Revista Analytica Edição 112

Microbiologia
COMPLEXO BURKHOLDERIA CEPACIA
Por Claudio Kiyoshi Hirai
Introdução
Nos anos de 2019 e 2020 tivemos a notícia de
recall de alguns produtos farmacêuticos devido a
uma possível contaminação microbiana.
Os microrganismos responsáveis pela contaminação
foram a Burkholderia cepacia e a Ralstonia
pickettii sendo que este último microrganismo
foi abordado no artigo anterior.
Ambas as espécies compartilham certas características
relevantes, desde a sua capacidade de
proliferar em ambientes úmidos além de diversas
fontes de água e pela capacidade de infectar pacientes
imunocomprometidos.
Anteriormente eram classificados como pertencentes
ao gênero Pseudomonas, sendo que a B.
cepacia era conhecida como Pseudomonas cepacia
e a R. pickettii era conhecida como a Pseudomonas
pickettii, sendo depois classificado como
Burkholderia pickettii e agora classificado como
Ralstonia pickettii.
Este artigo analisa brevemente o complexo de
Burkholderia cepacia e o risco que ele representa
para pacientes vulneráveis, antes de discutir os
métodos de teste e a qualificação do método.
Na prática médica, esses microrganismos aparecem
com maior frequência em pacientes com
fibrose cística devido a capacidade destes microrganismos
em formar biofilmes.
O primeiro passo na formação do biofilme é a
adesão das bactérias à uma superfície e ocorre
de forma aleatória. Esta primeira adesão é reversível
e é mantida por interações físico-químicas
não específicas constituindo o alicerce
para o crescimento do biofilme a segunda fase
da adesão consiste na transição do estágio reversível
para o irreversível as bactérias passam
a secretar substâncias que serão responsáveis
pela manutenção da adesão e da camada que
envolve o biofilme. Nesta fase há o início da formação
de microcolônias e do desenvolvimento
da arquitetura do biofilme maduro. Os biofilmes
maduros apresentam estrutura semelhante
a cogumelos, que são envoltos por diversas
substâncias, principalmente açúcares e rodeados
por poros e canais de água que funcionam
como um sistema de troca de nutrientes, oxigênio
e metabólitos que precisam ser secretados
para fora do biofilme A quinta e última fase da
formação do biofilme ocorre quando o ambiente
não é mais favorável à sua manutenção, e
consiste no descolamento do biofilme maduro
em forma de agregados celulares ou células
livres Após desprendidas, as bactérias livres
podem colonizar novos ambientes, reiniciando
a formação de novos biofilmes.
Os biofilmes não estão presentes somente nos
dentes. Qualquer bactéria pode formar biofilme,
inclusive dentro de nosso organismo. Eliminar
colônias de biofilmes em seres humanos é quase
impossível, porém eliminar os mesmos microrganismos
em tubulação de água das indústrias
farmacêuticas, cosméticas é mais factível.
O F.D.A. recentemente alertou sobre a necessidade
de se testar a presença deste microrganismo
no ambiente, na água e nas matérias primas e
produtos acabados devido a uma série de recalls
envolvendo o complexo BCC.
No centro dessa discussão está o novo método
oficializado pela Farmacopeia Americana (USP 43)
A Burokholderia cepacia, tem o potencial de crescer
em conservantes e antissépticos, e crescer em
produtos líquidos orais e tópicos.
O capítulo tem o objetivo de estabelecer se uma
matéria prima ou produto atende com uma especificação
para a ausência do microrganismo,
especialmente aqueles para uso em inalação, uso
oral, mucosa oral, cutânea, ou nasal para os pacientes
de alto risco.
Conforme a proposição deve-se realizar testes de
promoção de crescimento com as seguintes cepas;
Burkholderia cepacia ATCC 25416, Burkholderia
cenocepacia ATCC BAA-245, Burkholderia multivorans
ATCC BAA-247, Staphylococcus aureus ATCC
6538 e a Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027.
As amostras diluídas devem ser inoculadas em
Caldo de Soja Caseína e a seleção e subcultura
devem ser semeadas em Burkholderia cepacia
seletive agar e incubados a 30-35°C durante 18
a 72 horas. A presença da Burkholderia é evidenciada
pelo crescimento de colônias verde a marro
com halo amarelado ou de colônias brancas com
uma zona rosa avermelhada no meio de cultura,
que devem ser confirmados por meios bioquímicos.
A ausência do microrganismo ´confirmada
pelo não crescimento ou os testes confirmatórios
d identificação forem negativos.
Referências Bibliográficas:
Farmacopeia dos Estados Unidos da América, USP 43 (60) MICRO-
BIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS TESTS FOR
BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX
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Revista Analytica | Maio 2021
Claudio Kiyoshi Hirai
Farmacêutico bioquímico, diretor científico da BCQ consultoria e qualidade, membro da American Society of Microbiology e membro
do CTT de microbiologia da Farmacopeia Brasileira.
Telefone: 11 5539 6719 - E-mail: técnica@bcq.com.br