 28 cm x 38 cm x 24 cm 

Hohe Thermostabilität: Toleriert 

stringente Denaturierungs- und 

Annealing-Bedingungen wie 

z.B. für die Amplifikation von 

GC-reichen Templates I Hohe 

Reinheit 

Höchste Genauigkeit: Die 

Genauigkeit wurde mit dem rpsL 

Fidelity Assay im Vergleich zu 

führenden High-Fidelity Enzymen 

bestimmt I Schnelle DNA-Synthese: 

15s/kb bei Templates bis 

zu 5kb und 30s/kb bei Templates 

über 5kb 

Technische Daten Aufgetrocknete TaqMan ® -Sondensets 

in 96-well-Platten brauchen nur mit 

Master Mix und Probe zu 20 µl Reaktionsvolumen 

aufgefüllt werden 


High Speed Silberblock I großes graphisches Display I tabellarische 

und graphische Programmierung I Schnellstartfunktion der letzten fünf 

Programme I linearer Gradient I netzwerkfähig I fünf verschiedene 

Blockmodule I Blockaustausch in wenigen Sekunden I Benutzerfreundliches 

Design I Geräuscharmer Betrieb 

Amplifikation von Templates 

bis zu 10kb I Hohe Prozessivität 

I Geeignet für Multiplex- 

PCR I Sehr robust I Sehr 

ökonomisch 

Hohe Sequenzgenauigkeit I 

Hohe Geschwindigkeit I Hohe 

Prozessivität I Amplifikation von 

Templates bis zu 30kb I Sehr 

robust 

Gensignaturen sind für Brustkrebsregulierung, 

p53, Apoptose, Tumor-Metastasen 

und über 130 weitere Krankheiten 

und biologische Signalwege verfügbar 

(www.allgenes.com). Validiert 

für Applied Biosystems 7000, 7300, 

7500 and 7900HT Fast Real-Time PCR- 

Systeme mit 96-well Standardblöcken. 

Nur für Forschungszwecke. 

CleanAmp dNTP Mix: 130 

Euro für 4 x 2 µmoles I CleanAmp 

Primer: 400 Euro 

pro Paar 


Besonderheiten/ 

Extras 

Maximale Heizrate 6 °C/sec, Maximale Kühlrate 4.5°C/sec I Durchschn. 

Heizrate 5.0 °C/sec, Durchschn. Kühlrate 3.5 °C/sec 

250 units, 189 Euro 1.000 units, 99 Euro Je nach Austattung 5.700 Euro bis 7.175 Euro 

Preis 262 Euro / 96 well-Platte, Mindestbestellmenge 

3


CyBio AG 

Ria Sachse 

Göschwitzer Straße 40 

07745 Jena, Deutschland 

Tel.: +49-(0)3641-351 0 

Fax: +49-(0)3641-351 409 

productinfo@cybio-ag.com 

www. cybio-ag.com 

BIOTREND Chemikalien GmbH 

Eupener Str. 157 

50933 Köln 

Tel.: +49-(0)221-9498320 

Fax: +49-(0)221-9498325 

jaeger@biotrend.com 

Gunther Jaeger 

Bio-Rad Laboratories GmbH 

Heidemannstr. 164 

D-80939 München 

Dr. Marcus Neusser 

marcus_neusser@bio-rad.com 

Tel.: +49-(0)89-31884-177 

Fax: +49-(0)89-31884-123 

Firma/Kontakt Biometra – A part of Analytik-Jena 

Rudolf-Wissell-Straße 30 

37079 Göttingen 

Tel.: +49-(0)551-506860 

Fax: +49-(0)551-5068666 


info@biometra.de 

Dr. Holger Densow 

CyBi ® -8plus1 

Produktname T3000 Thermocycler C1000/S1000 a) GelGreen, Nucleic Acid Stain 

b) GelRed, Nucleic Acid Stain 

Anfertigen von Reaktionsansätzen wie PCR- und Sequenzierungsansätzen 

sowie für serielle Verdünnungen, Hit-Picking 

und Setzen von Standards 

PCR a) stain either dsDNA, ssDNA or RNA 

b) stain either dsDNA, ssDNA or RNA 

Replace Ethidium Bromide 

Einsatzgebiete Verschiedene PCR-Techniken I Reverse Transkription 

I Restriktionsverdau 

Pipettiersystem mit 8 und einem Kanal an einem Kopf, ermöglicht 

Einzelwell- oder Tubeansteuerung und spaltenweise 

Bearbeitung von 96- und 384-well Mikroplatten, Anzahl der 

Arbeitspositionen (4 bis 10) frei nach den Anforderungen konfigurierbar, 

Arbeitspositionen sowie Stacker sind auch später 

nachrüstbar 

a) GelGreenTM is a sensitive, stable and enviornmentally 

safe green fluorescent nucleic acid dye 

designed to stain either dsDNA, ssDNA or RNA 

in agarose gels. GelGreen is far more sensitive 

than SYBR Safe. Unlike SYBR dyes, which are 

known to be unstable, GelGreen is very stable, 

both hydrolytically and thermally. GelGreen has 

a UV absorption between 250 nm and 300 nm 

and a strong absorption peak centered around 

500 nm. Thus, GelGreen is compatible with 

either a 254 nm UV transilluminator or a gel 

reader equipped with visible light excitation 

(such as a 488 nm laser-based gel scanner or a 

Dark Reader) I b) GelRedTM is an ultra sensitive, 

extremely stable and environmentally safe fluorescent 

nucleic acid dye designed to replace the 

highly toxic ethidium bromide (EB) for staining 

dsDNA, ssDNA or RNA in agarose gels or polyacrylamide 

gels. GelRed is far more sensitive 

than EB without requiring a destaining step. 

GelRed and EB have virtually the same spectra, 

so you can directly replace EB with GelRed 

without changing your existing imaging system. 

The C1000 and S1000 thermal cyclers 

offer a flexible and modular high-end PCR 

platform, with features giving performance that 

is fast, accurate, and reproducible. The C1000 

also includes features such as USB flash drive 

data storage and the Protocol Autowriter that 

enables users to automatically write protocols 

based on their input parameters and the desired 

reaction speed. 

Weiterentwicklung des Biometra T3 dar. Ausgehend 

vom bewährten Dreiblock-Konzept, wurde das Gerät 

mit modernster Peltier-Technologie für hervorragende 

Heiz- und Kühlraten ausgestattet. Die Software 

wurde komplett überarbeitet: Anwenderfreundlich I 

Drei unabhängige Thermoblöcke ermöglichen, dass 

verschiedene Programme gleichzeitig abgearbeitet 

werden. Bei Parallel-Betrieb mit 3 x 48 wells: hoher 

Probendurchsatz. I Drei unterschiedliche Blockversionen 

für 0,2 ml oder 0,5ml Tubes; ein Kombiblock 

nimmt beide Gefäßtypen auf. 


des Produktes 

Volumenbereich 0,5 µl – 250 µl, 3 verschiedenen Spitzentypen 

5µl, 50 µl und 250 µl verwendbar, Einwegspitzen sind in den 

Qualitäten Standard, PCR-zertifiziert mit Filter und steril erhältlich, 

mögliche Plattenformate: 96, 384 und 0,2 ml-2 ml Tubes 

±0.2°C of programmed target at 90°C I 

±0.4°C well-to-well within 10 sec of arrival 

at 90°C I Gradient Temperature Differential 

1 – 24 °C within Gradient Temperature Range 

30-100°C 

Technische Daten Drei unabhängige Blöcke I Hoher paralleler 

Probendurchsatz I Blockformate I 3 x 20 Well 

(0,5 ml) I 3 x 48 Well (0,2 ml) I 3 x 18* Well 

und 3 x 48 Well (0,5 ml und 0,2 ml) Combi I 

Programmspeicher: 250 durchschnittliche Programme 

I Temperaturbereich 3-99 °CI Temperaturuniformität 

(15s nach Start der Uhr) ± 0.5 °C 

I Kontrollgenauigkeit ± 0.1 °C I Hochauflösendes 

CFL LC Display, 256 x 64 Punkte I Tabellarische 

Programmierung I Softwareoptionen Anpassbare 

Heiz- und Kühlraten I Zeitinkremente, Temperaturinkremente 

I High Performance Smart Lid I Dekkeltemperatur 

30 – 99 °C I Max. Stromverbrauch 

420 Watt I Geräuschemissions sehr leise I RS232 

serieller Anschluss I Abmessungen (B x T x H) I 30 

cm x 38 cm x 19 cm 

5.0°C/s 96-well block I 4.0°C/s 2x48-well 

block I 2.5°C/s 384-well block I 0° - 100°C 

Temperature Range 


Unterschiedliche Kühladapter gewährleisten eine kontinuierliche 

Kühlung der Mikroplatten und Tubes bis zu 2 Stunden 

Heiz-/Kühlrate Durchschn. Heizrate 2.2 °C / sec, Durchschn. 

Kühlrate 2.0 °C / sec 

Pipettierkopf besteht aus einem und 8 Pipettierkanälen, Kopfwechsel 

während des Prozesses daher unnötig I integrierte 

Datenbank ermöglicht schnellen Gerätestart I einfache Bedienung 

durch Webbrowser-ähnliche Benutzeroberfläche I Einstellen 

der Liquid Handling-Parameter ermöglichen Umgang mit 

verschiedensten Flüssigkeiten I Pipettierer kann mit weiteren 

Pipettierwerkzeugen erweitert werden 

Patented reduced-mass 96 well sample block I 

Fast settling time to uniform target temperature I 

>1000 programs onboard I Unlimited with USB 

expansion I Step-based graphical, text-based, 

automatic with Protocol Autowriter I Full secured 

mode for highly regulated environments, optional 

login, protected folder 

Drei unabhängige Blöcke für drei verschiedene 

PCR-Läufe zur selben Zei I Hoher Probendurchsatz 

(bis zu 144 0,2 ml Tubes) I Tabellarische 

Programmierung I Maximale Flexibilität durch 

Combi-Block I Geringer Platzbedarf I Geräuscharmer 

Betrieb 


Extras 

ab 25.000 Euro 

Preis 9.350 Euro k.A a) 1 x 500µl 115,- Euro 

b) 1 x 500µl 138,- Euro

‡ Verbinden Sie bis zu 

30 Cycler zu einem 

Netzwerk 

‡ Minimale Verdunstung 

mit vapo.protect - 

Deckel 

‡ Neue Software - 

funktionen 

‡ Ein perfektes Team 

mit Eppendorf 

Consumables 

Reproduzierbar, spezifi sch, schnell. 

Der Mastercycler pro erfüllt diese Anforderungen an 

eine valide PCR auf einzigartige Weise. 

Die patentierte vapo.protect -Technologie* verhindert 

die Verdunstung ihres PCR-Ansatzes. Die somit gleich 

bleibenden Konzentrationen im PCR-Ansatz ermög lichen 

eine stabile und reproduzierbare Spezifi tät, unspezifi sche 

Bindungvorgänge werden weitestgehend vermieden. 

* Patents pending. 

Trademarks: eppendorf ® , Mastercycler ® , SteadySlope ® and vapo.protect are registered trademarks of 

Eppendorf AG, Hamburg, Germany. Registered trademarks are not marked in all cases in this manual. 

Disclaimer: This product is licensed under U.S. patent Nos. 5,525,300, 5,779,981 and 6,054,263. 

The heated cover device is licensed under US 5,552,580 and foreign equivalents. 

The user of the Eppendorf Mastercycler pro might require additional rights for kits, reagents 

and other components required for his/her application. Such accompanying rights for these kits, 

reagents and other may be obtained by the respective holder of such rights. 

No rights are conveyed expressly, by implication or estoppel to any patents on real-time methods, 

including but not limited to 5’ nuclease assays, or to any patent claiming a reagent or kit. Mastercycler 

pro upgraded to a Mastercycler ep realplex requires a Real-Time Thermal Cycler License under 

Applera’s United States Patent No. 6,814,934 and corresponding claims in non-U.S. counterparts. 

There’s no way out! 

Mastercycler pro mit vapo.protect -Verdunstungsschutz 

Eppendorf Vertrieb Deutschland GmbH · Peter-Henlein-Straße 2 · 50389 Wesseling-Berzdorf · Germany 

Tel. 01803 255911* · Fax 02232 418155 · E-mail: vertrieb@eppendorf.de · Internet: www.eppendorf.de 

*9 Cent/Minute aus dem deutschen Festnetz 

Der Mastercycler pro 

‡ Ultimativer Verdunstungsschutz 

‡ Extrem schnelle Heiz- und Kühlraten 

‡ Gradientenfunktion mit SteadySlope-Technologie 

‡ Aufrüstbar zu real-time PCR 

‡ Optionaler Selbsttest der Peltier-Elemente 

Für mehr Informationen besuchen Sie: 

www.eppendorf.de/pcr 

NEU! 

Testen Sie uns jetzt und fordern Sie unter 

01803 255911 Ihre persönliche Gerätevorführung an! 

eppendorf ® ist eine eingetragene Marke. Alle Rechte vorbehalten, einschließlich der Graphiken und Bilder.


Genzyme Virotech GmbH 

Löwenplatz 5 

65428 Rüsselsheim 

Dr. Heiko Hofmann 

Tel.: +49- (0)6142-6909-14 

dhh@virotech.de 

www.virotech.de 

Fluidigm Europe B.V. 

