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42 Synthèse bibliographique Figure 7 : Electrodes à enzymes. Elles résultent de l’association d’un capteur électrochimique spécifique (1) et d’une préparation enzymatique (2). L’enzyme peut être en solution (a) ou incluse dans un gel (b) et maintenue par une membrane de dialyse (3) au contact de l’électrode. L’enzyme peut être immobilisée sur une membrane et être en contact direct avec le capteur (c) (électrode métallique) ou séparée du détecteur (d) par une membrane sélective (4) (électrode à gaz) (Durand et Monsan, 1982).
43 Synthèse bibliographique III.3.1.Caractéristiques générales des électrodes à enzymes : Les caractéristiques de ce type d’électrodes dépendent à la fois du capteur et de la préparation enzymatique. a. Temps de réponse : La réponse d’une électrode à enzyme n’est pas immédiate ; il est nécessaire pour que le signal de sortie soit fiable, qu’un état d’équilibre s’installe. Le temps de réponse varie de quelques dizaines de secondes à plusieurs minutes. Il dépend notamment des limitations de transfert de masse (épaisseur de la couche enzymatique, perméabilité des membranes, vitesse d’agitation) que l’on cherche à minimiser. b. Sensibilité et gamme de concentration : Ces paramètres dépendent de chaque type d’électrodes et de leur conception mais surtout des caractéristiques cinétiques de l’enzyme. La sensibilité de réponse dépend surtout de la capacité réactionnelle de la couche enzymatique. L’existence d’une limite de linéarité entre l’amplitude du signal et la concentration en substance dosée dans le milieu réactionnel s’explique essentiellement par la disparition de la proportionnalité entre la vitesse de la réaction enzymatique et la concentration en substrat. c. Temps de lavage: Ce type d’électrode permet la réalisation d’ajouts successifs d’échantillons à doser dans un volume donné de solution tampon, ceci jusqu’à une valeur limite de concentration déterminée. Dans ces conditions, le lavage pour retourner à la ligne de base n’est nécessaire que tous les 20 ou 30 essais. Le temps nécessaire dépend du type du capteur.
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