La phospholipase D, une voie de signalisation lipidique impliquée ...

II.1.2 Structure primaire des PLD :
L’analyse des séquences peptidiques de la PLD a permis de mettre en évidence quatre motifs
(CRI à CRIV) conservés entre les diverses isoformes et entre espèces.
CRI
CRI
Figure 4 : Domaines principaux de PLD1 et PLD2 (Rizzo et Romero, 2002).
Les boîtes représentent les séquences très conservées dans les PLD de mammifères (CRI,
HKD, CRIII et domaines PH et PX) ou la région spécifique de la PLD1 (boucle ou loop).
Les régions conservées CRII et CRIV : les domaines HKD :
Les régions CRII (résidus 463 à 487) et CRIV (résidus 894 à 919) contiennent chacune deux
motifs chargés invariables HxKxxxxD/E, appelés HKD ou encore triades catalytiques (figure
4). Ce motif est conservé dans toutes les espèces (Sung et al., 1997). Ces domaines
caractérisés par la présence des résidus histidine (H), lysine (K) et aspartate (D) sont
nécessaires à l’activité catalytique de l’enzyme (Hammond et al., 1995). La mutagénèse
dirigée a permis de montrer que ces acides aminés sont indispensables à la catalyse de
l’enzyme. Sung et al., (1997), ont montré que des cellules COS-7, transfectées par hPLD1
dont la lysine 898 du motif HKD a été mutée ne conservent pas leur activité PLD. Ces auteurs
ont montré que la mutation unique de chacun des acides aminés H, K ou D dans un seul de
ces motifs (CRII ou IV) abolit totalement l’activité catalytique de l’enzyme, et donc que les
deux motifs ne fonctionnent pas indépendamment. Pour les enzymes de cette superfamille qui
ne comprennent qu’une seule triade HKD, une dimérisation a été observée après cristallisation
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PIP2/membrane
Interaction
CRIII
CRIII