Locatellikade 1 

1076 AZ Amsterdam 

Tel.: +31-(0)20-5788853 

www.fluidigm.com 

Harry Boeltz 

Harry.Boeltz@fluidigm.com 


Locatellikade 1 

1076 AZ Amsterdam 

Tel.: +31-(0)20-5788853 


Harry Boeltz 

Harry.Boeltz@fluidigm.com 

Eurofins MWG Operon 

Anzinger Str. 7a 

85560 Ebersberg 

Tel.: +49-(0)8092-8289-0 

Fax: +49-(0)8092-21084, 

support@eurofinsdna.com 

Firma/Kontakt Eppendorf AG 

22331 Hamburg 

www.eppendorf.de 

Eppendorf Application Hotline 

Tel.: +49-(0)1803-666-789 

application-hotline@eppendorf.de 

Produktname Mastercycler ® pro S PCR Primer, PCR Primer Design Tool Fluidigm Access Array System Biomark System GeneXpert ® ( der Firma Cepheid) 

Diagnostik von Infektionskrankheiten und Leukämien 

Für qPCR, Genexpression, SNP-Genotyping, 

CNV u.v.m 

PCR-basiertes System zur gleichzeitigen 

Herstellung von 48 Libraries 

für Next Generation Sequenziergeräte. 

Für Sample Capture und Target 

Enrichment, Sample Barcoding für 

multiplex Sequencing und Sequencing 

Library Preparation mit Hilfe von 

Amplicon Tagging 

Einsatzgebiete PCR in Forschung und Diagnostik Standard PCR, Multiplex PCR, RT-PCR, 

qPCR, DNA Sequencing 

GeneXpert ist völlig modular und voll automatisiert, 

keine Serienverarbeitung und Gerätevorschaltung 

nötig. 

9.000 PCR-Reaktionen in vier Stunden 

bei erheblich reduziertem Assayverbrauch 

und Pipettieraufkommen simultan. Aus 

einzelnen Zellen können gleichzeitig bis 

96 Gene in qPCR-Datenqualität bestimmt 

werden. Einziges kommerzielles System für 

die digitale PCR zur absoluten Bestimmung 

der Zielsequenzen. Übliche Chemie, wie 

TaqMan ® , und interkalierende Farbstoffe 

sind kompatibel. Das Biomark Real 

Time-System ist für den Einsatz der nanofluidischen 

Dynamic und Digital Arrays 

entwickelt. Das Komplettsystem bestehend 

aus einem IFC Controller, Thermocycler, 

CCD-Kamera und der Auswertesoftware für 

Genotypisierungen, Geneexpression und 

digitaler PCR vereinfacht den Arbeitsablauf 

für Hochdurchsatz-PCR-Applikationen. 

Parallele nL-Reaktionen: I Real-Time PCR: 

2.304 / 9.216 I SNP Genotyping: 2.304 / 

9.216 I Digital PCR: 9.180 / 36.960 

Das Access Array besteht aus 2 

Access Array IFC Controllern zum Beladen 

der IFCs und Wiedergewinnen 

der Proben und einem Thermocycler. 

Das System kann mit jeder PCRbasierten 

Probenvorbereitung und 

den kundenspezifischen Reagenzien 

und Primern verwendet werden. 

The specifications of Eurofins MWG 

Operon’s PCR Primer are pre-defined 

and optimised for standard PCR applications 

and sequencing reactions. PCR 

Primer Design Tool suggests a range of 

optimal primers or pairs of primers for 

PCR, RT-PCR or sequencing reactions. 

The online design tool is available free 

of charge. On demand and for special 

requests, individual project design 

services supported by our bioinformatic 

specialists are available. 

Die extrem schnellen Heiz- und 

Kühlraten des Mastercycler pro 

sorgen für die nötige Geschwindigkeit 

der PCR. Die patentierte vapo. 

protect-Technologie verhindert die 

Verdunstung des PCR-Ansatzes. Drei 

verschiedene Blockformate sind verfügbar, 

alle mit einem horizontalen 

Gradienten (die 96er-Blöcke sind 

aufrüstbar zu real-time PCR) 


des Produktes 

Amplifikationsprinzip RT-PCR I Detektionsprinzip 

Sechs-Kanal-Anregungsmodul: Hochleistungs- 

LEDs zur Anregung I Sechs-Kanal-Detektionsmodul: 

Silizium-Fotodetektoren und Filter I Der 

GeneXpert ist ein voll modulares System. Masse 

und Gewicht sind von der Anzahl der benötigten 

Testungseinheiten (Module) abhängig. 

Input: 48 Proben und 48 Primerpaare 

I 2.304 PCR-Reaktionen in vorgegebenen 

30 nL Reaktionskammern 

I Output: Automtisches Poolen aller 

sequenzierfertigen Amplicons 

Synthesis yield: 30nmol (6 OD) I Primer 

lengths: 15-29 bases I Delivery format: 

lyophilised I Quality control by Trityl 

monitoring, OD measurement, MALDI- 

TOF MS I Primers are shipped next day 

after Ecom order receipt I a free PCR 

Primer Design Tool suggests a range of 

optimal primers or pairs of primers for 

PCR, RT-PCR or sequencing reactions, 

using a set of physical parameters. The 

primers are scored in relevance to the 

predicted best performance criteria. The 

most favourable primer can be found at 

the first position. It can also be combined 

with a database search. The primers 

are checked against the RefSeq mRNA 

database (NCBI) to make sure that the 

primers have no critica 

Technische Daten Temperierbereich: 4-99°C I 

Blockhomogenität:20°-72°C:≤ 

±0,3°C; 95°C: ≤ ±0,4°C I Regelgenauigkeit: 

±0,2°C I Speicherkapazität: 

>700 Programme 


Heizen > 2°C/s I Kühlen > 1°C/s Heizen > 2°C/s I Kühlen > 1°C/s Heizraten (max.): 10 °C/Sek von 50-95 °C, Kühlraten 

(max.): 2,5 °C/Sek von 95-50 °C 

Heiz-/Kühlrate Heizen: 6°C/s (Impulsfunktion: im 

ersten Zyklus 8°C/s) I Kühlen: 4°C/s 

Random Access, 1-48 unabh. Testeinheiten, die 

mit beliebigen Xpert-Tests beladen w. können. I 

Serientestung und Einzeltestung mit gleichem Zeitaufwand 

I keine spezifische PCR-Laboraustattung 

u. Personal nötig I 24Std/7Tage durchführbar I 

Einziges PCR-System mit LIMS plug-in I PCR-Reagenzien 

geschlossen in Testkartusche = optimaler 

Kontaminationsschutz 

Ein 96.96 Dynamic Array entspricht 24 

384er Mikrotiterplatten. 192 Pipettierschritte 

statt 18.432 zum Ansetzen 

notwendig. 

Biomark Real Time-PCR-Systeme 

sind erweiterbar auf das Access Array 

System 

Synthesis report, Oligo data sheet, Quality 

report & delivery note are provided 

online free of charge I Customised tube 

label layouts can be selected I Extra 

tube labels are available 

Steuerbar über Control Panel (bis zu 

5 Module) oder PC-Software (bis zu 

30 Module). GLP-konforme Report 

Files und Benutzerverwaltung. Besondere 

vapo.protect-Technologie zur 

Vermeidung von Verdunstung. 


Extras 

k.A. Preis je Datenpunkt qPCR ab ca. 12 Cent 

Preis je Datenpunkt SNP ab ca. 5 Cent 

PCR Primer: Independent from primer 

length: 9,90 Euro 

Preis 10.350 Euro (inkl. Control Panel 

zzgl. USt.)

Microsynth AG 

Schützenstr. 15 

CH-9436 Balgach 

Tel.: +41-(0)71-722-8333 

Fax.: +41-(0)71-722-8758 

Dr. Johannes Haugstetter 

johannes.haugstetter@ 

microsynth.ch 

Lonza Cologne AG 

Nattermannallee 1 

50829 Köln 

Dr. Volker Vogel 

Tel.: +49-(0)221-99199 400 

volker.vogel@lonza.com 

Invitrogen GmbH 

Emmy-Noether Str. 10 

76131 Karslruhe 

euroinfo@invitrogen.com 

www.invitrogen.com 

Invitek GmbH - A Stratec Business 

Robert-Rössle-Str. 10 

13125 Berlin 

Frau Sonja Farhangi 

sfarhangi@invitek.de 

Tel.: +49-(0)30-9489-2894 

Fax: +49-(0)30-9489-2909 

Firma/Kontakt Hölle & Hüttner AG 

Derendinger Straße 470 


Dr. Steffen Hüttner 

www.h-net.com 

StellARray TM Gene Expression System PCR- und Real Time PCR-Service. 

InviTaq Hot Start DNA Polymerase 1. SuperScript ® VILO cDNA Synthesis 

Kit I 2. Express qPCR & qRT-PCR 

Kits 

Produktname Software für PCR-Fragestellungen: 

Steuerung, Vernetzung, Datenauswertung, 

Kitbezogene Standardauswertungen 

und zur Simulation 

Qualitative und/oder quantitative (Real 

Time) PCR-Analysen. Z.B. zur Qualitätssicherung, 

Target-Validierung, Genexpressionsanalyse, 

Nachweis von Mikroorganismen 

und Nachweis von GVO 

umfassende Produktgruppe zur Genexpressionsanalyse, 

Anwendung z.B. in RNAi, 

mRNA-Profiling, Validierung von „Hits“ aus 

Whole-Genome-Arrays. 

1. RT-PCR und qRT-PCR Applikation bei 

variablem Input und linearem Output I 

2. Erhöhter Durchsatz für Fast-Cycling 

Instrumente, 1-Schritt und 2-Schritt 

PCR 

complex genomic templates I Ecomplex cDNA 

templates I Every low-copy targets I reactions 

with multiple primer pairs 

Einsatzgebiete Unternehmen, die Geräte für PCR 

entwickeln, vertreiben bzw. PCRbasierte 

Kits herstellen 

Projektentwicklung und -beratung I 

DNA- und RNA- Präparationen I (Real 

Time) PCR-Assay-Entwicklung I Synthese 

von Primer-Probe-Sets I Validierung 

von PCR-/qPCR-Assays I Probenanalyse 

und Auswertung im Hochdurchsatz 

Komponenten: GeneSieve Bioinformatics-Software 

zur Suche der für einen 

bestimmten Forschungsbereich besonders 

relevanten Gene und der entsprechenden 

StellARray qPCR Arrays I Vorgefertigte oder 

individuell nach Kundenwunsch zusammengestellte 

StellARray qPCR-Arrays im 

96- und 384-Well Format für die meisten 

handelsüblichen qPCR Geräte I Global 

Pattern Recognition (GPR) Software zur 

präzisen und komfortablen Auswertung 

der qPCR Daten ohne die Notwendigkeit 

der Verwendung von vordefinierten 

„Housekeeping“-Genen. 

1. Zuverlässige first-strand cDNA- 

Synthese bei sehr hohen Ausbeuten 

I 2. Kits für die schnelle RT-PCR und 

qRT-PCR 

The InviTaq Hot Start DNA Polymerase + the 

supplied buffer is especially suited for real-time- 

PCR reactions with fluorescence probe detection 

by 5’-3’-exonuclease digest. The 5’-3’ DNA 

exonuclease activity has a broad thermal range 

(50 - 74°C). The thermal activation prevents the 

extension of nonspecifically annealed primers 

and primer dimers formed at low temperatures 

during PCR setup. The polymerase contains 

monoclonal antibodies which block polymerase 

activity prior to the onset of thermal cycling. The 

enzyme requires no prolonged heating or denaturing 

step. The antibodies are inactivated during 

an initial denaturation step of 5 minute at 95°C 

which can be incorporated into any existing 

thermal-cycler program. 

Umfangreiche Software-Bibliothek 

im Themenfeld PCR-Technologie, 

die nach Kundenanforderungen zur 

OEM- Produkten oder in Lizenz umgesetzt 

wird. 


des Produktes 

Automatisierte Probenaufbereitung 

(Tecan, Qiagen), Analyse mit Geräten von 

ABI, Roche und Qiagen. Zertifizierung 

nach ISO 9001:2000 und Akkreditierung 

der analytischen Abteilungen nach ISO 

17025 (STS 429). 

1. Superscript ® III in einem optimierten 

Puffersystem I 2) Schnell-Aktivierung, 

Antikörper-basierte Platinium ® - 

Taq Polymerase 

Technische Daten Software unter Windows Volume Activity: 5 units / µl I E10x Reaction 

Buffer I E250 mM Tris-HCl pH 8.3 (at 25 °C), 

500 mM KCl I Mg2+ Solution 

50 mM MgCl (recommended final concentra- 

2 

tion: 1-6 mM) 

Umfangreicher Service im Bereich DNA- 

& RNA-Synthese, DNA-Sequenzierung 

und Genotyping. Weitere Informationen 

unter www.microsynth.ch. 


Besonders präzise Normalisierung der 

Genexpressionsdaten: die StellARray 

Analysesoftware findet die für das individuelle 

Experiment am besten geeigneten 

Normalisierungsgene und verzichtet auf 

die Verwendung von vordefinierten, häufig 

inkonstanten „Housekeeping“ Genen. 

Umfassendes Angebot von mehr als 150 

Forschungsbereich-spezifische qPCR-Arrays 

für die gebräuchlichsten qPCR-Geräte. 

