Etude de Pax 3 dans la différenciation des cellules souches - M2 ...

Les résultats montrent que Sox 10 induit la transcription du rapporteur dans les deux
cas (piste 3). Par contre, dans le cas de cellules uniquement transfectées par Mitf ayant le site
de fixation Lef muté, une perte d’induction est observée (piste 4). Les pistes 5 et 6 indiquent
que Pax 3 inhibe la transcription activée par Sox 10 ou Mitf, dans le cas où la séquence Lef
est native. Cette inhibition est levée si la séquence Lef est mutée. Sur la piste 7, il y a une très
bonne induction par Mitf et Sox 10 quand la séquence de fixation Lef est normale. On
remarque une diminution de cette induction dans le cas où Lef est muté. La piste 8 décrit
l’inhibition de Pax 3 sur l’induction de Dct par Mitf et Sox 10 dans le cas où le promoteur est
natif, en comparaison à la piste 7. Cependant, dans le cas où le promoteur est muté, Pax 3
perd sa capacité de fixation et ne peut donc plus inhiber la transcription du gène Dct. On peut
donc retenir l’importance de la séquence Lef du promoteur Dct sur la fixation des facteurs de
transcription Pax 3 et Mitf ainsi que les rôles de ces deux protéines.
En supplément de ces travaux, des expériences d’immunohistochimie et de ChIP
ont permis de mettre en évidence l’implication de Grg4, un co répresseur de la famille
Groucho. Un co répresseur est défini comme étant une protéine requise pour l’activité
répressive d’un facteur de transcription spécifique mais ne possédant pas la capacité de se lier
seule à l’ADN. Les résultats révèlent que Grg4 est co localisé avec Pax 3 et Dct dans les
follicules de cheveux (immunohistochimie). Ils démontrent également que Grg4 est capable
de se fixer à Pax 3 afin de co réprimer le promoteur Dct (ChIP).
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