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E - Coordinación de la Investigación Científica - Universidad ...

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Ciencia Nico<strong>la</strong>ita, No. Especial, 2008: 53-58<strong>Universidad</strong> Michoacana <strong>de</strong> San Nicolás <strong>de</strong> HidalgoDiversidad <strong>de</strong> los hongos micorrízicosarbuscu<strong>la</strong>res asociados a p<strong>la</strong>ntas <strong>de</strong> aguacate(Persea americana Mill.), en un agroecosistema <strong>de</strong>lEstado <strong>de</strong> MichoacánNuria Gómez Dorantes 1 , Miguel Martínez Trujillo 2* y Yazmín Carreón Abud 2**1Programa <strong>de</strong> Maestría Institucional en Ciencias Biológicas. e-mail: nuriah@live.com.mx. 2 F acultad <strong>de</strong> Biología.Laboratorio <strong>de</strong> Genética y Microbiología. *E-mail: codigogenetico@gmail.com; **E-mail: ycabud@yahoo.com.mx.<strong>Universidad</strong> Michoacana <strong>de</strong> San Nicolás <strong>de</strong> HidalgoResumenEl presente trabajo tiene como objetivo principal i<strong>de</strong>ntificar los principalesgéneros y posibles especies <strong>de</strong> Hongos Micorrízicos Arbuscu<strong>la</strong>res (HMA) asociados araíces <strong>de</strong> p<strong>la</strong>ntas <strong>de</strong> aguacate, mediante el análisis <strong>de</strong> <strong>la</strong>s secuencias <strong>de</strong> ADNribosomal y corre<strong>la</strong>cionarlos con los HMA presentes en el suelo como esporas. Laextracción y purificación <strong>de</strong> ADN genómico se realizó mediante el protocoloindicado por el Mini Kit DNeasy (Qiagen). Para <strong>la</strong> evaluación <strong>de</strong>l ADN obtenido apartir <strong>de</strong> raíces se hará uso <strong>de</strong> <strong>la</strong> técnica <strong>de</strong> PCR utilizando los primers universalespara eucariontes (NS1-ITS4) que permitan inicialmente <strong>la</strong> amplificación <strong>de</strong>l gen <strong>de</strong> <strong>la</strong>subunidad ribosomal 18S, y posteriormente mediante oligonucleótidos específicos(VAGIGA, VAGLO, VAACAU en combinación con NS31, amplificar secuenciasespecíficas <strong>de</strong> HMA (PCR anidada), que permitan <strong>la</strong> i<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong> los diferentesgéneros y posibles especies <strong>de</strong> HMA, que colonizan <strong>la</strong> raíz. Los productosamplificados <strong>de</strong> <strong>la</strong> PCR anidada se purificarán y ligarán en el vector pGEM-T-easy(Promega). Todas <strong>la</strong>s construcciones serán verificadas por secuenciación con losoligonucleótidos universal y reverso El alineamiento <strong>de</strong> secuencias se realizarámediante el programa BioEdit (Hall, 1999). Las secuencias generadas en este trabajoserán comparadas con <strong>la</strong>s especies registradas en el BEG (La Banque Européenne<strong>de</strong>s Glomales) y en el NCBI. Mediante el análisis morfológico se ha encontrado quelos géneros Glomus y Acaulospora fueron los más abundantes en el suelo. Mediante<strong>la</strong>s tinciones <strong>de</strong> raíz, se encontraron elevados porcentajes <strong>de</strong> colonizaciónmicorrícica (<strong>de</strong> 80% a 100%), lo que indico que el aguacate es una p<strong>la</strong>nta altamentecolonizada por este grupo <strong>de</strong> hongos.IntroducciónLa micorriza arbuscu<strong>la</strong>r (MA) esuna asociación benéfica establecida entre<strong>la</strong> mayoría <strong>de</strong> <strong>la</strong>s p<strong>la</strong>ntas superiores<strong>de</strong>scritas (>85%) con hongos <strong>de</strong>lPhyllum Glomeromycota (Schüßler et al.,2001). De manera natural, <strong>la</strong> micorrizase encuentra asociada en los hábitatsdon<strong>de</strong> el aguacate es nativo. Por los be-Ciencia Nico<strong>la</strong>ita No. Especial, 2008, Programa Institucional <strong>de</strong>Maestria en Ciencias Biologicas

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