Neben “Expression Profiling” werden auch 

“Gene Copy Number Variation” (CNV)- 

Experimente unterstützt 

1. akkurate und sensitive Quantifizierung 

bei einer Linearität von 1 

pg-2,5 µg, konsistente Ergebnisse, 

hohe Ausbeuten und ideal für cDNA 

Archivierung I 2. Weniger Carry-over, 

Verbesserte Detektion durch SYBR ® 

GreenER in den SYBR ® kits, flexibles 

Format mit ROX oder separat für verschiedene 

Instrumente, Hochdurchsatz 

& Fast-Cycling-Instrumente 

reduced nonspecific amplification I high PCR 

specificity with minimal optimization I easy 

handling and room-temperature setup 



Extras 

Preis als OEM-Lösng bzw. im Lizenzmodell 100 Units: 51,00 €


PEQLAB Biotechnologie 

GmbH 

Carl-Thiersch-Str. 2b 

D-91052 Erlangen 

Tel.: 09131-610 70 20 

Fax: 09131-610 70 99 

info@peqlab.de 

www.peqlab.de 

Kerstin Hardung 

Promega GmbH 

Schildkrötstraße 15 

68199 Mannheim 

Tel./Fax: +49-(0)621 

8501-0/8501-222 

techsev@promega. 

com, www.promega. 

com, Katja Krauth 

New England Biolabs GmbH 

Brüningstr. 50, Geb. G810 

65926 Frankfurt/Main 

www.neb-online.de 

info@de.neb.com 

Tel: 0800-246-5227 (in D) 

Tel: 00800-246-52277 (in A) 

New England Biolabs GmbH 

Brüningstr. 50, Geb. G810 

65926 Frankfurt/Main 


info@de.neb.com 

Tel: 0800-246-5227 (in D) 

Tel: 00800-246-52277 (in A) 

Millipore GmbH 

Bioscience Division 

Am Kronberger Hang 5 

65824 Schwalbach/Ts 

www.millipore.com 

technischerservice@millipore.com 

06196-494-299 (Deutschland) 

0433994049 (Schweiz) 

0820874464 (Österreich) 

Firma/Kontakt Millipore GmbH 


Am Kronberger Hang 5 

65824 Schwalbach/Ts 

www.millipore.com 

technischerservice@millipore.com 

06196-494-299 (Deutschland) 

0433994049 (Schweiz) 

0820874464 (Österreich) 

Produktname? Montage ® PCR Cleanup Kit Amicon ® Ultra 0.5-Zentrifugaleinheiten Tq-Polymerase-Falilie* Proof Reading-Polymerasen: GoTaq ® -Produkt-Familie Primus 25 advanced ® 

Alle Arten klassischer PCR 

PCR, Hotstart-PCR und 

Real-time-PCR 

High-Fidelity PCR, besonders 

schnelle PCR, optimal auch für 

schwierige Templates, Hochdurchsatz 

Routine-PCR, Genotypisierungen, 

Hochdurchsatzexperimente, 

DHPLC, Kolonie-PCR, Lange Amplifikate 

(LongAmp Taq), direkte 

PCR an Blut oder Bodenproben, 

Multiplex-PCR 

Aufreinigung von PCR-Produkten (Entfernung 

von Primern und freien Nucleotiden, 

Umpufferung) mit Ultrafiltrationseinheiten 

für die Zentrifuge 

Einsatzgebiete Aufreinigung von PCR-Produkten im 

Multiwell-Format (Entfernung von 

Primern und freien Nucleotiden, Umpufferung) 

Kompakter Arbeitsplatz- 

Cycler, der dennoch größtmögliche 

Flexibilität bietet. 

Die GoTaq ® -Produktfamilie 

beinhaltet Einzelenzyme 

und Master 

Mix für alle gängigen 

PCR- und Real- Time 

PCR-Applikationen. 

Phusion ®-Serie: „Designer-Enzym“ 

mit zusätzlicher DNA-Bindedomäne 

für außergewöhnlich gute 

PCR-Eigenschaften: geringste 

Fehlerrate aller PCR-Polymerasen 

im Markt kombiniert mit höchser 

Zuverlässigkeit = ideal für Klo- 

Rekombinante Enzyme höchster 

Reinheit und Qualität, 

zuverlässige Amplifikationen 

mit hoher Ausbeute, große 

Auswahl optimierter Puffer- 

Formulierungen:Taq DNA Polymerase 

mit „Thermopol-Puffer“ 

Taq I DNA-Polymerase mit Detergenz-freiem 

„Standard“-Puffer 

I Crimson Taq-DNA-Polymerase 

- für PCR im Gel-Ladepuffer I 

LongAmp Taq-DNA-Polymerase – 

für Amplifikate bis 40 kb I HemoKlen 

Taq – für direkte PCR an 

Voll-Blut I Multiplex-PCR-Master 

Mix – bis zu 15-plex PCR I für 

Routine-PCRs: Phire ® Hot Start- 

DNA-Polymerase I Phire ® Plant 

Direct PCR Kit I DyNAzyme II Hot 

Start-DNA-Polymerase 

Millipores Amicon ® Ultra 0.5-Einheiten 

sind Ultrafiltrationseinheiten für die Zentrifuge 

mit 2ml Auffanggefäßen für Probenvolumina 

bis 500µl. Sie ermöglichen 

die Aufreinigung von PCR-Produkten für 

Sequenzierungen, Genotypisierungen 

oder Microarrays. 

Millipores Montage ® PCR Cleanup Kits 

verwenden ein auf Ultrafiltration basierendes 

Größenausschlussverfahren und 

werden über Vakuumfiltration betrieben. 

Sie ermöglichen im 96-Well- oder 

384-Well-Format die Aufreinigung von 

PCR-Produkten (≥ 100 bp) für Sequenzierungen, 

Genotypisierungen oder 

Microarrays. 


des Produktes 

nierungsexperimente I Vent/Deep 

® Vent Serie: proof reading PCR- 

R 

Enzym mit der höchsten Halbwertszeit 

bei 95°C, ideal für lange 

Inkubationszeiten, kostengünstig! 

Blockkapazität: Universalblock 

für 25 x 0.2 ml Tubes 

oder 13 x 0.5 ml Tubes mit 

flachem Deckel I Temperaturbereich: 

4 °C bis 105 

°C I Regelgenauigkeit: ± 

0.1 °C I Blockuniformität 

(bei 72°C): ± 0.7 °C I Max. 

Programmzahl: 90 (mit bis 

zu 99 Schritten/ Programm) 

I Max. Heizrate: 2 °C/s I 

Max. Kühlrate: 2 °C/s 


I Phusion ® High Fidelity-DNA- 

Technische Daten Montage ® PCR96: 96-well Filterplatte 

(bis 150-300 µl/well Probenvolumen), 

erhältlich mit 10 und 50 Platten pro 

Packung 

Polymerase , auch als Kits und 

Mastermixes I Phusion ® -Hot Start- 

High Fidelity DNA-Polymerase), 

auch als Kits und Mastermixes I 

® Vent -DNA- Polymerase I Deep- 

R 

® Vent -DNA-Polymerase 

R 

Millipore’s Amicon ® Ultra 0.5-Einheiten 

zeichnen sich durch eine hohe 

Produktwiederfindung (typischerweise 

>90%) aus. Das vertikale Membrandesign 

verhindert die Verblockung 

der Membran und ermöglicht kürzere 

Zentrifugationszeiten. Der „Deadstop“ 

verhindert das Trockenlaufen der Probe 

und die damit verbundene geringere 

Probenwiederfindung. Die Möglichkeit 

zur Umkehrzentrifugation optimiert die 

Probenrückgewinnung. 

Heizdeckel mit automatischer 

Höhenanpassung I 

GLP-Report dokumentiert 

Anwendung und Anwender 

I Ansteuerung mittels 

PC möglich I platzsparend 

Erfolgreiche PCR auch bei 

schwierigem DNA-Ausgangsmaterial. 

Alle Kits 

für die klassische PCR- 

Applikation beinhalten 

sowohl einen farblosen, 

als auch einen grünen 

Puffer, der direktes Beladen 

von Gelen erlaubt. 

Millipores Amicon ® Ultra 0.5-Einheiten 

sind mit verschiedenen Trenngrenzen 

(3/10/30/50/100 kDa) und Packungsgrößen 

(8/24/96/500 Stk/Pkg) erhältlich. 

Auch erhältlich mit 96- (bis 150 µl/well 

Probenvolumen) und 384-well-Platten 

(bis 100 µl/well Probenvolumen) 


Extras 

2.645 Euro 

Routine-PCR-Anwendungen 

ab 0,13Euro/U, Real- 

Time PCR ab 1,10 Euro/ 

Reaktion 

Amicon ® Ultra 0.5-Einheiten 8 Stk/Pkg 

40 Euro I Amicon ® Ultra 0.5-Einheiten 24 

Stk/Pkg 93 Euro I Amicon ® Ultra 0.5-Einheiten 

96 Stk/Pkg 311 Euro 

Preis Montage ® PCR96 Cleanup Kit, 10 Stk 

451 Euro I Montage ® PCR96 Cleanup Kit, 

50 Stk 1787 Euro I Montage® PCRµ96 

Cleanup Kit, 10 Stk 441 Euro I Montage ® 

PCRµ96 Cleanup Kit, 50 Stk 1769 Euro 

I Montagev PCR384 Cleanup Kit, 10 Stk 

960 Euro I Montage ® PCR384 Cleanup 

Kit, 50 Stk 3444 Euro


Sandhofer Straße 116 

68305 Mannheim, 

Fachliche Information 

Tel.: +49-(0)621-759-8568 

mannheim.biocheminfo@roche.com 



Sandhofer Straße 116 

68305 Mannheim, 

Fachliche Information 

Tel.: +49-(0)621-759-8568 



PromoCell GmbH 

Sickingenstrasse 63 / 65 

D-69126 Heidelberg 

Tel.: +49-(0)6221-64934-0 

Fax: +49-(0)6221-64934-40 

www.promokine.de 

info@promokine.de 

Dr. Jürgen Becker 

Firma/Kontakt PromoCell GmbH 

Sickingenstraße 63/65 

D-69126 Heidelberg 

Tel.: +49-(0)6221-64934-0 

Fax: +49-(0)6221-64934-40 

www.promokine.de 

info@promokine.de 

Dr. Jürgen Becker 

Produktname PCR Mycoplasma Test Kits PCR Bacteria Test Kits LightCycler ® 2.0 System LightCycler ® 480 System 

Mikrotiterplatten-basiertes Real-Time-PCR-System für mittleren 

und Hochdurchsatzbereich, Genexpressionsanalysen mittels Relativer 

QuantifizierungLightCycler ® 480 System, absolute Quantifizierung 

von Nukleinsäuren, Genotypisierung bekannter Mutationen, 

Mono-Color und Multiplex-PCR, Gene Scanning 

Kapillar-basiertes Real-Time PCR-System für in vitro- 

Diagnostik I qualitative u. quantitative Detektion von 

Nukleinsäuren, Genotypisierung. Dank der großen 

Flexibilität bei den Detektionsformaten, wie z.Bsp. SYBR 

Green I, Hybridisierungs- und Hydrolysesonden, kann 

jede gängige Applikation durchgeführt werden. 

Eubakterien-Detektion in Zellkulturen 

(research use only) 

Einsatzgebiete Mykoplasmen-Detektion in Zellkulturen (research use 

only) 

Patentierte Therma-Base-Technologie sorgt für optimale wellto-well 

Temperaturhomogenität. I Schnelle Heiz- und Kühlraten: 

Heizen: 4,8°C/s, Kühlen: 2,5°C/s. I Hardware: modulares 

System: wahlweise 96- oder 384-Well-Format. I Patentierte 

Optik ermöglicht präzise Signaldetektion unabhängig von Probenposition, 

Normalisierung über Referenzfarbstoffe ist nicht 

notwendig. I 6 Detektionskanäle für große Flexibilität bei der 

Wahl der Detektionsfarbstoffe. I bedienerfreundliche Software 

mit hochgenauen Auswertelogarithmen. I auf alle Detektionsformate 

optimal abgestimmte, gebrauchsfertige Mastermixe 

verfügbar, alle gängigen Detektionsformate einsetzbar 

Sehr schnelle PCR in 20 min bei systembedingt perfekter 

Temperaturhomogenität und online Detektion. 

PCR-basierter Kit (konventionelle 

PCR) zum schnellen und sensitiven 

Nachweis von Eubakterien 

in Zellkulturen. Auswertung über 

Gelelektophorese. 

