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SUIVI D’UNE CINÉTIQUE ENZYMATIQUE PAR COLORIMÉTRIE
But : étudier l’activité enzymatique de la tyrosinase du champignon de Paris par colorimètrie ainsi
que l’influence de la quantité de substrat.
La tyrosinase extraite du champignon de Paris catalyse la réaction suivante :
Dihydroxybenzène (pyrocatéchol) --------------------> O-benzoquinone
(incolore)
O2 (rose)
La réaction enzymatique peut être suivie avec un colorimètre (à une longueur d’onde de 468nm) en raison du changement
de couleur du substrat.
L’expérience consiste à faire varier la concentration de pyrocatéchol à volume d’enzyme fixe et de mesurer l’évolution de
l’absorbance à une longueur d’onde de 468 nm (bleu).
A partir de ces mesures, on détermine la V max en fonction de la concentration de substrat et on peut calculer l'activité
spécifique
Phénomènes mis en évidence :
D’après les mesures de vitesse initiale de réaction enzymatiques à différentes concentrations de substrat, on déduit la
notion de complexe enzyme-substrat.
Détermination de la Vi, Vmax et K M .
MATÉRIEL NÉCESSAIRE
Interface (au choix)
Interfaces fixes :
Interface USBLINK ou Interface POWERLINK ou Interface SPARKLINK
Interface fixe ou portable :
Interface Portable GLX ou SPARK
Sondes, capteurs, accessoires
1 x colorimètre ref. PS-2121 233 € TTC
Logiciel généraliste DATASTUDIO
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