manejo de insectos plagas05-10 - projeto pirada

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publicación, Hubert et al.) y para los estudios de micro-evolución al nivel intraespecífico (Fig. 1). Extracción de ADN Tabla 1. Cebadores para la amplificación de los intrones de C. macropomum y P. brachypomus 138 Gen Origen Creatin Kinasa Chow & Takeyama, 1998 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Hassan et al., 2003a Major Histocompatibility complex class II antigen Hassan et al., 2003a Aldolase B Hassan et al., 2003a Ribosomal protein Chow & Takeyama, 1998 Calmex Chow, 1998 Growth Hormone* Hassan et al., 2003a Aldolase C* Hassan et al., 2003a * solo se utilizaron para C. macropomum La extracción del ADN se realizó con el Kit comercial DNAeasy de Quiagen. La solución de amplificación por PCR tuvo un volumen final de 25 µl, conteniendo 5 unidades de taq polimerasa (Promega) + buffer 10x, 2mM de dNTPs, 25 mM MgCl 2 , 5 µl de extracto de ADN y 1µl (20 pmol/µl) de cada primer (Tabla 1). La amplificación fue desarrollada con las condiciones siguientes: denaturación a 92°C durante 2 minutos; 30 ciclos (95°C 1 minuto; hibridación, 1 minuto a 54°C para Aldolasa B4 y MHC, o 58°C para Aldolasa C, o 60°C para CK, Rpex y Gpd, Gh; elongación 72°C 1 minuto); elongación final 72°C 5 minutos. Análisis de datos Las frecuencias alélicas de cada locus han permitido determinar: el numero de locus polimórficos, el promedio de alelos por locus, el nivel de heterocigocidad mono y multilocus, para cada población la desviación a la panmixia por calculo del F is y test sobre permutaciones y entre poblaciones, la diferenciación genética con la utilización del estimador del F st (Weir & Cockerham, 1984) y test sobre
permutaciones. El tratamiento de datos fue desarrollado con el programa GENETIX (Belkhir et al., 1998).). Resultados y Discusión Híbridos artificiales entre C. macropomum y P. brachypomus están siendo producidos para la piscicultura. No obstante, considerando el número de locus diagnósticos se observa que no existe ninguna introgresión natural entre C. macropomum y Piaractus brachypomus en la región del Alto Madera. Al comparar los niveles de diversidad genética en ambas especies C. macropomum y P. brachypomus, se observa niveles de heterocigocidad de 0.29 y 0.20, respectivamente, similares a los encontrados en las especies de pirañas (presentado en esta publicación, Hubert et al.). Durante 6 meses del año, el Mamoré y sus afluentes inundan casi totalmente la planicie central, provocando conexiones con los Ríos Beni, Madre de Dios e Iténez (Lauzanne et al 1991). Sin embargo esta zona de inundación no homogeniza los flujos genéticos de C. macropomum, sus poblaciones muestran una fuerte estructuración geográfica observada con el estimador Fst (p
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