PCR-basierte Kits (konventionelle und Real-Time PCR) 

zum schnellen und sensitiven Nachweis von Mykoplasmen 

in Zellkulturen. Auswertung über Gelelektophorese 

oder mit Real Time PCR-Cyclern verschiedener Hersteller 


des Produktes 

Platzsparendes Tischgerät: 45 cm x 30 cm x 40 cm I 

Probenkarussel für 32 Kapillaren I Anregung: 470 nm; 

Detektion: 530 nm, 555 nm, 610 nm, 640 nm, 670 nm, 

710 I schnelle Heiz- und Kühlzeiten: 20°C/s 

PCR Bacteria Test Kit besteht 

aus: Reaktionsgefäßen mit lyophilisierten 

Primern und dNTPs; 

DNA-Template/Interne Kontrolle, 

DNA-Template/Positivkontrolle; 

Reaktionspuffer; EUB-Polymerase; 

48 PCR-Tests 

Tischgerät: B 57.4 cm x T 58.8 cm x H 49.7 cm; Reaktionsvolumen 

5 µl–20 µl (384-well), 10 µl – austauschbare Thermoblöcke:100 

µl (96-well) I Anregungsfilter (nm): 440, 465, 498, 

533, 618; Detektionsfilter (nm): 488, 510, 580, 610, 640, 660 

Technische Daten PCR Mycoplasma Test Kit I/C besteht aus: Reaktionsgefäßen 

m. lyophilis. Primern, dNTPs + DNA-Template/Interne 

Kontrolle; Reaktionsgefäßen m lyophilis. Pri mern, dNTPs 

u. DNA-Template/Positivkontrolle; Rehydrierungspuffer; 

Hot-Start Taq-Polymerase; 24, 48 bzw. 96 PCR-Tests I PCR 

Mycoplasma Test Kit I/RT besteht aus: Reaktionsgefäßen m. 

lyophilisierten Primern, dNTPs u. Mykoplasmen-spezifischer 

Sonde; Inhibition Control Spike (lyophilisiert); Reaktionspuffer; 

DNA-freies Wasser; Hot-Start Taq Polymerase; 25 

PCR-Tests I PCR Mycoplasma Test Kit II besteht aus: Reaction-Mix 

(Primer, dNTPs, Taq-Polymerase), Buffer Solution, 

DNA-Template/Positivkontrolle; 10 bzw. 20 PCR-Tests 


sehr schnelle PCR mit online Detektion: 40 min im 384er Format; 

60 min im 96 er Format I sehr einfach und schnell austauschbare 

Thermoblöcke für 96- Well oder 384-Mikrotiterplatten I präzise 

Signaldetektion unabhängig von Probenposition durch patentierte 

Optik I 6 Detektionskanäle für große Flexibilität bei der Wahl der 

DetektionsfarbstoffeSoftware: I bedienerfreundliche Software mit 

hochgenauen Auswertealgorithmen I High Resolution Melting 

(HRM) Farbstoff in Kombination mit der LightCycler ® 480 Gene 

Scanning Software ideal geeignet zur Detektion von bekannten 

und unbekannten SNPs I Reagenzien: große Flexibilität bei den 

Detektionsformaten, wie z.B. SYBR Green I, Hybridisierungs- und 

Hydrolysesonden I Mit der Universal ProbeLibrary kann ein komplettes 

Transkriptom einer selektierten Spezies mit 90 vorvalidierten 

Detektionsproben abgedeckt werden. Weitere Spezies können 

mit einem Erweiterungsset abgedeckt werden. Ein kompetter 

qPCR Assay kann innerhalb von 24 Stunden etabliert werden. 

www.universalprobelibrary.com I Alle Maßnahmen zur Qualitätssicherung 

(IQ,OQ,PQ) verfügbar I Bar Code Reader I Kompatibel mit 

Laborautomation (LIMS) 

Hardware: sehr schnelle PCR mit online-Detektion : 20 min 

I 32 Kapillaren I 6 Detektionskanäle für große Flexibilität 

bei der Wahl der Detektionsfarbstoffe I große Flexibilität 

bei den Detektionsformaten, wie z.B. SYBR Green I, 

Hybridisierungs- und Hydrolysesonden I Probenvolumen 

wahlweise 20µl oder 100µl I Software: bedienerfreundliche 

Software mit hochgenauen Auswertealgorithmen I 

Reagenzien: umfangreiches funktionsgetestetes Reagenzienangebot 

für RT-PCR und PCR I Mit der Universal Probe- 

Library kann ein komplettes Transkriptom einer selektierten 

Spezies mit 90 vorvalidierten Detektionsproben abgedeckt 

werden. Weitere Spezies können mit einem Erweiterungsset 

abgedeckt werden. Ein kompetter qPCR-Assay kann 

innerhalb von 24 Stunden etabliert werden. www.universalprobelibrary.com 

Kit detektiert schnell, hochspezifisch 

und sehr sensitiv zahlreiche 

Eubakterien-Arten, u.a. Pseudomonas, 

Actinomyces, Escherichia, 

Serratia, Porphyromonas, 

Fusobacteria, Staphylococcus, 

Streptococcus, Lactobacillus, 

Micrococcus, Bacillus, Klebsiella, 

Salmonella, Enterococcus, 

Mycobacterium, Legionella, 

Prevotella, Peptostreptococcus. 

Eukaryotische DNA wird hingegen 

nicht amplifiziert. Einfache 

Probenvorbereitung. 

Kits detektieren schnell, hochspezifisch und sehr sensitiv: 

M. agalactiae, M. arginini, M. arthritidis, M. bovis, 

M. capricolum, M. cloacale, M. falconis, M. faucium, M. 

fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M. hyosynoviae, 

M. opalescens, M. orale, M. pneumoniae, M. pirum, M. 

primatum, M. pulmonis, M. salivarium, M. spermatophilum 

und M. timone sowie verschiedene Acholeplasma- 

(z.B. A. laidlawii) und Spiroplasma-Arten. Einfache 

Probenvorbereitung. 



Extras 

2.645 Euro 

PCR Bacteria Test Kit: 219 Euro 

(48 Tests) 

Preis PCR Mycoplasma Test Kit I/C: 125 Euro (24 Tests) I PCR 

Mycoplasma Test Kit I/RT: 225 Euro (25 Tests) I PCR 

Mycoplasma Test Kit II: 70 Euro (10 Tests)

Service Stellenmarkt 

Akademischer Stellenmarkt 

Veröffentlichen Sie Ihre Stellenanzeigen zielgruppengerecht in unserem akademischen Stellenmarkt (auch online), der allen nicht-kommerziellen Instituten 

für ihre Stellenausschreibungen kostenlos zur Verfügung steht. Bitte senden Sie dazu Ihre Anzeige (1/4 Seite 90 mm breit x 122,5 mm hoch, Logo – 

jpg oder tiff, 300 dpi Auflösung) an a.macht@biocom.de. Annahmeschluss für die nächste LABorweLt-Ausgabe „Mikrobielle Genomforschung 

& Metabolic engineering“ (erscheinungstermin 26.11.2009) ist der 13. November 2009. 

FRIEDRICH-SCHILLER-UNIVERSITÄT JENA 

Medizinische Fakultät – Institut für Biochemie I – Prof. Dr. Britta Qualmann 

2 Doktorand(in)en 

gesucht 

Das Institut für Biochemie I sucht zwei engagierte Doktorand(in)en mit 

Interesse an der Identifizierung und Charakterisierung bisher unbekannter 

Proteininteraktionen von Modulatoren des Aktincytoskeletts und Vesikelbildungsmaschinerien 

Unser Ziel ist es, die funktionelle Schnittstelle von Membranen und dem Aktincytoskelett 

aufzuklären und die Dynamik dieser beiden, für eukaryontische Zellen 

lebenswichtigen Strukturen zu verstehen. Dies liefert vertiefte Einsichten in die 

Bildung und Plastizität der definierten Zellmorphologien, auf denen die Organund 

Gewebebildungen multizellulärer Organismen beruhen. Auf der subzellulären 

Ebene liefern unsere Arbeiten Erkenntnisse über Membran-Modulationen durch 

Membrantransportprozesse (Endocytose, Rezeptor-Recycling, Vesikelbildung 

am Golgi-Apparat), Membrantopologie- und Zellmorphologieveränderungen 

durch Aktinpolymerisation und Membranveränderungen durch direkte Anlagerungen 

von Lipid-bindenden Proteinen, die Membranen krümmen bzw. sogar 

tubulieren können. Hierbei untersuchen wir vor allem die Lipid-bindenden 

Modulatorproteine der Syndapin-Familie (vergl. Review Qualmann & Kessels 

2004 J. Cell Sci.), die Funktionen der für die Vesikelbildung kritischen GTPase 

Dynamin und zwei Aktinnukleations maschinerien, den Arp2/3-Komplex und 

seine verschiedenen Aktivatoren (siehe z.B. Kessels & Qualmann 2002 EMBO 

J.; Pinyol et al. 2007 PLoS ONE); sowie den neu entdeckten Aktinnukleator Cobl 

(Ahuja et al. 2007 Cell). 

Für ein Verständnis der zellulären und physio logischen Funktionen dieser 

Proteine ist es notwendig, die sie in Funktion, Aktivität und/oder Lokalisation 

maßgeblich beein flussenden Inter aktions partner zu kennen und das Zusammenspiel 

dieser Komponenten zu verstehen. 

Zur Verstärkung unseres Teams suchen wir daher zwei engagierte Doktorand(in) 

en mit fundierter naturwissenschaftlicher Aus bildung, die Inter es se an der 

Entdeckung neuer Proteininter aktionen und der in vitro- und in vivo-Charakterisierung 

von bisher unbekannten Proteinfunktionen haben. 

Die Projekte bieten hervorragende Möglichkeiten, sich mit modernen Methoden 

der Molekularbiologie, des Hefe-2-Hybrid-Screenings, der Proteinbiochemie 

und der Immunfluoreszenz-Mikroskopie vertraut zu machen und Einblicke 

in die für eukaryontische Zellen so wesentliche subzelluläre Steuerung der 

Aktincytoskelettorganisation im Kontext von Membrantransport prozessen bzw. 

Modulationen der Membrantopologie zu erhalten. Entsprechende Vorkenntnisse 

sind erwünscht. 

Die Projekte können sich hierbei auf bereits etablierte Methoden und eine exzellente 

technische Infrastruktur, die direkt im Institut zur Verfügung stehen, stützen. 

Mit unser intensiven technischen und wissenschaftlichen Betreuung und der 

lebendigen und stimulierenden Forschungsumgebung im Institut und auf dem 

Innenstadt-Campus der FSU aber auch in den umliegenden Forschungsinstituten 

sind sehr gute Voraussetzungen für erfolgreiches wissenschaftliches Arbeiten 

inmitten der lebhaften und liebenswerten Universitätsstadt Jena gegeben. 

Interessierte wenden sich bitte mit aussagekräftiger Bewerbung an: 

Prof. Dr. Britta Qualmann 

Friedrich-Schiller-Universität Jena, Institut für Biochemie I, 

Nonnenplan 2, 07743 Jena 

bzw. an britta.qualmann@mti.uni-jena.de 

Als europaweit führendes Forschungszentrum mit der Ausrichtung „Environmental 

Health“, sind wir Mitglied der Helmholtz Gemeinschaft Deutscher 

Forschungszentren e. V. 

Ziel unserer Forschung ist es, Gesundheitsrisiken für Mensch und Umwelt frühzeitig 

zu erkennen, Mechanismen der Krankheitsentstehung zu entschlüsseln 

und Konzepte zur Prävention und Therapie von Erkrankungen zu entwickeln. 

Das Helmholtz Zentrum München als Träger des Bayerischen Frauenförderpreises 

sowie des Total E-Quality-Zertifikates strebt eine Erhöhung des Frauenanteils 

an und fordert deshalb qualifizierte Interessentinnen auf, sich zu bewerben. 

Schwerbehinderte werden bei gleicher Eignung bevorzugt. 

Das Institut für Bioinformatik und Systembiologie sucht zum nächstmöglichen 

Zeitpunkt eine/n 

Bioinformatiker/in - Tomatengenom (142/2009) 

Ihre Aufgaben 

– Genom-Analyse der Tomate 

– Erstellung eines umfassenden Datenbanksystems zur Darstellung und 

Analyse 

Ihre Qualifikation 

– Hochschulstudium mit Promotion in Biologie/Bioinformatik 

– Fundierte Kenntnisse der Sequenz- und Genomanalyse 

– Programmier- und Datenbankkenntnisse (Java, Perl, Phyton, UNIX, SQL und 

Oracle db Systeme) werden vorausgesetzt 

– hohe Teamfähigkeit und Einsatzbereitschaft 

Unser Angebot 

– Tätigkeit in einem innovativen, zukunftsorientierten Unternehmen 

– umfangreiches Fortbildungsangebot 

– zunächst für zehn Monate befristetes Arbeitsverhältnis und eine Vergütung 

nach TVÖD 

Wir freuen uns auf Ihre Bewerbung online. Dr. Klaus Mayer 

E-Mail: kmayer@helmholtz-muenchen.de, Telefon: 089 3187-3584 

Helmholtz Zentrum München 

Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt GmbH 

Institut für Bioinformatik und Systembiologie Postfach 11 29 

85758 Neuherberg 

Mitarbeiter gesucht? 

Nutzen Sie die Möglichkeit, zielgruppengerecht in unserem 

akademischen Stellenmarkt kostenlos zu werben. 

Auch online unter www.laborwelt.de 

Informationen erhalten Sie unter: 

a.macht@biocom.de 

oder tel.: 030-264 921-54 


Max-Planck-Institut 

für Neurobiologie 

Martinsried/München 

Das Max-Planck-Institut für Neurobiologie in Martinsried bei München 

betreibt Grundlagenforschung auf dem Gebiet der Entwicklung, 

Funktion und Krankheiten des Nervensystems. Für die Nachwuchsgruppe 

Dendritische Differenzierung suchen wir ab sofort einen/eine 

Technische/n Assistenten/in 

(BTA/MTA) zeitlich befristet 

Wir sind ein junges, engagiertes Team und suchen Verstärkung für 

Aufgaben im Bereich der Histologie, Molekularbiologie, Zellkultur und 

Genetik. Das Aufgabengebiet umfasst die technische Labororganisation, 

die Erhaltung unserer Fruchtfliegenlinien und die Planung und 

Durchführung von histologischen und molekularbiologischen 

Experimenten. 

Wir bieten ein hervorragend ausgestattetes Institut und einen abwechslungsreichen 

Arbeitsplatz in einer freundlichen und offenen 

Arbeitsatmosphäre. Weitere Informationen über das Institut finden Sie 

auf unserer Homepage 

http://www.neuro.mpg.de/english/junior/dendif/index.html 

Wünschenswert wäre ein/eine Mitarbeiter/in der/die sich selbständig 

und zuverlässig in unser Team einbringt. 

