Avaliação da reconstituição imunológica em pacientes com diabete ...

Introdução 8Estudos in vitro mostraram que as células Tregs suprimem respostas de células T CD4 + ou TCD8 + por um mecanismo contato-dependente, mas independente de IL-10 e TGF-β (revisado porShevach, 2000). Foi sugerido que esse mecanismo envolve a sinalização “reversa” pelo crosslinkingde moléculas B7 na superfície de células dendríticas ou de células T, após ligação à CTLA-4 (oreceptor de alta afinidade para as moléculas B7 que é expresso em níveis elevados pelas célulasTregs). Em células dendríticas, o crosslinking das moléculas B7 leva à indução de indoleamine-2,3-dioxygenase (IDO), resultando na depleção local de triptofano (Mellor et al., 2004). Em células T, asconseqüências bioquímicas da ligação das moléculas B7 pelo CTLA-4 expresso nas células Tregssão desconhecidas. Foi mostrado também que, em camundongos e humanos, células Tregs ativadassão capazes de matar células T-alvo pela via dependente da perforina e granzima (Grossman et al.,2004). Em resumo, apesar do acúmulo de informação sobre os mecanismos moleculares da funçãosupressora das células Tregs CD4 + CD25 + , estes ainda não foram totalmente identificados eesclarecidos (revisado por Kronenberg e Rudensky, 2005).Embora a expressão de CD25 venha sendo essencial para o isolamento e enumeração dascélulas Tregs CD4 + CD25 + , seu emprego como um marcador fenotípico de células Tregs CD4 + CD25 +durante respostas imunes é muito limitado, pois células T CD4 + e T CD8 + recém-ativadas, nãoreguladoras,expressam transientemente a molécula CD25. A busca por um marcador específico decélulas Tregs em camundongos resultou na identificação do fator de transcrição Foxp3, que éexpresso em células Tregs mas não em células T recentemente ativadas. Foi mostrado que ascélulas Tregs CD4 + CD25 + expressam especificamente o gene regulador Foxp3, que codifica um fatorde transcrição chamado de forkhead transcription factor 3, que controla seu desenvolvimento efunção (Hori et al., 2003; Fontenot et al., 2003; Khattri et al., 2003). A expressão retroviral do geneFoxp3 em células T periféricas CD4 - CD25 + de camundongos ou humanos resultou na aquisição dafunção supressora por essas células. Portanto, a expressão de Foxp3 pode ser usada como ummarcador molecular específico para células Tregs CD4 + CD25 + (revisado por Kronenberg e Rudensky,2005).Alguns anos antes da identificação do Foxp3 como marcador específico de células Tregs,mutações no gene Foxp3 (localizado no cromossomo X) tinham sido identificadas como causa deuma desordem auto-imune fatal observada em pacientes (denominada IPEX, immune dysregulation,polyendocrinopathy, enteropathy, X-linked syndrome) e em camundongos mutantes que desenvolvem