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de esta manera una suspensión bacteriana de 10 7 UFC/mL. Posteriormente se tomaron 300µL de esta suspensión y se introdujeron en 10mL de Agar MYPGP (dos tubos por placa) al 0,75% y luego se vertió en una placa estándar. Con la ayuda de un sacabocado se hicieron orificios en el césped de P. larvae para inocular en ellos 50µL de un cultivo de 24h a 30+2ºC (incubado en anaerobiosis) en CST de los posibles antagonistas, analizados en el punto anterior 3.3.10.1. En las placas que presentaron halos de inhibición frente a P. larvae, se tomaron tres mediciones al halo y se sacó un promedio. En la FIGURA 11 se presenta un esquema donde se resume los procedimientos utilizados en las pruebas de inhibición frente al P. larvae. FIGURA 11 Pasos para la prueba de antagonismo entre las cepas de P. larvae FUENTE: Elaboración propia. contra las cepas del género Bacillus. 31
4 PRESENTACIÓN Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS Durante la investigación, se utilizaron ocho cepas pertenecientes al cepario del Proyecto CAPI IDO 901 (Laboratorio de Microbiología, ICYTAL, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Austral de Chile). Las cepas fueron aisladas con anterioridad de muestras de miel y material de colmenas (trozos de panal). Las muestras de miel fueron facilitadas por la “Cooperativa Campesina Apícola Valdivia Limitada, APICOOP”, ubicada en Paillaco, Región de los Ríos. A continuación se presentan los resultados obtenidos, descritos en concordancia secuencial a los experimentos realizados. 4.1 Preparación de la muestra Para comenzar, se revivieron las cepas del género Bacillus que se encontraban congeladas en Caldo Soya Tripticasa (CST) y posteriormente se sembraron en (AST), con el objeto de verificar la pureza. FIGURA 12 Colonias puras de las ocho cepas del género Bacillus en Agar Soya Tripticasa. 32
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