Cuando el crecimiento tiene lugar a lo largo <strong>de</strong> toda la tira y no se observa formación <strong>de</strong> la elipse<strong>de</strong> inhibición, la CIM será el valor superior que tiene la tira y por el contrario, cuando la elipse <strong>de</strong>inhibición se encuentre por <strong>de</strong>bajo <strong>de</strong> la tira <strong>de</strong>be informar el valor mínimo <strong>de</strong> la escala.Figura No. 1 Prueba E test para la <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> BLEELaboratorio <strong>de</strong> Microbiología Universidad Nacional <strong>de</strong> ColombiaPrueba alternativa Doble disco para la <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> BLEEEste método <strong>de</strong> doble disco fue <strong>de</strong>scrito por Jarlier en 1988 y consiste en la disposición <strong>de</strong> un discoconvencional <strong>de</strong> amoxicilina/ácido calvulánico (20/10 µg) en el centro <strong>de</strong> una placa a una distancia<strong>de</strong> 20 mm se coloca un disco <strong>de</strong> ceftazima (30 µg) y al otro lado un disco <strong>de</strong> cefotaxima (30 µg). Laampliación <strong>de</strong> alguno <strong>de</strong> los halos <strong>de</strong> inhibición manifiesta la producción <strong>de</strong> la BLEE.Figura No. 2 Prueba doble disco para <strong>de</strong>tección BLEELaboratorio <strong>de</strong> Microbiología Universidad Nacional <strong>de</strong> Colombia22 | P ágina
4.4.3 β-lactamasas AmpC Clase C (grupo 1) Enzimas: AmpC, CMY-2, ACT-1Muchas bacterias gram negativas producen β-lactamasas tipo AmpC también conocidas comocefalosporinasas, las cuales en su mayoría son codificadas en cromosoma y unas pocas enplásmidos. Estas enzimas usualmente son resistentes a la inhibición por ácido clavulánico y sonmás activas frente a cefalosporinas y cefamicinas como cefoxitin más que en contra <strong>de</strong>benzilpenicilinas, también poseen alta afinidad sobre aztreonam comparadas a lascefalosporinasas <strong>de</strong> clase A (7, 10) y pue<strong>de</strong>n conducir a <strong>resistencia</strong> a carbapenemes si sepresentan <strong>de</strong> manera simultánea con otros mecanismos como alteraciones <strong>de</strong> porinas osobreexpresión <strong>de</strong> bombas <strong>de</strong> e-flujo tal como ha sido reportado en P. aeruginosa.En organimos como Citrobacter freundii, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens yPseudomonas aeruginosa, la expresión <strong>de</strong> AmpC cromosomal es reducida pero inducible enexposición a algunos betalactámicos como amoxacilina, ampicilina, cefazolina y cefalotina,cefoxitin, imipenem e inhibidores <strong>de</strong> betalactamasas como acido clavulánico (10). Lasobreexpresión <strong>de</strong> AmpC se asocia con mutaciones en el sistema <strong>de</strong> regulación <strong>de</strong> la enzimaAmpC, lo que conduce a una hiperinducibilidad <strong>de</strong> AmpC o a una hiperproducción <strong>de</strong> esta enzima(10)Por el contrario en A. baumannii y en E. coli las enzimas AmpC han perdido uno o mascomponentes <strong>de</strong>l sistema <strong>de</strong> induccion y la hiperproduccion <strong>de</strong> esta enzima es asociada en E. coli amutaciones <strong>de</strong>l sistema regulador y en A. baumannii a la presencia <strong>de</strong> una secuencai <strong>de</strong> insercionISAba-1 (7, 11)Por otro lado, algunas enterobacterias como Klebsiella spp, Salmonella spp. y Proteus mirabilis,han perdido las enzimas AmpC cromosomales y un fenotipo <strong>de</strong> <strong>resistencia</strong> asociado con presencia<strong>de</strong> cefalosporinasa es mediado por β-lactamasas AmpC adquiridas las cuales son codificadas enplásmidos. Dentro <strong>de</strong> estas cefalosporinasas encontramos las enzimas CMY, ACT, DHA, FOX, MIR,las cuales son capaces <strong>de</strong> hidrolizar las cefalosporinas <strong>de</strong> I, II y III generación y cefamicinas ypresentan <strong>resistencia</strong> al clavulanato, sulbactam y tazobactam (10). En el caso <strong>de</strong> E. coli unfenotipo AmpC pue<strong>de</strong> ser <strong>de</strong>bido ha sobreexpresión <strong>de</strong> la AmpC cromosomal o a la presencia <strong>de</strong>AmpC codificada en plásmidos.4.4.3.1 Detección <strong>de</strong> AmpC por el LaboratorioActualmente CLSI no tiene estandarizada una técnica por el laboratorio para <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> AmpC,sin embargo la prueba tamiz <strong>de</strong> BLEE pue<strong>de</strong> ser usada para tamizar β-lactamasas tipo AmpC.Debido a que la <strong>de</strong>tección por el laboratorio se dificulta y muchas veces microorganismos comoKlebsiella spp y E coli que presentan AmpC mediada por plásmido, el clavulanato pue<strong>de</strong> actuarcomo inductor <strong>de</strong> altos niveles <strong>de</strong> <strong>de</strong> AmpC resultando en una prueba para BLEE falsa negativa.(12)Otras PruebasAlternativamente cefoxitin (intermedio ó resistente) pue<strong>de</strong> utilizarse como tamizaje algunosmicroorganismos como Klebsiella spp, P. mirabilis y E. coli entre otros.23 | P ágina