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Introduction
Les méthodes colorimétriques par le 2,6-dichlorophénolindophénol
et le 2,4-dinitrophénylhydrazine.
La chromatographie liquide haute performance (HPLC).
Certaines de ces méthodes manquent de spécificité et sont
sujettes à des interférences, quelques unes même ne sont pas
adaptées à des échantillons colorés ou présentant des troubles.
D’autres méthodes sont compliquées et nécessitent une durée
longue pour l’analyse.
Différents procédés enzymatiques ont été proposés dans la
littérature pour le dosage de l’acide ascorbique, en utilisant
l’ascorbate oxydase (EC 1.10.3.3). Cette enzyme, comme déjà
mentionné, catalyse l’oxydation de l’acide ascorbique en acide
déhydroascorbique en présence d’oxygène moléculaire. Ce type
de dosage est sensible, spécifique, simple et utile.
Ce travail est une contribution à l’étude des paramètres
cinétiques de l’ascorbate oxydase de courgette (Cucurbita pepo
medullosa) ainsi qu’une ébauche d’un capteur optique conçu pour
le dosage de l’acide ascorbique. Nous avons procédé de la
manière suivante :
L’extraction, la purification de l’ascorbate oxydase de
courgette verte (Cucurbita pepo medullosa) et l’étude des
paramètres cinétiques de cette enzyme ;
La réalisation d’un dispositif optique pour le dosage de l’acide
ascorbique, ce dosage faisant intervenir l’ascorbate oxydase
préalablement préparée.