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contribution a l'etude de l'efficacite d'une flore de barriere indefinie

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2.3.5 Diagnostic<br />

Le diagnostic bactériologique est plus aisé sur <strong>de</strong>s formes aiguës comme celles du<br />

poussin que sur les formes chroniques, où les bactéries restent localisées à certains<br />

organes (gona<strong>de</strong>s, foie, articulations). De plus, l’excrétion <strong>de</strong>s salmonelles est<br />

intermittente dans les formes chroniques ce qui augmente le nombre <strong>de</strong> faux négatifs<br />

surtout si les cultures ne sont faites qu’à partir d’écouvillons cloacaux ou <strong>de</strong> litière<br />

(LECOANET, 1992).<br />

Les analyses effectuées dans le cadre du dépistage systématique <strong>de</strong>s parquets <strong>de</strong><br />

reproducteurs ou <strong>de</strong> pon<strong>de</strong>uses d’œufs <strong>de</strong> consommation selon l’arrêté du 26 octobre<br />

1998, font appel à la bactériologie ainsi que les contrôles ante-mortem sur les poulets <strong>de</strong><br />

chair qui permettent un éventuel ordre d’abattage.<br />

Le diagnostic bactériologique comporte quatre étapes :<br />

- pré-enrichissement : l’échantillon est mis en culture dans <strong>de</strong> l’eau peptonée et mis à<br />

incuber pendant 24 heures à 35-37°C. Le pré-enrichissement permet le développement<br />

<strong>de</strong> toutes les bactéries.<br />

- enrichissement : les milieux <strong>de</strong> culture utilisés sont sélectifs (bouillon sélénite cystine,<br />

bouillon Rappaport-Vassiliadis,…). Ils sont mis à incuber à 42°C.<br />

- isolement : il est réalisé sur gélose (géloses Hektoen, salmonelle-Shigelle, gélose au<br />

vert brillant et au rouge <strong>de</strong> phénol,…). Les colonies <strong>de</strong> salmonelles sont repérées selon<br />

leurs caractéristiques <strong>de</strong> forme et <strong>de</strong> taille.<br />

- I<strong>de</strong>ntification biochimique et sérologique<br />

En ce qui concerne le diagnostic sérologique, plusieurs techniques peuvent être<br />

utilisées telles que l’agglutination rapi<strong>de</strong> sur lame, l’agglutination lente en tube et<br />

l’immuno-absorption à enzyme conjuguée (ELISA).<br />

La sérologie permet <strong>de</strong> rechercher les anticorps anti-salmonelles qui ont été synthétisés<br />

lors d’une contamination. Les immunoglobulines M (Ig M) ne sont pas toujours détectées<br />

car elles disparaissent rapi<strong>de</strong>ment. Les Ig Y (équivalent <strong>de</strong>s Ig G chez les oiseaux)<br />

apparaissent au bout <strong>de</strong> <strong>de</strong>ux semaines et atteignent un pic vers 5 semaines; leur<br />

persistance est plus longue (EUZEBY, 1997). On peut détecter les animaux excréteurs ou<br />

non <strong>de</strong> bactéries contrairement à la bactériologie. Cependant, un résultat positif en<br />

sérologie sera confirmé par la bactériologie (EUZEBY, 1997). La sérologie est donc<br />

intéressante dans le cas du portage sain où l’excrétion est intermittente. La technique<br />

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