La phospholipase D, une voie de signalisation lipidique impliquée ...

II.1.3.3 Régulation de la PLD par le PIP2 (phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate) :
Le PIP2 est par lui-même un second messager impliqué dans plusieurs fonctions incluant le
trafic vésiculaire, l’exocytose, la formation des adhésions focales et la régulation du
cytosquelette d’actine (Hinchliffe et al., 1998).
Brown et al. (1993) ont été les premiers à suggérer que la PLD pouvait être stimulée par le
PIP2 et beaucoup d’autres études ont confirmé cet effet. En fait, on considère que le PIP2 est
un cofacteur nécessaire à la stimulation de la PLD par la PKC et les petites protéines G, ARF
et RhoA (Brown et al., 1993).
Dans les cellules U937 perméabilisées, l’activation de la PLD induite par le GTPγS est
potentialisée par MgATP, qui maintient les taux de PIP2 et PIP élevés (Pertile et al., 1995).
De plus, lorsque les taux de PIP2 et PIP sont diminués par des inhibiteurs de PI-4-Kinase, on
note une diminution de l’activation de la PLD par le GTPγS. Une inhibition similaire de la
PLD est observée avec la néomycine, qui se lie aux phosphoinositides (Liscovitch et al.,
1994). Toutes ces expériences sont donc en faveur d’une dépendance de l’activité PLD vis-àvis
du PIP2.
Des études réalisées en système acellulaire ont montré que les deux isoformes clonées de
PLD (PLD1 et PLD2) nécessitent du PIP2 pour être actives (Hammond et al., 1997) bien
qu’elles ne soient pas régulées par les mêmes facteurs protéiques (PKC, protéines ARF,
protéines Rho). Le PIP2 en s’associant à la PLD au niveau du domaine PH favoriserait le
rapprochement de l’enzyme de son substrat in vivo (Yokozeki et al., 1996) et pourrait ainsi
augmenter son efficacité catalytique. Les travaux de Yokozeki et al. montrent que dans des
vésicules artificielles contenant PC/PE, la présence de PIP2 est nécessaire à l’activation de la
PLD qui se lie aux vésicules. Cette liaison est inhibée en présence du domaine PH de la
Kinase du récepteur β adrénergique (βARK) liant spécifiquement le PIP2 (Yokoseki et al.,
1996).
II.1.3.4 Régulation de la PLD par le calcium :
Les premières études in vitro réalisées sur la PLD purifiée à partir du cerveau de rat ont
montré que le calcium stimule l’activité enzymatique dans ce tissu (Taki et Kanfer, 1979).
Cette observation a été confirmée par les expériences réalisées sur des PLD de cellules HL-60
(Anthes et al., 1989) ou de poumon de porc (Okamura et Yamashita, 1994). Les PLD clonées
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