Die Vergütung erfolgt nach TVöD, die Stelle ist bis 28.02.2011 befristet. 

Die Max-Planck-Gesellschaft ist bemüht, mehr schwerbehinderte 

Menschen zu beschäftigen. Bewerbungen Schwerbehinderter sind ausdrücklich 

erwünscht. Die Max-Planck Gesellschaft will den Anteil von 

Frauen in den Bereichen erhöhen in denen sie unterrepräsentiert sind. 

Frauen werden deshalb ausdrücklich aufgefordert sich zu bewerben. 

Schriftliche Bewerbung In Deutsch oder Englisch mit den üblichen 

Unterlagen werden erbeten an: 

Max-Planck-Institut für Neurobiologie 

Verwaltung 

Am Klopferspitz 18,82152 Martinsried 

90x130mm 

At the University of Bern (Switzerland), 

Institute of Plant Sciences, a 

PhD position 

in Molecular Plant Physiology (www.ips.unibe.ch/plantphys) 

is available to work on the characterization of plant peptide 

transporters. Molecular, biochemical and physiological 

methods will be used to investigate the physiological role 

of peptide transporters in planta. 

We are looking for a motivated student interested in joining 

our research team. The position requires a diploma or 

M.Sc. degree in biology, biochemistry or equivalent and 

qualifications in plant molecular biology, plant physiology, 

cell biology or biochemistry. 

Salary will be according to the Swiss National Science Foundation and is limited 

to 36 months. Starting 1 th December 2009 or at earliest convenience. Applications 

should include a curriculum vitae, description of research interests and 

experience and name and address of two references. 

Please send your application to 

Prof. Dr. Doris Rentsch, plantphys@ips.unibe.ch 


The University Hospital of Cologne ranks among the leading 

university hospitals in Germany. Our 6,800 employees, 

working in more than 59 highly efficient clinics, polyclinics 

and institutes offer optimum inpatient and outpatient care 

as well as professional vocational training and continuing 

education programmes. With some 1,300 beds, we are one 

of the largest hospitals in the state of North Rhine-Westphalia. Our international 

reputation is based on our outstanding record as a provider of top-flight medical 

care and as a leading academic institution in the fields of medical research 

and teaching. 

The Institute of Neurophysiology at the Uniklinik Köln is seeking applications for a 

PhD student (TV-L E13, 50%) 

to be employed under a limited-time contract for 2 years with the possibility 

of extension. 

Our group is a part of the Institute of Neurophysiology (Director: Prof. Dr. Jürgen 

Hescheler) located at the University of Cologne (Germany). The Institute is part of 

the Medical Faculty and is traditionally involved in stem cell research. The major 

focus of the research at the Institute is on differentiation of embryonic stem 

(ES) and induced pluripotent stem (iPS) cells into cardiac, neuronal, haemangioblastic 

and others organotypic cells and on their functional characterization. 

Our group is engaged in the exploration of mechanisms involve in mouse 

and human ES and iPS cell-derived cardiomyocytes differentiation process 

and to characterize (structure and function) the resulting cardiomyocytes 

by using several techniques. Several well established ES and iPS cell lines 

and differentiation protocols are available. Recently, it has been shown that 

mechano- and electro-stimulation of stem cell in culture has strong effect on 

cardiac precommitment. 

Your responsibilities will include: 

The successful candidate will be responsible for establishing a chronic stimulation 

of different cell types in culture and to study the stimulation effect of ES 

and iPS cell during the differentiation process. 

The candidate will join a multidisciplinary team of scientists and will gain experience 

in a broad range of techniques including electrophysiology, calcium 

imaging, immunohistochemistry, PCR and microarray. 

Minimum qualifications: 

We are seeking a highly motivated, independent thinking, team- and hardworking 

candidate with a solid understanding and practical experience in 

cellular biology and physiology. 

The candidate must hold a MSc degree or equivalent and must be fluent in English. 

The knowledge in the field of stem cells, electrophysiology is desirable. 

Your salary will be based on (TV-L E13 , 50%). 

The Board of Directors of the University Hospital of Cologne places strong emphasis 

on gender equality and seeks to increase the proportional representation 

of women in this field. Thus applications from female scientists will be welcomed; 

suitably qualified women will be given preferential consideration unless other 

candidates clearly demonstrate superior qualifications. 

We also welcome applications from disabled candidates, who will also be 

given preferential consideration over other applicants with comparable qualifications. 

The position is suitable for staffing with part-time employees. 

Applications with Curriculum vitae including contact detail of references 

and a motivation letter should be sent until 25.09.2009 to: 

Filomain Nguemo, Ph.D., Institute of Neurophysiology 

Robert Koch Str. 39, 50931 Cologne, Germany 

Tel. 0221-478-6940, Fax 0221-478-3834 

or per e-mail to: filo.nguemo@uni-koeln.de 



FB 05_Prof. org. Chemie_2c:Layout 1 11.09.2009 11:29 Uhr Seite 1 

Die Hochschule Bonn-Rhein-Sieg ist eine erfolgreiche Hochschule 

mit rund 5000 Studierenden, 120 Professorinnen und 

Professoren, 6 Fachbereichen und 18 Studiengängen. 

Der Fachbereich Angewandte Naturwissenschaften, Campus 

Rheinbach, ist bestrebt, die Qualität seines Lehrangebotes zu 

sichern und weiter zu entwickeln. Daher ist im Rahmen der 

Einführung des Studiengangs Naturwissenschaftliche Forensik 

zum nächstmöglichen Zeitpunkt folgende Stelle zu besetzen: 

eine wissenschaftliche Mitarbeiterin/ 

ein wissenschaftlicher Mitarbeiter 

Das Aufgabengebiet umfasst: 

• Unterstützung der Hochschullehrerinnen und 

Hochschullehrer bei der Durchführung von Praktika 

• Mitwirkung bei Forschungs- und Entwicklungsvorhaben 

• Aufbau und die Betreuung des Labors für chemischforensische 

Analytik 

• Betreuung der Studierenden in den Praktika zur 

chemisch-forensischen Analytik und in weiteren naturwissenschaftlichen 

Grundlagenpraktika. Die Praktika 

finden teilweise in englischer Sprache statt. 

Die Aufgabenstellung erfordert: 

• ein stellenrelevantes (Fach-)Hochschulstudium 

• sehr gute Kenntnisse und praktische Erfahrungen 

in der instrumentellen chemischen Analytik 

• breite naturwissenschaftlich-technische Kenntnisse 

• gute Kenntnisse der englischen Sprache 

• sicheren Umgang mit Microsoft Office Anwendungen 

• Einsatzbereitschaft, Eigeninitiative und Teamfähigkeit 

Wir bieten Ihnen: 

• eine anspruchsvolle, vielseitige und selbständige Tätigkeit 

• flexible Arbeitszeiten 

• gute Fort- und Weiterbildungsmöglichkeiten 

Die Stelle ist zunächst auf 3 Jahre befristet und kann auch 

mit zwei Teilzeitkräften besetzt werden. Die Vergütung 

erfolgt je nach Qualifikation bis E12 TV-L. 

Auskünfte über die Stelle erteilt Ihnen gerne der Dekan des 

Fachbereichs Angewandte Naturwissenschaften, Herr Prof. 

Dr. Eßmann, unter der Telefonnummer 02241/865-500. 

Bewerbungen von Schwerbehinderten werden bei gleicher 

Qualifikation bevorzugt berücksichtigt. 

Bewerbungen mit den üblichen Unterlagen richten Sie bitte 

bis zum 5.10.2009 an die Hochschule Bonn-Rhein-Sieg, 

Personaldezernat, 53754 Sankt Augustin. 

www.hochschule-bonn-rhein-sieg.de 

Das Comprehensive Pneumologie Center (CPC) ist 

eine Kooperation zwischen dem Helmholtz Zentrum 

München, der Ludwig-Maximilians-Universität 

München, dem Klinikum der Ludwig-Maximilians- 

Universität München und den Asklepios Fachkliniken München-Gauting. 

Mit 1400 Studierenden ist die Hochschule Biberach eine 

kleine, aber renommierte und auch überregional ausgezeichnet 

aufgestellte Hochschule im Südosten Baden-Württembergs, 

Ranking-Ergebnisse sowie Evaluations- und 

Akkreditierungsagenturen bestätigen dies. Ihr bundesweit 

einmaliger Studiengang Pharmazeutische Biotechnologie 

wurde 2006 als Public-Private-Partnership verwirklicht, 

u. a. mit den Pharma-Unternehmen Boehringer-Ingelheim 

Deutschland und Rentschler Biotechnologie. Der Studiengang 

realisiert erfolgreich eine praxisnahe Lehre im 

Bereich der biopharmazeutischen Herstellung, Qualitätssicherung 

und Entwicklung. 

In diesem Studienfeld ist an der Hochschule Biberach zum 

01.03.2010 oder später eine 

W 2 - Professur 

(Kennziffer PBT 08) 

für das Lehrgebiet Zellkulturtechnik zu besetzen. 

Bewerber/innen sollten über einen überdurchschnittlichen 

Hochschulabschluss und eine Promotion sowie über mehrjährige 

einschlägige Erfahrungen in der Zellkulturtechnik 

eukaryontischer Zellen verfügen. 

Die/der zukünftige Stelleninhaber/in soll Vorlesungen und 

praktische Übungen in den Lehrgebieten der Zellkulturtechnik, 

Verfahrenstechnik, Bioprozesstechnik, -entwicklung 

und in verwandten Disziplinen übernehmen. Darüber 

hinaus wird die aktive Mitarbeit in der Selbstverwaltung 

und in Gremien erwartet. 

Eine detaillierte Beschreibung des Lehrgebiets erhalten Sie 

vom Dekan, Herrn Prof. Dr. Hannemann unter Tel. 07351/ 

5 82-450. 

Es wird vorausgesetzt, dass die/der zukünftige Stelleninhaber/in 

beim Auf- und Ausbau sowie bei der Fortentwicklung 

des Studiengangs Pharmazeutische Biotechnologie 

tatkräftig mitarbeitet. 

Nähere Informationen zur Dienstaufgabe, zu den Bewerbungs- 

und Einstellungsvoraussetzungen und die ausführliche 

Stellenausschreibung finden Sie unter 

www.hochschule-biberach.de/sections/service/stellenanzeigen 

Bitte senden Sie Ihre Bewerbung unter Angabe der Kennziffer 

mit den üblichen Unterlagen bis 16.10.2009 an die 

Hochschule Biberach. 

HBC Hochschule Biberach I Personalabteilung 

Karlstr. 11, 88400 Biberach, Tel. Nr. 0 73 51/5 82-1 20 

www.hochschule-biberach.de 

Zielsetzung des CPC ist die Erforschung grundlegender Mechanismen von chronischen Lungenerkrankungen, sowie die Entwicklung neuer Ansätze für die Diagnostik und 

Therapie dieser Erkrankungen. 

Für das Comprehensive Pneumologie Center suchen wir für die Forschungsbereiche Chronisch obstruktive Lungenerkrankungen, Medical Biobanking und Primärzellkulturen 

am Standort Großhadern in München zum nächstmöglichen Zeitpunkt 

4 Technische Assistenten/innen - Lungenforschung (173/2009) 

Ihre Aufgaben: Generierung und Kultivierung primärer Zellkulturen aus Gewebeproben / Systematische Erfassung und Archivierung biologischer Proben / Charakterisierung 

biologischer Proben mittels molekular- und zellbiologischer Methoden 

Ihre Qualifikation: Ausbildung als MTA / BTA / CTA oder vergleichbare Ausbildung / Flexibilität und Zuverlässigkeit / hohe Motivation und Teamfähigkeit 

Unser Angebot: Tätigkeit in einem innovativen, zukunftsorientierten Unternehmen / umfangreiches Fortbildungsangebot / zunächst für zwei Jahre befristetes Arbeitsverhältnis 

und eine Vergütung nach TVÖD, Arbeitsplatz ab November 2009 / Am Max-Lebsche-Platz 30-32 • 81377 München/Großhadern 

Wir freuen uns auf Ihre Bewerbung. Prof. Dr. Oliver Eickelberg • E-Mail: lauer@helmholtz-muenchen.de • Telefon: 089 3187-3071 


Paul-Ehrlich-Institut Paul-Ehrlich-Straße 51 - 59, 

63225 Langen, Telefon (06103) 77-11 00 

Das Paul-Ehrlich-Institut ist eine wissenschaftliche Einrichtung des Bundes, die 

als Bundesoberbehörde für die Zulassung und Chargenprüfung immunbiologischer 

Arzneimittel zuständig ist und auf den damit verbundenen Gebieten der 

Lebenswissenschaften (z.B. Virologie, Bakteriologie, Allergologie, Immunologie, 

Hämatologie, Medizinische Biotechnologie) Forschung betreibt. 

Im Fachgebiet „Virussicherheit“ der Abteilung - Virologie ist zum nächstmöglichen 

Zeitpunkt die Position einer / eines 

FÜR: MDC AG MEIER „RNA EDITING AND HYPEREXCITABILITY DISORDERS“ wird 

1 Doktorand/-in 

gesucht. 

Wissenschaftlerin / Wissenschaftlers 

Stellenbewertung: E 13 / 14 TVöD 

Bewerbungskennziffer: 44 / 2009 zu besetzen. 

