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ÍNDICE DE CUADROS Cuadro Página 1 Principales enfermedades apícolas en Chile, según naturaleza del agente, 7 etapa de la biología y ocurrencia. 2 Resumen de síntomas de la enfermedad de la Loque Americana. 9 3 Mezcla utilizada en la reacción de PCR para amplificar el gen ARNr 16S. 20 4 Componentes para agregar nucleótidos de adenina a los productos de PCR 24 purificados. 5 Componentes para la ligación del producto de PCR en el plasmidio 25 pGEMT-Easy. 6 Cuantificación del ADN genómico extraído de Bacillus. 33 7 Cuantificación del ADN enviado a secuenciar. 41 8 Resumen de la identificación bacteriana después de la secuenciación. 43 9 Densidad óptica (Do) a 620nm de las cepas incubadas en CST. 44 10 Recuento a las 12h de incubación en AST. 45 11 Halos de inhibición en las pruebas de antagonismo entre cepas del 46 género Bacillus. 12 Tamaño de los halos de inhibición de la prueba de antagonismo de las 48 cepas 87, 95, 97 y mezclas de ellas, contra P. larvae ATCC 25745 y de Campo.
ÍNDICE DE FIGURAS Figura Página 1 Esporas de P. larvae de cadáveres de larvas de abejas (izquierda) y 11 esporas de P. larvae de cultivo (derecha). 2 El ribosoma bacteriano. Se muestra su estructura, las subunidades y 12 las macromoléculas que lo componen. 3 Representación esquemática de un operón ribosómico (rrn). 14 A) Genes estructurales de los tres tipos de ARNr (rrs, rrl y rrf), los promotores P1 y P2, y las regiones intergénicas (IG). B) Amplificación del gen rrs (ADNr 16S). Se indica la posición de los iniciadores I1 (directo), I2 e I3 (reversos) utilizados para la amplificación (y posterior secuenciación) del gen completo (I1-I3; amplicón de 1.500pb, aproximadamente) o de un fragmento menor (11-I2; 500pb correspondientes al extremo 59 del gen) C) Visualización de ambos fragmentos por electroforesis en gel de agarosa. 4 Esquema general del proceso de clonación. 16 5 Protocolo de extracción del ADN genómico de las cepas de Bacillus. 19 6 Protocolo de amplificación del ADN ribosomal 16S, método de la 21 polimerasa en cadena “PCR”. 7 Protocolo preparación del gel de agarosa al 1,5%. 22 8 Protocolo purificación del ADN amplificado por PCR desde el gel de agarosa. 23 9 Protocolo de extracción de ADN plasmidial. 28 10 Pasos para prueba de antagonismo entre cepas del género Bacillus. 30 11 Pasos para la prueba de antagonismo entre las cepas de P. larvae contra 31 las cepas del género Bacillus. 12 Colonias puras de las ocho cepas del género Bacillus en Agar Soya Tripticasa. 32
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