partie 1 sélection première.qxp - sordalab

KITS AVEC MATÉRIEL VÉGÉTAL FOURNI
KIT TABAC
RACINES CALS FEUILLES
MILIEU + AUXINES
MILIEU + AUXINES + CYTOKININES
MILIEU + CYTOKININES
OBJECTIFS COGNITIFS
La totipotence des cellules végétales permet le clonage.
Influence des facteurs de croissance sur l’organogénèse végétale.
Importance des proportions auxines/cytokinines.
Manipulation en conditions stériles.
MANIPULATION PROPOSÉE
A partir d’un plant de tabac stérile (Nicociana tabacum) , découpe d’un
morceau de feuille (explant) et mise en culture en boîte de pétri sur
trois milieux :
- Milieu minéral (Murashige et Skoog ou MS) + Auxines à 1 mg/L
- Milieu minéral (MS) + Auxines à 1mg/L + Cytokinines à 1 mg/L
- Milieu minéral (MS) + Cytokinines à 1 mg/L + Auxines à 0,1 mg/L.
Durée de la culture : 3 semaines à 1 mois.
RÉSULTATS OBTENUS
Le tabac est un matériel végétal très adapté pour démontrer le rôle
des facteurs de croissance dans l’organogénèse, en effet le taux d’hormones
endogènes est très faible dans les feuilles. Il est possible, sur un
milieu adéquat, de régénérer un plant à partir d’un explant de feuille.
Un plant de tabac stérile est absolument nécessaire à la réalisation
de l’expérience.
Résultats :
- Milieu + Auxines à 1 mg/L : L’explant de tabac va se développer et les
auxines vont induire la croissance de racines.
- Milieu + Auxines à 1 mg/L + Cytokinines à 1mg/L : De la même manière,
l’explant va se développer et les facteurs de croissance vont
induire la formation de cals (amas de cellules indifférenciées).
- Milieu minéral + Cytokinines à 1 mg/L + Auxines à 0,1 mg/L :
Développement de feuilles.
COMPOSITION DU KIT
MATÉRIEL VEGETAL : 3 plants de tabac stériles
MILIEUX :
- 400 ml de milieu minéral (Murashige et Skoog ou MS)
+ Auxines à 1 mg/L
- 400 ml de milieu minéral (MS) + Auxines à 1 mg/L
+ Cytokinines à 1 mg/L
- 400 ml de milieu minéral (MS) + Cytokinines à 1 mg/L
+ Auxines à 0,1 mg/L
Les milieux sont fournis en bouteilles de 400 ml en version
préstérilisée à couler.
Notice technique et pédagogique
CONSERVATION
Milieux 4°C, matériel végétal à température ambiante
DÉLAIS
Commander au moins 1 mois à l’avance.
Préciser la date exacte du TP sur le bon de commande.
Kit complet Réf. TABAC 97,30 €
3 Plants de tabac stériles Réf. TAB3 53,70 €
OPTION : 75 Boîtes de pétri stériles diamètre 90mm
KIT CAROTTE
MANIPULATION PROPOSÉE
Désinfection des carottes. Découpe du méristème cambial en conditions stériles. Mise en culture sur milieu minéral (Gamborg B-5).
Obtention de cals. Cette étape peut être supprimée en commandant des cals de carottes.
Prélèvement des cals obtenus en conditions stériles et ensemencement sur deux milieux :
- Milieu + Auxines à 1 mg/L. - Milieu + Auxines à 1 mg/L + Cytokinine à 1mg/L.
Durée de la culture : 1 mois à 1 mois et demi pour l’obtention des cals puis 1 mois et demi pour l’action des facteurs de croissance.
RÉSULTATS OBTENUS
Contrairement au tabac, le taux d’hormones endogènes dans la carotte est important, il est donc nécessaire, afin de montrer le rôle
des facteurs de croissance, de repasser par un stade cellulaire indifférencié (cal). C’est la raison pour laquelle la manipulation se déroule
en deux étapes. En revanche, le matériel végétal nécessaire est une simple carotte que l’on stérilise.
Résultats : Au bout d’un mois et demi, de jolis cals sont présents sur l’explant de carotte. Ces cals sont prélevés et ensemencés sur
les deux milieux cités ci-dessous.
- Milieu + Auxines à 1 mg/L : Développement de racines (rhizogénèse).
- Milieu + Auxines à 1 mg/L + Cytokinine à 1mg/L: Multiplication des cals.
CALS
CONSERVATION
Milieux 4°C
Matériel végétal à température ambiante
DÉLAIS
Commander au moins 1 mois à l’avance.
Préciser la date exacte du TP sur le bon de
commande.
COMPOSITION DU KIT
MILIEUX :
- 400 ml de milieu Gamborg + Auxines à 1 mg/L
- 400 ml de milieu Gamborg + Auxines à 1 mg/L
+ Cytokinines à 1 mg/L
- 400 ml de milieu Gamborg
Les milieux sont fournis en bouteilles de 400 ml
pré-stérilisé
Notice technique et pédagogique
Réf.CAROT 40,40 € TTC
OPTION : - Matériel végétal : 4 cals de carotte Réf. CAL4 51,10 € TTC
- 75 Boîtes de pétri stériles diamètre 90mm
Internet : http://www.sordalab.com
email : sordalab@wanadoo.fr
Tél : +33 (0)1.69.92.26.72 Fax : +33 (0)1.69.92.26.74
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