M - laboratoire PROTEE - Université du Sud - Toulon - Var
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Après cette courte <strong>du</strong>rée d’immersion, les plaques ont été sorties et un travail d’isolement et<br />
d’étude des différentes souches de bactéries adhérées a été réalisé, cela dans le but premier de<br />
déterminer les espèces présentes.<br />
L’étude des souches a nécessité plusieurs étapes, listées ci-dessous, permettant leur<br />
identification et leur caractérisation physicochimique et métabolique.<br />
Pour l’identification :<br />
- étude morphologique<br />
- coloration de Gram<br />
- morphologie sur milieu solide et état frais<br />
- courbe de croissance<br />
- phylogénie<br />
- mobilité<br />
Pour la caractérisation physicochimique et métabolique :<br />
- MATS (Microbial Adhesion To Solvents)<br />
- potentiel zêta<br />
- galeries API (ZYM pour une étude enzymatique, 20NE étude métabolique et 50CH<br />
pour étudier la fermentation des sucres)<br />
-BFRT (Biofilm Ring Test) pour une étude de la formation de biofilm<br />
Parmi toutes les souches isolées des plaques immergées, les résultats <strong>du</strong> BFRT ont permis de<br />
sélectionner huit souches pour lesquelles les résultats sont présentés ici (figures 15a et 15b).<br />
La technique <strong>du</strong> BFRT permet de mesurer la mobilité de billes magnétiques inoculées avec<br />
des bactéries ensemencées et d’évaluer ainsi la densité <strong>du</strong> biofilm pro<strong>du</strong>it par ces bactéries<br />
après incubation et aimantation.<br />
Fig. 15 : Formation de biofilm en fonction <strong>du</strong> temps (24 à 72h) dans le milieu de culture MB (Marine Broth)<br />
Fig. 15b : Formation de biofilm par la souche TC5 en fonction <strong>du</strong> temps dans le milieu MB<br />
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