Aufgabenprofil: 

– Bewertung der Virussicherheit von biologischen Produkten 

(Plasmaprodukte, monoklonale Antikörper, Zellkulturprodukte, Gentransferarzneimittel 

und Gewebezubereitungen) bei europäischen und nationalen 

Zulassungen von Arzneimitteln und von Präparaten zur klinischen Prüfung 

– Bewertung der Sicherheit dieser Produkte im Hinblick auf TSE (Prionen) 

– Beratung von pharmazeutischen Unternehmern im Rahmen von Arzneimittelzulassungen 

und klinischen Studien 

– Forschungsarbeiten zu Themen der Virussicherheit 

Anforderungsprofil: 

– Abgeschlossenes naturwissenschaftliches oder medizinisches/veterinärmedizinisches 

Hochschulstudium 

– Promotion 

– Fundiertes Wissen in allgemeiner Virologie, Kenntnisse in medizinischer 

Virologie und Virusdiagnostik 

– Praktische Erfahrung in klassischen Methoden der Virologie sowie in molekularbiologischen 

Techniken 

– Kenntnisse auf den Gebiet der Herstellung von biologischen Arzneimitteln 

bzw. Proteinreinigung 


Tätigkeitsbeschreibung: Die ausgeschriebene Stelle ist im Rahmen einer Helmholtz-Hochschul-Nachwuchsgruppe am Max-Delbrück-Centrum für molekulare Medizin 

(MDC), die sich mit der Entwicklung alternativer Epilepsietherapien befasst, zu besetzen. 

Project description: 

In a healthy organism, a balance is maintained between the excitation and inhibition of electrical impulses generated by neurons in the brain. Deregulation of this 

balance results in nervous system disorders. A core aspect of our work concerns the study of the brain at the molecular level, by investigating a post-transcriptional 

enzymatic process known in research as “RNA editing” or “splicing”. We search for disease-associated alterations in post-transcriptional processes in the nervous 

system. Within this context, we are more closely scrutinizing glycine and GABA(A) receptors and gephyrin – key components of the molecular machine responsible 

for inhibition of electrical impulses in the brain. 

The open position focuses on identification of ligands specific to RNA-edited brain GlyR. 

Voraussetzungen: 

Abgeschlossenes Studium, Erfahrung im Umgang mit DNA/RNA, mit molekularbiologischen Techniken, primären Zellkulturen, Zellinien, Transfektion und Genexpression, 

Immunzyto-/histochemie; Darüberhinaus sind EDV-Kenntnisse (MS-Office, Photoshop, Statistik) sowie gute Englischkenntnisse vorteilhaft. 

Vergütungsgruppe Promotions-übliche Vergütung 

Eintrittstermin: Sofort 

COLOGNE INTERNATIONAL GRADUATE SCHOOL 

From Embryo to old Age, Development, Health 

and Disease 

6 Fellowships 

3-year Ph.D. programme starting spring 2010 

The University of Cologne has a long-standing tradition and world-wide reputation 

of top-level molecular biological research. Beginning in spring 2010 

the Research School in Biology „From embryo to old age: the cell biology and 

genetics of health and disease“ will be offering a high-level Ph.D. programme 

for students with excellent qualifications. The participating research groups 

use today‘s microbial, plant and animal model systems to investigate cell 

biological and genetic mechanisms whose perturbation during the life cycle of 

an organism results in disease. 

The three-year programme starts with a six-month rotation and course period, 

followed by a PhD project in one of the participating groups. Seminars and 

training courses complement the research work. Comprehensive support is 

provided throughout the programme. The programme language is English. Accepted 

students get a laptop computer and 500 EUR to get started in Cologne. 

No tuition fees apply. 

Six competitive three-year fellowships (initially 1000 EUR, then 1300 EUR per 

month) are available. 

We invite you to apply to the IGSDHD in Cologne, the exciting city in the heart 

of Europe. 

To obtain further information please visit our website at: 

http://www.uni-koeln.de/bio-graduateschool/ 

Submission deadline of complete applications is October 31, 2009 

Contact: Dr. Isabell Witt, IGSDHD, Zülpicher Strasse 47, D-50674 Cologne, 

Phone: +49(0)221 4701683, Fax: +49(0) 470 1632, 

isabell.witt@uni-koeln.de 

Nähere Auskünfte über die Aufgaben erteilt: Prof. Dr. Jochen Meier 

Tel: (030) 94063062, http://www.mdc-berlin.de/en/research/research_teams/rna_editing_and_hyperexcitability_disorders/index.html 

Bitte richten Sie Ihre Bewerbungen mit den üblichen Unterlagen (CV mit Bild, Zeugniskopien) an: jochen.meier@mdc-berlin.de 


Service Verbände 

Kontakt zu Verbänden 

Die Mitglieder der nachfolgenden Fachgesellschaften erhalten LABORWELT regelmäßig mit 

freundlicher Empfehlung ihrer Organisationen. Wer sich darüber hinaus für eine Mitarbeit oder 

einen Beitritt interessiert, erreicht die Fachgesellschaften unter den folgenden Kontaktdaten: 

Ich interessiere mich für 

den Beitritt 

Unterstützung für Jungwissenschaftler 

Interessenvertretung 

eine Spende 

Fachgruppen im Bereich 

Verband (siehe unten, bitte ankreuzen) 

Dt. Ver. Gesell. f. Klinische Chemie 

und Laboratoriumsmedizin e.V. (DGKL) 

Geschäftsstelle der DGKL 

Im Mühlenbach 52 b 

53127 Bonn 

Tel.: +49-(0)-228-92-68-9522 

Fax: +49-(0)-228-92-68-9527 

geschaeftsstelle@dgkl.de 

www.dgkl.de 

Deutsche Gesellschaft für 

Proteomforschung 

BIO Deutschland 

c/o MPI für Biochemie 

Am Klopferspitz 18a 

82152 Martinsried 

Tel.: +49-(0)-89-1897-9007 

Fax: +49-(0)-89-1897-9009 

c.kleinhammer@dgpf.org 

www.dgpf.org 

Tegeler Weg 33/ 

berlinbiotechpark 

10589 Berlin 

Tel.: +49-(0)-30-3450593-30 

Fax: +49-(0)-30-3450593-59 

info@biodeutschland.org 

www.biodeutschland.org 

Deutsche Gesellschaft für Hygiene 

und Mikrobiologie (DGHM) 

c/o Institut für Hygiene und 

Med. Mikrobiologie 

Carl-Neuberg-Straße 1 

30625 Hannover 

Tel.: +49-(0)-511-532-4655 

Fax: +49-(0)-511-532-4355 

www.dghm.org 

bts (Biotechnologische Studenteninitiative 

e.V.) 

c/o BIOCOM 

Stralsunder Straße 58–59 

13355 Berlin 

Tel.: +49-(0)-2649-21-21 

Fax: +49-(0)-2649-21-11 

www.bts-ev.de 

Bitte kontaktieren Sie mich 

Name Firma 

Tel. Fax 

E-Mail 

Gesellschaft für Genetik 

GESELLSCHAFT FÜR GENETIK 

c/o HZM – Deutsches 

Forschungszentrum für 

Gesundheit/Inst. of Developmental 

Genetics 

Tel.: +49-(0)-89-3187-2610 

Fax: +49-(0)-89-4620 

www.gfgenetik.de 

Gesellschaft für Signaltransduktion 

c/o Prof. Dr. Ralf Hass 

Med. Hochschule Hannover 

AG Biochemie u. Tumorbiol. 

30625 Hannover 

Tel.: +49-(0)-511-532-6070 

Fax: +49-(0)-511-532-6071 

www.sigtrans.de 

Gesellschaft für Pharmakologie und 

Toxikologie 

Geschäftsstelle der DGPT 

Achenbachstraße 43 

40237 Düsseldorf 

Tel.: +49-(0)-211-600-692-77 

Fax: +49-(0)-211-600-692-78 

mitglieder@dgpt-online.de 

www.dgpt-online.de 

Nationales Genomforschungsnetz 

c/o DKFZ 



Tel.: +49-(0)-6221-424-743 

Fax: +49-(0)-6221-423-454 

S.Argo@dkfz-heidelberg.de 

www.ngfn.de 

Deutsche Gesellschaft für 

Neurogenetik 

Institut für Humangenetik 

Calwer Straße 7 


Tel.: +49-(0)-7071-2977692 

Fax: +49-(0)-7071-295171 

peter.bauer@ 

med.uni-tuebingen.de 

www.hih-tuebingen.de/dgng/ 

Seite bitte abtrennen – per Fax an 030-264921-11 

Netzwerk Nutrigenomik 

RNA-Netzwerk 

Netzwerk Nutrigenomik 

Arthur-Scheunert-Allee 114 

14558 Nuthetal 

Tel.: +49-(0)-33200-88-301 

Fax: +49-(0)-33200-88-541 

mail@nutrigenomik.de 

www.nutrigenomik.de 

c/o Prof. Dr. Volker A. Erdmann 

Freie Universität Berlin 

Thielallee 63, 14195 Berlin 

Tel.: +49-(0)-30-8385 6002 

Fax: +49-(0)-30-8385 6413 

erdmann@chemie.fu-berlin.de 

www.rna-network.com 

FA Life Science Research im VDGH 

c/o VDGH im VCI 

Mainzer Landstraße 55 

60329 Frankfurt am Main 

Tel.: +49-(0)-69-2556-1730 

Fax: +49-(0)-69-236650 

vdgh@vdgh.de 

www.vdgh.de 

Österreichische 

Reinraumgesellschaft (ÖRRG) 

ÖRRG 

Neudorf 41 

A-8262 Ilz 

Tel.: +43-(0)-3385-8117 

Fax: +43-(0)-3385-8117 

office@oerrg.at 

www.oerrg.at 

Österreichische Ges. f. Laboratoriums- 

medizin & Klinische Chemie 

ÖGLMKC Geschäftsstelle 

Infomedica-KEG, Xenius Behal 

Tullnertalgasse 72 

A-1230 Wien 

Tel./Fax: +43-(0)-1889-6238 

office@oeglmkc.at 

www.oeglmkc.at 


Fujifilm 

DNA-Extraktion für 

die IVD zugelassen 

Die Fujifilm-Produkte QuickGene-Mini80, 

QuickGene-810, sowie das DNA Whole Blood 

Kit sind nun CE IVD gekennzeichnet. Die seit 

Jahren erfolgreich eingesetzten QuickGene- 

Systeme können ab sofort als prä-analytische 

Methode für die medizinische molekulare 

Diagnostik verwendet werden. 

Die QuickGene-Systeme nutzen eine von Fujifilm 

patentierte, 80 µm poröse Membran, die 

Nukleinsäuren selektiv bindet. Diese Membran 

mit gleichmäßig feinen Poren und einer großen, 

spezifisch bindenden Oberfläche sorgt für hohe 

Ausbeuten und Reinheit. Ihre besonderen Eigenschaften 

ermöglichen eine DNA-Extraktion 

durch Luftdruck ohne Zentrifugationsschritte. 

QuickGene-Mini80 CE IVD ist ein besonders 

kleines Tischgerät. Es gestattet, gleichzeitig 

genomische DNA aus acht Proben innerhalb 

von 12 Minuten manuell zu extrahieren. Das 

benutzerfreundliche und günstige System 

ist besonders für kleine diagnostische Labore 

attraktiv. Für Hochdurchsatzlabore ist das 

QuickGene-Mini80 CE IVD eine sinnvolle 

Back-up-Methode für kurzfristige und dringende 

Tests. QuickGene-810 CE IVD ist ein 

semi-automatisches Gerät, das für mittelgroße 

Labore geeignet ist. Auch dieses Gerät ist ein 

kompaktes, platzsparendes Tischgerät, und 

genomische DNA aus acht Vollblutproben kann 

in sechs Minuten extrahiert werden. 

Die mit dem DNA Whole Blood Kit CE IVD 

und einem der QuickGene-Geräte gereinigte 

genomische DNA ist für In-Vitro-Diagnostik- 

Untersuchungen vorgesehen. Sie ist für humangenetische 

Arbeitsmethoden wie PCR, DNA 

Microarrays, Sequenzierung, Restriktionsverdau 

und andere molekularbiologische Anwendungen 

optimal geeignet. 

FUJIFILM Europe GmbH 

40549 Düsseldorf 

Heesenstr. 31 

Tel.: + 49-(0)211-5089-214 

presse@fujifilm.de 

www.fujifilm.de/lifescience 

Fluidigm 

Service Produktwelt 

Fluidigm: Neuer IFC ermöglicht 9.216 simultane 

Real-Time PCR-Experimente in drei Stunden 

Fluidigms BioMark 96.96 Dynamic Array – ein 

neuer “Integrated Fluidic Circuit” (IFC) – erlaubt 

9.216 simultane PCR-Experimente im Nanoliter- 

Maßstab und setzt so neue Maßstäbe in Sachen 

Kosteneffizienz und Logistik. Die IFC vereinen die 

Vorzüge von Mikrotiterplatten (Flexibilität) und 

Microarrays (Durchsatz). Sie sind nicht vorkonfiguriert, 

vorhandene Assays können einfach 

übertragen werden. 

Der 96.96 Dynamic Array ist für SNP- und 

Genexpressionsstudien sowie andere Applikationen, 

wie CNV oder Single Cell-Studien, optimiert, 

ohne Kompromisse in der Datenqualität 

einzugehen. 

