Universidad Austral de Chile - Tesis Electrónicas UACh ...

2.3.1 Caracterización bacteriana utilizando el gen ribosomal 16S
En la década de 1980, como lo señala CLARRIDGE (2004), un nuevo estándar para
identificación de bacterias comenzó a desarrollarse en los laboratorios de Woese y de
otros investigadores, demostrando que las relaciones filogenéticas de las bacterias y
de todas las formas de vida, se pueden determinar mediante la comparación de una
parte estable del código genético.
La parte del ADN más utilizado para propósitos taxonómicos en bacterias es el gen
ARNr 16S, siendo indiscutible que la información contenida en este gen, ha jugado un
papel fundamental en la microbiología.
El gen ARNr 16S es una secuencia de aproximadamente 1.500 nucleótidos, contiene
regiones altamente conservadas, que permiten establecer la relación taxonómica
profunda entre familias, clases y filos, así como regiones variables que posibilitan
discriminar entre especies dentro del mismo género (TORTORI, 2003). Estas
características permitieron utilizar el gen como marcador filogenético y herramienta de
identificación (MAC-FADDIN, 2003).
El análisis del los genes de ARNr, con el uso de las bases de datos de referencia de
alta calidad, proporciona un método eficaz para la identificación de microorganismos
(HARMSEN y KARCH, 2004).
2.3.2 Operones ribosómicos. Todas las bacterias contienen genes codificantes para
diferentes ARNs ribosomales. Estos genes que codifican los ARN ribosomales están
organizados en operones. En eubacterias, cada operón ribosómico (rrn) incluye genes
para los ARNr: 23S (rrl), 16S (rrs) y 5S (rrf), separados por regiones espaciadoras o
intergénicas (IG) y contiene además genes para uno o más ARN de transferencia
(BARRY et al., 1991).
El producto de la transcripción del operón a partir de dos promotores P1 y P2, situados
en la región anterior a rrs, es procesado por la enzima ARNasa III, la que mediante
cortes en sitios específicos da origen a las tres clases de ARNr, el o los ARNt y las dos
regiones IG (GÜRTLER y STANISICH, 1996).
A continuación en la FIGURA 3, se representa esquemáticamente la organización de
un operón ribosómico.
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