La phospholipase D, une voie de signalisation lipidique impliquée ...

II.1.4.2 Localisation subcellulaire :
Des expériences de fractionnement subcellulaire et des études de caractérisation ont démontré
la présence d’une activité phospholipasique D dans les différents compartiments des
membranes cellulaires y compris l’enveloppe nucléaire, le réticulum endoplasmique,
l’appareil de Golgi, la membrane plasmique et les vésicules de transport et de sécrétion
cellulaire. Des fractionnements subcellulaires du foie de rat (Provost et al., 1996) montrent
que l’activité PLD est la plus forte au niveau de la membrane plasmique bien qu’une activité
significative soit également retrouvée au niveau du noyau et de l’appareil de Golgi.
Dans les noyaux de cellules MDCK, une activité PLD stimulée de façon synergique par
l’ATP et le GTPγS a été retrouvée (Balboa et al., 1995). La protéine Rho, présente au niveau
du noyau pourrait être impliquée dans cette activation de la PLD et dans l’augmentation de
PA et de DAG détectée. En 1995, Ktistakis et al. ont montré l’existence d’une activité PLD
dépendante d’ARF plus importante dans les fractions cellulaires contenant des membranes
enrichies en appareil de Golgi que dans les fractions enrichies en réticulum endoplasmique ou
en membrane plasmique. Cependant, des études réalisées en transfectant des fibroblastes
d’embryons de rat avec de la hPLD1 recombinante n’ont pas montré de localisation au niveau
de l’appareil de Golgi mais dans le réticulum endoplasmique et les endosomes (Colley et al.,
1997a). Des constructions de PLD1a et b recombinantes couplées à la protéine fluorescente
GFP exprimées dans les cellules COS-1 et RBL-2H3 ne montrent pas de localisation dans le
Golgi. Dans les cellules RBL-2H3, la PLD1b est retrouvée dans les granules de sécrétion et
les lysosomes (Brown et al., 1998). Dans les mitochondries, une activité « PLD-like » a été
rapportée, elle serait sensible au calcium mais ne catalyserait pas de réaction de
transphosphatidylation (Madesh et al., 1997).
Une des fonctions proposées pour les PLD de mammifères est de médier le remaniement du
cytosquelette induit par différents agonistes. Dans les cellules U937 perméabilisées et activées
par du GTPγS, la PLD1 a été localisée dans des fractions insolubles contenant les éléments du
cytosquelette. Cette activité PLD associée au cytosquelette est réduite par l’exotoxine C3 de
C. botulinum qui inactive spécifiquement RhoA (Iyer et Kusner, 1999). De plus, la présence
de la PLD au niveau du cytosquelette est associée à une cotranslocation de ARF et RhoA.
Cette phospholipase D dépendante de RhoA est impliquée dans la formation de fibres de
stress induite par le lysoPA (Ha et al., 1994 ; Cross et al., 1996). Dans les fibroblastes, il a été
montré que la PLD2 se localise préférentiellement au niveau de la membrane plasmique des
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