Ein Vergleich von Fluidigms 96.96 Dynamic 

Arrays mit 384 Well-Systemen in 10µL Reaktionsvolumen 

zeigt die signifikant bessere Produktivität 

und Effizienz am Beispiel von 96 Proben, 

die gegen 96 Assays getestet werden: 

I 24-fach höherer Durchsatz: Ein 96.96 Array 

entspricht 24.384-MT Platten 

I 192-fach weniger Master Mix: 240 µl anstelle 

von 46.080 µl 

I 96-fach reduzierte Komplexität: 192 statt 

18.432 Pipettierschritte im MT-Format 

I vier Stunden bis zum Ergebnis für 9.216 Reaktionen. 

PromoCell 

Schnelle Detektion apoptotischer, 

nekrotischer und intakter Zellen 

PromoKines Kits zur simultanen Differenzierung 

apoptotischer, nekrotischer und intakter Zellen 

basieren auf dem Einsatz dreier Fluoreszenzfarbstoffe, 

die diese Zellen jeweils spezifisch 

anfärben: Annexin V-FITC bindet spezifisch mit 

hoher Affinität an die Zelloberfläche von Zellen 

in der frühen apoptotischen Phase und färbt diese 

grün. Das rot-fluoreszierende EtD-III kann nur 

die zerstörten Membranbereiche nekrotischer 

Zellen passieren und bindet dort an die DNA 

des Zellkerns, während es nicht in intakte Zellen 

eindringt. Der DNA-Farbstoff Hoechst 33342 

passiert auch die Membran lebender Zellen 

und färbt deren Kern blau an. Die Zellen können 

unter dem Fluoreszenzmikroskop detektiert 

und ausgezählt oder durchflusszytometrisch 

analysiert werden. Des Weiteren bietet Promo- 

Kine eine Vielzahl an Kits und Reagenzien zum 

sensitiven Nachweis und zur Quantifizierung 

von Apoptose (z.B. Caspase-, Kinase-,Annexin 

V- und TUNEL-Assays), Signaltransduktion, 

Zellviabilität, Zytotoxizität, Seneszenz, Zellstress, 

Zellmetabolismus und Reportergenen an. Neben 

Antikörpern, rekombinanten Proteinen (z.B. 

Zytokine) und ELISA-Kits ergänzen zahlreiche 

Für den mittleren Durchsatz bietet Fluidigm den 

48.48 Dynamic Array an und der Digital Array 

erlaubt eine exquisite absolute Quantifizierung 

für die Detektion seltener Targets oder hochauflösender 

Copy Number Variation (CNV). 


Locatellikade 1, 1076 AZ Amsterdam 

Tel.: +31-(0)20-578-88-53 

harry.boeltz@fluidigm.com 


Fluoreszenzfarbstoffe und Kits zum Anfärben 

von Zellstrukturen, zum Nachweis zellulärer 

Prozesse und zum Markieren von Biomolekülen 

(Proteine, Antikörper und Nukleinsäuren) das 

zellbiologische Produktangebot. Außerdem 

findet sich ein breites Sortiment an Kits und 

Reagenzien für die Zelltransfektion sowie zur 

Klonierung, Expression und Repression (silencing, 

knockout) von Genen. 

PromoCell GmbH 

Tel.: +49-(0)6221-649-340 

info@promokine.info 

www.promokine.info 


Service Produktwelt 

Roche 

Echtzeit-Monitoring von 

Migration und Invasion 

Das xCELLigence System von Roche Applied 

Science ist ein Cell Analyzer, der ein markierungsfreies 

und dynamisches Monitoring 

zellbasierter Assays über die gesamte Dauer 

eines Experimentes ermöglicht. 

Das neue xCELLigence RTCA DP System 

quantifiziert zelluläre Reaktionen nichtinvasiv 

und in Echtzeit über die Messung 

der elektrischen Impedanz. Zellen werden in 

sogenannten E-Plates® im 3x16 Well-Format 

kultiviert. In die Wells ist ein mikroelektronischer 

Gold-Sensorarray integriert. 

Eine Zelle, die mit den Mikroelektroden 

in Berührung kommt, verändert den elektrischen 

Widerstand zwischen Elektroden 

und Medium. Jede Veränderung in der Zelle 

– sei es durch Zelladhäsion, Zellinteraktion, 

Zelltod, Zellproliferation oder aber morphologische 

Veränderungen – führt wiederum 

zu Änderungen in der Widerstandsmessung 

und kann somit einfach und schnell detektiert 

werden. 

Eine Markierung der Zellen ist nicht erforderlich. 

Eine ganze Reihe von zellbasierten Assays 

lässt sich so schnell und bequem durchführen, 

zum Beispiel zur Qualitätskontrolle 

von Zellen, zur Zellproliferation, Substanz-, 

Zell- und virusvermittelten Zytotoxizität, zur 

Barrierefunktion, Messungen zur Zelladhäsion 

und -ausbreitung sowie zur Rezeptorvermittelten 

Signalübertragung. 

Zusätzlich ist es mit dem RTCA DP System 

möglich, mit einer speziell modifizierten 

Boyden-Kammer (CIM- Plate) die Migration 

beziehungsweise Invasion von Zellen in Echtzeit 

(Real Time) kontinuierlich zu beobachten. 

So lässt sich zum Beispiel die Migration von 

Krebszellen in Richtung eines Chemoattraktans 

verfolgen, wobei aufwendige Färbungen, 

das Abschaben von Zellen sowie Zellzählungen 

entfallen. 


Roche Applied Science 

Sandhofer Str. 116 

68305 Mannheim 

Tel.: +49-(0)621-759-8568 


www.xcelligence.roche.com 

Porvair 

Spezielle Mikrotestplatte zur Aufbewahrung 

lichtempfindlicher Analysen und Proben 

Der Mikrotestplattenspezialist Porvair Sciences 

Ltd. hat eine neue extratiefe Platte mit 96 

schwarzen Vertiefungen zur Aufbewahrung 

von Analysen und Proben, die potentiell lichtempfindlich 

sind, entwickelt. Das Arbeitsvolumen 

beträgt 1 ml pro Vertiefung. Die neuen 

extratiefen Porvair-Platten sorgen dafür, dass 

Analysen und Proben selbst bei langfristiger 

Aufbewahrung nicht durch Lichteinfluss 

beschädigt werden. Die schwarzen Vertiefungen 

zeichnen sich durch eine zylindrische 

Form mit runden Böden aus und bieten somit 

optimale Bedingungen zum Mischen und 

zur Entnahme der Proben. Die Abmessungen 

entsprechen genau den Anforderungen der 

entsprechenden ANSI/SBS-Regelungen. Dadurch 

wird die Kompatibilität mit fast allen 

Lesegeräten und Automaten sichergestellt. 

Die neuen schwarzen Vertiefungen sind frei 

von Ribonuklease und Desoxyribonuklease, 

so dass sie selbst bei empfindlichsten biologischen 

Proben zum Einsatz kommen können. 

Zum zusätzlichen Schutz lichtempfindlicher 

Proben bietet Porvair Sciences auch schwarze, 

lichtabsorbierende Versiegelungsfolien an, 

die oben auf den schwarzen Platten angebracht 

werden können. Die neuen schwarzen 

Mikrotestplatten von Porvair sind aus Poly- 

Millipore 

Proteinkonzentrierung aus einem einzigen Tropfen 

Die Amicon® Ultra-0,5 Zentrifugen-Filtereinheit 

verbindet höchste Rückgewinnungsraten 

mit kürzesten Zentrifugationszeiten. Mit 25- 

bis 30-facher Konzentrierung und Rückgewinnungsraten 

von 90% bei nur zehnminütiger 

Zentrifugation bietet die Amicon Ultra-0,5 

Filtereinheit die höchsten Rückgewinnungsraten 

und die kürzesten Zentrifugationszeiten 

in ihrer Produktklasse. Die Einheit ist aktuell 

mit Ultrafiltrationsmembranen mit einer 

molekularen Trenngrenze (MWCO) von 3.000 

oder 10.000 erhältlich. Zusätzliche Trenngrenzen 

werden in den kommenden Monaten 

angeboten. 

Die effektive Probenkonzentrierung ist 

ein äußerst wichtiger Schritt in der Protein- 

Biochemie. Oftmals ist die Probenkonzentrierung 

nicht nur der abschließende Schritt 

eines langwierigen Aufreinigungsverfahrens, 

sondern auch der Schritt, von dem der Erfolg 

und die Reproduzierbarkeit von Downstream- 

Analysen abhängen. 

Die Amicon Ultra-0,5 Zentrifugen-Filtereinheiten 

besitzen eine vertikal ausgerichtete 

Membran und können umgekehrt zentrifugiert 

werden. Dadurch wird sowohl eine 

propylen hergestellt und verfügen über eine 

herausragende Lösemittelbeständigkeit. Da 

ausschließlich ultrahochreine Polymere zum 

Einsatz kommen, lassen die extratiefen Platten 

mit schwarzen Vertiefungen so gut wie keine 

Auslaugungen zu, so dass die Proben über einen 

langen Zeitraum unverfälscht bleiben. 

Porvair Sciences Ltd. 

Unit 6, Shepperton Business Park 

Govett Avenue 

Shepperton, Middlesex, TW17 8BA, UK 

Tel.: +44-(0)1372-824290 

int.sales@porvair-sciences.com 

schnelle Konzentrierung als auch eine hohe 

Ausbeute erzielt. Ein integrierter Trockenlaufschutz 

verhindert das Austrocknen der Proben 

und somit die Denaturierung labiler Proteine. 

Die Amicon Ultra-0,5 Filtereinheit ergänzt 

die Amicon Ultra-4- und Amicon Ultra-15- 

Filtereinheiten, die standardmäßig für die 

Probenvorbereitung verwendet werden. 

Dr Ulrike Baer-Chardot 

Millipore 


Tel.: +33-(0)1-301270-37 

ulrike_baer-chardot@millipore.com 


September 2009-November 2009 

Veranstaltungskalender 

28.09.09 

Biosimilars Workshop 2009, London (UK) 

Info: DIA Drug Information Association 

(E-Mail: diaeurope@diaeurope.org 

Web: www.diahome.org) 

01.-02.10.09 

Ethik der Synthetischen Biologie, Freiburg 

Info: Dr. Joachim Boldt, Institut für Ethik und 

Geschichte der Medizin (E-Mail: boldt@igm.unifreiburg.de, 

Web: www.igm.uni-freiburg.de) 

02.10.09 

BPI BioPharm Praxisseminar, München 

Info: BPI (E-Mail: info@bpi.de, 

Web: www.bpi.de) 

22. Oktober 2009, Frankfurt/Main 

Science4Life-Messe 

Die Gründerinitiative Science4Life präsentiert 

ihre Kinder: Teilnehmer aus elf 

Jahren stellen ihre Technologien und 

Produkte vor. Das Angebot wird darüber 

hinaus bereichert durch eine Partneringund 

eine Stellenbörse. Information: www. 

science4life.de 

06.-08.10.09 

BIOTECHNICA 2009, Hannover (D) 

Info: Deutsche Messe AG 

(Web: www.biotechnica.de) 

07.-10.10.09 

6. Jahrestagung der Deutschen Vereinten 

Gesellschaft für Klinische Chemie und Laboratoriumsmedizin 

(DGKL), Leipzig 

Info: Claudia Mittelbach, Conventus (E-Mail: 

claudia.mittelbach@conventus.de, 

Web: www.conventus.de/dgkl2009/) 

Foto: Rentschler Biotechnologie GmbH 

24.-27. November 2009 in Berlin 

Homogenität in Bioraktoren 

Das BioProScale-Symposium „Inhomogenities 

in Large Scale Bioreactors – Description, 

Scaling, Control“ soll Experten aus der 

industriellen Praxis zusammenbringen. 

Schwerpunkte sind: Rühren und Mischen, 

Zellphysiologie, Sensoren und Probennahme 

sowie die Simulation von Prozessen. 

www.ifgb.de/bioproscale 

07.-09.10.09 

ScanBalt Forum and Biomaterials Days 2009, 

Kalmar (SE) 

Info: Peter Frank, Scanbalt General Secretary 

(Web: www.scanbalt.org/forum2009) 

13.10.09 

Grüne und Weiße Biotechnologie – Nutzen für 

Unternehmen, Köln 

Info: Detlef Kürten, IHK Köln/Phytowelt Green 

Technologies GmbH, (Web: http://www.ihkkoeln.de/VeranstaltungBiotech.) 

