manejo de insectos plagas05-10 - projeto pirada

las cuencas hidrográficas sudamericanas (Lundberg et al., 1998) establece una
base comparativa objetiva para interpretar la información genética y biológica. En
particular, este trabajo presenta un análisis de un gran numero de muestras de P.
nigricans tomadas en diversas localidades de la cuenca amazónica, agrega también
ejemplares de P. rubrotaeniatus, e incrementa la representación de P. mariae
del Río Orinoco. Además, se incorpora por primera vez, el uso de secuencias de un
intrón de un gen nuclear, ependimina (Ortí & Meyer, 1996), para complementar la
perspectiva provista por los marcadores mitocondriales.
Figura 1. Filogenia molecular de 4 especies de Prochilodus basada en secuencias de ADN
mitocondrial (ATPasa, 840 pb); tomada de Sivasundar et al. (2001).
Metodología
Muestras de tejido muscular fueron tomadas de peces obtenidos en las localidades
indicadas en la figura 2 y preservadas en etanol 95% para el estudiogenético. La
extracción de ADN y subsiguiente amplificación de los fragmentos mitocondriales
via PCR sigue los protocolos publicados por Sivasundar et al. (2001). El intron 3
del gen nuclear que codifica la ependimina (una glucoproteína cerebral caracterizada
en diversos vertebrados) fue amplificado por la misma vía con la utilización
de iniciadores (primers) diseñados en base a secuencias exónicas de este gen
obtenidas a partir de ARN mensajero (via RT-PCR). Para obtener secuencias
completas de cada alelo presente en individuos heterocigotas, los productos de
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