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M - laboratoire PROTEE - Université du Sud - Toulon - Var

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Après cette courte <strong>du</strong>rée d’immersion, les plaques ont été sorties et un travail d’isolement et<br />

d’étude des différentes souches de bactéries adhérées a été réalisé, cela dans le but premier de<br />

déterminer les espèces présentes.<br />

L’étude des souches a nécessité plusieurs étapes, listées ci-dessous, permettant leur<br />

identification et leur caractérisation physicochimique et métabolique.<br />

Pour l’identification :<br />

- étude morphologique<br />

- coloration de Gram<br />

- morphologie sur milieu solide et état frais<br />

- courbe de croissance<br />

- phylogénie<br />

- mobilité<br />

Pour la caractérisation physicochimique et métabolique :<br />

- MATS (Microbial Adhesion To Solvents)<br />

- potentiel zêta<br />

- galeries API (ZYM pour une étude enzymatique, 20NE étude métabolique et 50CH<br />

pour étudier la fermentation des sucres)<br />

-BFRT (Biofilm Ring Test) pour une étude de la formation de biofilm<br />

Parmi toutes les souches isolées des plaques immergées, les résultats <strong>du</strong> BFRT ont permis de<br />

sélectionner huit souches pour lesquelles les résultats sont présentés ici (figures 15a et 15b).<br />

La technique <strong>du</strong> BFRT permet de mesurer la mobilité de billes magnétiques inoculées avec<br />

des bactéries ensemencées et d’évaluer ainsi la densité <strong>du</strong> biofilm pro<strong>du</strong>it par ces bactéries<br />

après incubation et aimantation.<br />

Fig. 15 : Formation de biofilm en fonction <strong>du</strong> temps (24 à 72h) dans le milieu de culture MB (Marine Broth)<br />

Fig. 15b : Formation de biofilm par la souche TC5 en fonction <strong>du</strong> temps dans le milieu MB<br />

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