24.07.2018 Views

Nghiên cứu tách nhóm lignan và triterpenoid & nhóm saponin từ cây rau gai thối thu hái ở sơn la

https://app.box.com/s/ljrtss21rhd4r1369u7gi7559cex1tce

https://app.box.com/s/ljrtss21rhd4r1369u7gi7559cex1tce

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

4.3. Phƣơng pháp nghiên <strong>cứu</strong><br />

4.3.1. Thu <strong>hái</strong> <strong>và</strong> kiểm nghiệm dƣợc liệu<br />

- Dược liệu lá <strong>rau</strong> <strong>gai</strong> <strong>thối</strong> sau khi <strong>thu</strong> <strong>hái</strong> được rửa sạch, t<strong>hái</strong> nhỏ, sấy khô<br />

chuẩn bị cho nghiên <strong>cứu</strong>.<br />

- Dược liệu được thẩm định tên khoa học theo khóa phân loại thực vật <strong>và</strong> có sự<br />

trợ giúp của các chuyên gia thực vật <strong>và</strong> dược liệu.<br />

- Dược liệu được kiểm nghiệm theo các tiêu chí đơn giản như độ ẩm, độ nhiễm<br />

nấm mốc, sơ bộ đánh giá hàm lượng hoạt chất trong dược liệu bằng sắc ký lớp mỏng .<br />

4.3.2. <strong>Nghiên</strong> <strong>cứu</strong> chiết xuất, phân lập các hợp chất<br />

Chiết hoạt chất <strong>từ</strong> dược liệu bằng ethanol 96% theo phương pháp ngâm chiết (<strong>ở</strong><br />

nhiệt độ phòng). Cất <strong>thu</strong> hồi dung môi dưới áp suất giảm. Phân đoạn dịch chiết bằng<br />

dung môi công nghiệp có độ phân cực tăng dần n-hexan, ethyl acetat <strong>và</strong> n-butanol.<br />

Sử dụng sắc ký cột với các chất hấp phụ silica gel pha thường, pha đảo,<br />

Sephadex LH-20 để phân lập các chất. Sắc ký lớp mỏng dùng để theo dõi vết các chất<br />

<strong>từ</strong> các phân đoạn.<br />

4.3.3. Kiểm tra độ tinh khiết của các chất phân lập<br />

Kiểm tra độ tinh khiết bằng sắc ký lớp mỏng (soi dưới đèn tử ngoại <strong>ở</strong> bước<br />

sóng 254 nm, 365 nm) phun <strong>thu</strong>ốc thử H 2 SO 4 10% /ethanol <strong>và</strong> hơ nóng <strong>ở</strong> 110 o C, kiểm<br />

tra bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (nếu cần thiết).<br />

4.4. <strong>Nghiên</strong> <strong>cứu</strong> hình t<strong>hái</strong> giải phẫu cơ quan sinh dƣỡng <strong>và</strong> cơ quan sinh sản<br />

Thu thập mẫu <strong>ở</strong> ngoài tự nhiên đưa về phòng thực hành quan sát, đo kích thước<br />

<strong>và</strong> làm các tiêu bản lát cắt rễ, lá.<br />

4.5. Tách <strong>nhóm</strong> <strong>saponin</strong><br />

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT<br />

daykemquynhonbusiness@gmail.com<br />

Saponin toàn phần được định lượng theo phương pháp cân như sau: Cân chính<br />

xác 20g bột nguyên liệu, gói <strong>và</strong>o túi giấy lọc, cho <strong>và</strong>o cốc <strong>thu</strong>ỷ tinh 200ml, ngâm bằng<br />

100ml methanol trong 24 giờ. Sau đó đặt <strong>và</strong>o bình Soxhlet chiết trong 8 giờ. Cất <strong>thu</strong><br />

hồi dung môi được cắn, thêm 30ml nước lắc cho tan, chuyển sang bình gạn 100ml,<br />

dùng ether ethylic lắc để loại tạp cho đến khi lớp ether ethylic không có màu. Dịch <strong>thu</strong><br />

được lắc với n-butanol bão hoà nước đến khi lớp n-butanol không có màu. Gộp dịch n-<br />

butanol, bốc hơi n-butanol đến còn khoảng 4-5ml, cho <strong>và</strong>o chén cân đã sấy khô <strong>và</strong> xác<br />

định khối lượng trước, bốc hơi dung môi đến cắn. Sấy cắn <strong>ở</strong> nhiệt độ 60-65 0 C đến khối<br />

lượng không đổi <strong>và</strong> đem cân. Lặp lại thí nghiệm 3 lần để lấy giá trị trung bình.<br />

11

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!