14.-15.10.09 

Scanning Probe Microscopy in Life Sciences/ 

Optical Tweezers in Life Sciences, Berlin 

Info: JPK Instruments 

(Tel.: +49-03-5331-120-70, 

E-Mail: info@nanobioviews.net, 

Web: www.nanobioviews.net) 

15.-18.10.09 

The Evolution of Medicine – World Health 

Summit, Berlin 

Info: Dr. Mazda Adli, World Health Summit 

Conference Secretariat 

(E-Mail: mazda.adli@charite.de, 

Web: www.worldhealthsummit.org) 

20.-22.10.09 

Medical Biodefense Conference, München 

Info: Bundeswehr-Institut für Mikrobiologie 

(E-Mail: info@biodefense2009.org, 

Web: www.biodefense2009.org) 

Service Kalender 

26.-28.10.09 

Immunogenität bei Biopharmazeutika, 

Berlin 

Info: Mark Reichmann, IQPC 

(E-Mail: mark.reichmann@iqpc.de, 

Web: www.immunogenitaet.de) 

27.-28.10.09 

Projektleiter und Beauftragter für die biologische 

Sicherheit, Karlsruhe 

Info: R. Weyershäuser, FTU Karlsruhe 

(E-Mail: renate.weyershaeuser@ftu.fzk.de, 

Web: www.fortbildung.fzk.de) 

28.10.09 

Förderung nachhaltiger Biotechnologie – 

Projekt- und Partnerfindungsworkshop zur 

5. DBU-ChemBioTec-Antragsrunde, 

Frankfurt am Main 

Info: ChemBioTec (Web: www.chembiotec.de) 

29.10.09 

4 rd Fraunhofer Life Science Symposium, 

Leipzig 

Info: Inst. für Zelltherapie und Immunologie, 

Leipzig (Web: www.fs-leipzig.com) 

29.-30.10.09 

Trenn- und Fraktionierverfahren in der 

Lebensmittel- und Biotechnologie, Weihenstephan 

Info: Sabine Becker, TU München 

(E-Mail: Sabine.Becker@wzw.tum.de, 

Web: www.technologieseminar-2009.de) 

30. November – 2. Dezember 2009 

Pharmakovigilanz, Wiesbaden 

Auf dem 4. Jahresforum Pharmakovigilanz 

werden neue Entwicklungen wie die regulatorischen 

Entwicklungen auf EU-Ebene 

oder neue Meldepflichten durch die AMG- 

Novelle diskutiert. Information: 

www.pharmakovigilanz-konferenz.de 


Ausblick 

SynBio: Furcht statt 

Ingenieurskunst? 

Thomas Gabrielczyk 

Als Wissenschaftler muss man manchmal auch spinnen können und sich ausmalen, was wäre 

wenn…. Genauso scheint es momentan mit der Synthetischen Biologie: das Konzept biologische 

Systeme von Grund auf neu zu planen, aus künstlichen Bauelementen zusammenzusetzen und 

industriell zu nutzen, gibt es schon seit fast zwei Jahrzehnten. Nun schwappt die Begeisterung für 

die Neuschöpfung von Bakterien, lebensunfähigen Protozellen und künstlichen Reaktionskompartimenten, 

die Erdöl und alles erdenklich Nützliche produzieren – getragen von professionellen 

Bio-Meinungsmachern wie Craig Venter, Jay Keasling, George Church, Drew Endy – endlich über 

den großen Teich. Und die Visionen, die aus dem Land kommen, das bereits viermal soviel Geld 

wie die EU in das Forschungsgebiet gesteckt hat, können wirklich begeistern. Entstehen soll eine 

Art Weiße Superbiotechnologie, in der künstlich programmierte Minimalsysteme fabrikgleich 

alles produzieren, was heute in der Industriellen Biotechnologie gerade nicht klappt, weil bisher 

weitgehend empirie- und wenig wissensgestützt: Biotreibstoffe aus Cellulose sind da eher die 

Untergrenze der Erwartung. Doch falls der Proof-of Concept gelingt, könnte das Feld gerade für 

Deutschland interessant werden – stellt die Bundesrepublik schließlich den Weltmarktführer für 

synthetische Gene und ist für seine Ingenieurskunst bekannt. Warum also kein VW der produzierenden 

Biotechnologie werden, wenn schon die Vermarktung und Anwendung des deutschen 

Forschungs-Welthits Grüne Gentechnik nicht geklappt hat? 

Die gute Nachricht wäre daher ein umfassendes 

Förderprogramm, um frühzeitig kritische 

Masse gegenüber den USA zu generieren. Doch 

so laufen die Uhren in Europa nicht – und schon 

gar nicht in Deutschland. Zwar empfiehlt die 

Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) in 

einem mitten im Sommerloch publizierten 

Positionspapier zur synthetischen Biologie 

ausdrücklich eine Förderung der Grundlagenforschung. 

Doch nicht einmal ein Schwerpunktprogramm 

ist das Lippenbekenntnis 

in näherer Zukunft den Bonnern wert. Auch 

die Max-Planck-Gesellschaft zeigt sich wenig 

begeistert. Der einzige auf dem Gebiet Forschende 

habe einen Ruf erhalten und verlasse 

bald sein Institut im Süden Deutschlands, 

heißt es. 

Anstatt die Begeisterung für das Feld weiterzugeben 

und damit Kräfte zu wecken, verfallen 

Europäer und Deutsche erneut in die alte Gewohnheit, 

zunächst eine öffentliche Diskussi- 

Impressum 

LABORWELT (ISSN 1611-0854) 

erscheint zweimonatlich im 

BIOCOM Verlag GmbH 

Stralsunder Straße 58–59 

13355 Berlin, Germany 

Tel./Fax: 030/264921-0 / 030/264921-11 

laborwelt@biocom.de 

www.biocom.de 

Redaktion 

Dipl.-Biol. Thomas Gabrielczyk 

Tel.: 030/264921-50 

Anzeigenleitung 

Oliver Schnell 

Tel. 030/264921-45, 

o.schnell@biocom.de 

Leserservice 

Angelika Werner 

Tel. 030/264921-40 

Bildtechnik und Layout 

Heiko Fritz 

Graphik-Design 

Michaela Reblin 

Druck: 

Druckhaus Humburg GmbH, 28325 Bremen 

Für einen regelmäßigen Bezug von LABORWELT 

ist eine kostenlose Registrierung unter www. 

biocom.de oder per Fax erforderlich. Namentlich 

gekennzeichnete Beiträge stehen in der 

inhaltlichen Verantwortung der Autoren. 

on zu den nicht so tollen Seiten anzustoßen. Ob 

diese Strategie der vorgreifenden Diskussion 

etwaiger Nachteile Jahre vor jeder absehbaren 

Anwendung tatsächlich Akzeptanz schafft, ist 

fraglich – zumal die Europäer, allen voran die 

Presseleute laut einer US-Studie der Technik 

halb so zuversichtlich gegenüberstehen als die 

amerikanischen Kollegen. 

EU will regeln 

Noch schlimmer könnte es auf EU-Ebene 

werden, wenn eine 2008 von Kommissionspräsident 

Barroso bei der European Group 

of Ethics beauftragte Studie tatsächlich im 

Oktober veröffentlicht wird. Sie fordert eine 

gesetzliche Regelung des Feldes, um etwaige 

Gefahren zu bannen. Die US-Forscher und 

-Ingenieure können sich also freuen, denn ihre 

EU-Kollegen müssen diskutieren. 

Alle Beiträge sind urheberrechtlich geschützt. 

Ohne schriftliche Genehmigung des BIOCOM 

Verlages darf kein Teil in irgendeiner Form 

reproduziert oder mit elektronischen Systemen 

verarbeitet, vervielfältigt oder verbreitet werden. 

Diese Ausgabe enthält eine Verlagsbeilage 

(Euro Biofairs Compass) und Beilagen 

von Bandelin electronics, New England 

Biolabs sowie biotechnologie.de 

Die Druckauflage von 20 000 Exemplaren 

ist IVW geprüft (Stand II/09): 

© BIOCOM Verlag GmbH, Berlin 

® BIOCOM ist eine geschützte Marke der 

BIOCOM AG, Berlin 

BIOCOM 

Inserentenverzeichnis 

AGOWA GmbH ………………………………………… 25 

Bandelin electronic GmbH ……………Beilage 

Beckman Coulter GmbH ………………………… 33 

BIOCOM Projektmanagement GmbH … 31 

BIOCOM AG ………………………………………Beilage 

Biometra GmbH …………………………………………11 

biotechnologie.de ……………………………Beilage 

Deutsche Messe AG ………………………………… 17 

Dr. Lerche KG …………………………………………… 15 

EBD Group, BioEurope …………………………… U3 

Eppendorf AG …………………………………………… 41 

Fujifilm Europe GmbH ……………………………… 7 

Merck Chemicals Ltd. ……………………………… 23 

Microsynth AG ……………………………………………9 

New England Biolabs GmbH …U4, Beilage 

PerkinElmer ……………………………………………… 27 

Porvair Science Ltd. ………………………………… 13 

Roche Diagnostics GmbH ……………………… U2 

Thermo Fisher Sicentific ………………………… 5 

Vorschau Heft 6/2009 

Thema 

Mikrobielle Genomik 

Mikrobielle Produktionsorganismen, Krankheitserreger, 

Biofilme und Lebensgemeinschaften 

stehen im Mittelpunkt der nächsten 

Themenausgabe von LABORWELT. Wieweit 

Metabolic Engineering und Synthetische 

Biologie voneinander profitieren können, wie 

sehr schnelle Sequenzierungsmethoden helfen, 

wirtschaftlich interessante Funktionen 

der Mikroorganismen zu nutzen oder Biomarker 

der Entwicklung neuer Diagnostika 

und Therapeutika dienen, das beleuchtet die 

Themen-Ausgabe „Mikrobielle Genomik“. 

Marktübersicht: DNA-Anreicherung 

Werbekunden bietet diese Ausgabe mit einer 

garantierten Auflage von 20.000 Exemplaren 

(IVW-geprüft) eine optimale Plattform 

für ihre Produkt- und Imageanzeigen. 

Reservieren Sie Ihren Werbeplatz in der 

LABORWELT-Themenausgabe bis spätestens 

zum 13. November 2009. Ergänzend zu dem 

Themenschwerpunkt veröffentlichen wir 

eine Marktübersicht „DNA Enrichement“. 

Informationen zu Ihrer möglichen Teilnahme 

gibt Oliver Schnell (Tel.: +49-30-264921-45, 

eMail: o.schnell@biocom.de). 


Join the 

pre-conference 

partnering 

process 

Building Value Through ParTnershiPs 

BIO-EurOpE 

15TH ANNUAL INTERNATIONAL 

PARTNERING CONFERENCE 

2009 

November 2–4, 2009 

vieNNa, austria 

messe WieN exhibitioN & CoNgress CeNter 

BIO-Europe is Europe’s largest partnering conference, serving the global biotechnology 

industry. The conference annually attracts international leaders from biotech, pharma and 

finance along with the most promising start-ups and emerging companies. It is the “must 

attend” event for getting business done in the biotech industry. 

For further information, please view our conference website at 

www.ebdgroup.com/bioeurope 

© 2009 EBD Group AG 

Background image 

© Wien Tourismus/MAXUM

InnovatIve DIscovery tools For sIgnal transDuctIon research 

Pathways In Human Cancer 

Pathways In Human Cancer 

InnovatIve DIscovery tools For sIgnal transDuctIon research 

Immunofluorescence Using Activation~state Antibodies 

Immunofluorescence Using Activation~state ...from Cell Signaling Antibodies Technology 

• Phospho-p44/42 MAPK (green) • Phospho-Akt (red) 

• Phospho-p44/42 MAPK (green) • Phospho-Akt (red) 

Untreated LPA, 2 min LPA, 5 min 

Untreated LPA, 2 min LPA, 5 min 

LPA, 15 min LPA, 15 min + LY294002 LPA, 15 min + U0126 

Confocal IF images of Phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) (E10) #9106 

Mouse mAb (green) and Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb 

#4058 (red) in C6 rat glioma cells treated with LPA as indicated. 

LPA induces cytoplasmic and nuclear phospho-p44/42 MAPK signal 

and cytoplasmic and membrane phospho-Akt signal. Addition of MEK 

inhibitor U0126 #9903 or PI3K inhibitor LY294002 #9901 completely 

blocks activation of phospho-p44/42 MAPK or phospho-Akt, 

respectively. Blue pseudocolor = DRAQ5 

GSK-3 

Confocal IF images of Phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) (E10) #9106 

Mouse mAb (green) and Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb 

#4058 (red) in C6 rat glioma cells treated with LPA as indicated. 

LPA induces cytoplasmic and nuclear phospho-p44/42 MAPK signal 

and cytoplasmic and membrane phospho-Akt signal. Addition of MEK 

inhibitor U0126 #9903 or PI3K inhibitor LY294002 #9901 completely 

(fluorescent DNA dye). 

blocks activation of phospho-p44/42 MAPK or phospho-Akt, 

respectively. Blue pseudocolor = DRAQ5 

GSK-3 

LPA, 15 min LPA, 15 min + LY294002 LPA, 15 min + U0126 

(fluorescent DNA dye). 

For our Free Pathways 

In Human Cancer poster 

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our 

Pathways 

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Cyclin D 

Cyclin D 

p21 p27 

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FKHR/ 

FOXO 

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mTOR 

Rictor 

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MDM2 

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in Deutschland und Österreich exklusiv von 

n New England Biolabs GmbH Frankfurt/Main Deutschland Tel.: +49(0)69-305-23140 Fax.: +49(0)69-305-23149 in Deutschland email: und Österreich info@de.neb.com exklusiv www.neb-online.de von 

n Cell Signaling Technology Inc. Danvers, MA USA Tel. 1-877-616-CELL (2355) Fax 1-978-867-2488 email: info@cellsignal.com www.cellsignal.com 

n New England Biolabs GmbH Frankfurt/Main Deutschland Tel.: +49(0)69-305-23140 Fax.: +49(0)69-305-23149 email: info@de.neb.com www.neb-online.de 

n Cell Signaling Technology Inc. Danvers, MA USA Tel. 1-877-616-CELL (2355) Fax 1-978-867-2488 email: info@cellsignal.com www.cellsignal.com 

...from Cell Signaling Technology 

Akt 

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XIAP 

PIP 3 

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Pl3K 

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c-Raf 

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XIAP 

Bcl-x 

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Gab1 

Gab2 

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PDK1 

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PP2A 

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PAK1 

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14-3-3 

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Halle 9, Stand A24 

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