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Etude de Pax 3 dans la différenciation des cellules souches - M2 ...

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Pour un ratio 1:1 <strong>de</strong> Mitf :<strong>Pax</strong> 3, on observe <strong>la</strong> fixation <strong>de</strong> <strong>la</strong> protéine <strong>Pax</strong> 3 sur <strong>la</strong><br />

séquence promotrice. Il en va <strong>de</strong> même pour un ratio 4:1. Par contre, lorsque que l’on<br />

introduit le p<strong>la</strong>smi<strong>de</strong> d’expression Mitf en <strong>la</strong>rge excès c'est-à-dire pour un ratio 12 :1, alors<br />

c’est <strong>la</strong> protéine Mitf qui se fixe sur le promoteur Dct. On en déduit donc que <strong>Pax</strong> 3 se fixe sur<br />

<strong>la</strong> même région <strong>de</strong> l’enhancer Dct que Mitf et que <strong>Pax</strong> 3 semble être un inhibiteur compétitif<br />

<strong>de</strong> Mitf.<br />

iiii – Effet <strong>de</strong> <strong>la</strong> mutation <strong>de</strong> <strong>la</strong> séquence <strong>de</strong> fixation <strong>de</strong> <strong>la</strong> protéine Lef sur le promoteur Dct :<br />

A partir <strong>de</strong> <strong>cellules</strong> 293T transfectées par <strong>la</strong> construction reportrice <strong>de</strong> l’expression<br />

du gène Dct, les auteurs ont mis en évi<strong>de</strong>nce l’importance du site <strong>de</strong> liaison <strong>de</strong> <strong>la</strong> protéine Lef<br />

sur le taux <strong>de</strong> transcription <strong>de</strong> Dct. Ils ont cotransfecté ces <strong>cellules</strong> avec les différents<br />

p<strong>la</strong>smi<strong>de</strong>s d’expression <strong>de</strong>s protéines <strong>Pax</strong> 3, Sox 10 et Mitf, seul ou combinés. Chaque<br />

expérience est réalisée <strong>dans</strong> <strong>de</strong>ux conditions : le site <strong>de</strong> fixation Lef muté ou pas (Figure 9).<br />

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