Etude de Pax 3 dans la différenciation des cellules souches - M2 ...

c) Inhibition de l’activité de Pax 3 par la β caténine
La β caténine est un composant de la voie de signalisation Wnt impliquée dans la
différenciation des cellules souches en mélanocytes. C’est une phosphoprotéine
nucléocytoplasmique dont la stabilité est régulée par phosphorylation. En absence de signal
Wnt, la β caténine est phosphorylée pour être la cible de la dégradation par le système
Ubiquitine-protéasome. En présence du signal Wnt, la β caténine n’est plus phosphorylée. Il
en résulte une accumulation cytoplasmique puis sa translocation dans le noyau.
i – Activité de la β caténine :
L’effet de la β caténine sur la protéine Pax 3 est étudié par co transfections de
cellules 293T par une construction reportrice du gène luciférase sous le contrôle du promoteur
Dct. Ces cellules sont également transfectées par des plasmides d’expression des protéines
Mitf, Sox 10 et Pax 3, avec (barres noires) ou sans (barres blanches) plasmides exprimant la
β caténine. Le taux de transcription est suivi par mesure de la bioluminescence de la luciférine
à 540 nm (Figure 10), induite par le transcription du gène rapporteur de la luciférase.
L’ajout de β caténine n’a aucun effet sur l’activation du promoteur Dct par Sox 10 et
Mitf (piste 2). En revanche, cet ajout permet de lever l’inhibition par Pax 3 de l’activation de
Dct par Mitf et Sox 10 (piste 3, barre noire). Effectivement, on retrouve le même taux de
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