La phospholipase D, une voie de signalisation lipidique impliquée ...

particulièrement le PI3P (Ellson et al., 2002). Du et al. ont montré en 2003 que le domaine PX
de PLD1 peut lier le PI5P et cibler la protéine vers des vésicules d’endocytose.
Les régions N terminales de PLD1 et PLD2 contiennent un domaine d’homologie à la
pleckstrine ou domaine PH (Steed et al., 1998). Ce domaine a été impliqué dans un premier
temps dans l’interaction de la PLD avec les membranes et avec les inositides diphosphorylés
ayant leurs phosphates en position vicinale comme le phosphatidylinositol 4,5 diphosphate
(PIP2) et le phosphatidylinositol 3,4 diphosphate (Hodgkin et al., 2000). Afin de vérifier cette
hypothèse, des expériences de délétion dans la séquence de PLD1 ont été réalisées. La
délétion des 325 premiers acides aminés de la partie N terminale (comprenant le domaine PH)
ne modifie pas l’activité PLD mesurée in vitro sur des vésicules artificielles contenant le
PIP2. Ceci suggère la présence d’un autre domaine de liaison au PIP2 responsable de
l’activation de l’enzyme par ce phosphoinositide (Sciorra et al., 1999). Le domaine PH
interviendrait plutôt dans la localisation subcellulaire de l’enzyme. En effet, Brown et al. en
1998 ont montré que la PLD1b sauvage exprimée dans les cellules COS-1 et RBL-2H3 est
localisée au niveau des endosomes et des lysosomes. La PLD1b délétée de son domaine PH
est diffuse dans la cellule (Hodgkin et al., 2000).
Un domaine de liaison au PIP2 situé entre les deux domaines HKD a été identifié : il s’agit du
domaine polybasique (figure 4). Ce domaine impliquerait majoritairement une région riche en
résidus basiques et hydrophobes : il serait indispensable à l’activité enzymatique des PLD de
levures et de mammifères (Sciorra et al., 1999).
La séquence boucle :
C’est une séquence de 116 acides aminés présente au centre de la protéine PLD1 entre le
domaine II et III. Elle est absente dans la PLD2 des mammifères (Hammond et al., 1995).
Cette région paraît jouer un rôle important sur le niveau de l’activité basale de l’enzyme. En
effet, la PLD1 délétée de cette région possède une activité basale très élevée. L’activité basale
de la PLD2 qui ne possède pas la région boucle est constitutivement importante. L’insertion
de cette région dans la PLD2 provoque une diminution de son activité basale, ce qui confirme
le rôle négatif de la séquence boucle dans la régulation de la PLD (Sung et al., 1999b).
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