оглавление - Медицина и Просвещение

ИНТОКСИКАЦИЯ ОПИАТНЫМИ НАРКОТИКАМИ ПРИ ГЕНЕТИЧЕСКОМПОЛИМОРФИЗМЕ ЦИТОКИНОВ: ОСЛОЖНЕНИЯ И ПРИЧИНЫ СМЕРТИСведения об имевшейся наркотической зависимостив 35 наблюдениях были получены из амбулаторныхкарт, в 48 случаях – в беседе с родственникамии близкими товарищами умерших, а такжеиз материалов уголовных дел и протоколов осмотратрупа на месте происшествия.В преобладающем большинстве случаев аутопсиюпроводили в сроки до 24 часов после наступлениясмерти. Макроскопическое исследование проводилис применением традиционных секционных методик.Полученные на вскрытии образцы органов и тканей(30-40 для каждого наблюдения) заливали в парафин,парафиновые срезы окрашивали гематоксилиноми эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону, выборочнопроводили ШИК-реакцию.Молекулярно-генетический метод:Из всего массива случаев нами была выделенагруппа лиц количеством 130 человек, давность наступлениясмерти которых на момент осмотра трупав морге не превышала 12 часов. Также была сформированагруппа контроля – субъекты до 35 лет,погибшие в результате насильственной смерти, безпризнаков употребления наркотических веществ внутривенно– 100 человек, давность наступления смертикоторых на момент осмотра трупа в морге такжене превышала 12 часов. В обеих группах проводилсязабор крови (10 мл) с антикоагулянтом и последующимполучением взвеси лейкоцитов, из которыхвыделяли ДНК методом перхлоратной экстракциис этанольным содержанием. Исследование полиморфизмагенов ИЛ-1β проводили и с помощью полимеразнойцепной реакции (аллель специфичная ПЦРи ПДРФ анализ). Использованы олигонуклеотидныепраймеры, синтезированные в институте химическойбиологии и фундаментальной медицины СО РАН(г. Новосибирск).Амплификацию проводили в буфере, содержащем10 мМТрис-HCl (pH 8,9), 50 мМKCl, 1,7 мМMgCl,0,05 % Tween 20, с добавлением 0,2 мМ-ого раствораdNTP, 0,5 мкМ-ого раствора праймеров, 20 нгДНК и 1,0 ед. акт. Taq-ДНК-полимеразы. Реакционнуюсмесь в объеме 20 мкл покрывали 40 мкл минеральногомасла. ПЦР проводили на амплификаторе«Терцик».Анализ рестрикционных смесей проводилис помощью электрофореза в 3 %-магарозном геле с бромистым этидием.Результаты исследований были cтатистическиобработаны при помощи угловогопреобразования Фишера и χ 2 . Статистическидостоверными считали различияпри р < 0,05. Программа статистическойобработки – Microsoft Windows XPSPII, Microsoft Office 2003, программаSchool 3 530761, организация OmGMA, номерлицензии Standard Enrollment 8800967.Частоты встречаемости аллелей генов ИЛ-1β в исследуемойи контрольной группах соответствовали законураспределения Харди-Вайнберга.РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕГены, кодирующие ИЛ-1β и ИЛ-1Rа, кластеризуютсяна длинном плече хромосомы 2. Генетическийполиморфизм найден в обоих генах. Для нуклеотиднойзамены С+3953Т в 5 экзоне ИЛ-1β и VNTRповтора во втором интроне ИЛ-1Rа гена (VNTR-intr2)доказана связь различных аллелей с продукцией соответствующихцитокинов.Аллель Т полиморфного локуса С+3953Т большинствоисследователей связывают с повышеннойпродукцией ИЛ-1β и, соответственно, с предрасположенностьюк развитию воспалительных заболеваний.Полученные нами данные по генотипированиюточечной нуклеотидной замены С+3953Т ИЛ-1β представленыв таблице 1. Статистически значимые различиянаблюдаются для гомозигот по аллелю Т, которыевстречаются чаще в исследуемой группе (χ 2 ,р = 0,025).В гене ИЛ-1Rа существует полиморфизм в интроне2 в результате присутствия различного количестватандемных повторов с длиной 86 п.н. В настоящиймомент описано 5 аллелей, которые обозначаются как2R, 3R, 4R, 5R и 6R, в соответствии с числом тандемныхповторов. Наиболее часто в человеческой популяциивстречаются аллели 2R и 4R. Остальные аллеливстречаются с частотой не более 2 %. С аллелем2R связано повышение базального уровня ИЛ-1Rа,а также увеличение продукции ИЛ-1β стимулированнымимоноцитами [6]. Данный аллель ассоциированс различными воспалительными и иммунозависимымизаболеваниями и т.д. [7].При изучении полиморфного локуса VNTR-intr2гена ИЛ-1Rа нами были выявлены два аллеля с 2,4 тандемными повторами. Наиболее высокая частотавстречаемости в обеих группах была у аллеля 4R,что соответствует общепопуляционной закономерности.Аллель 2R, который зарекомендовал себя как маркервоспалительных заболеваний, встречался болеечасто в исследуемой нами группе, чем в группе кон-Таблица 1Частота встречаемости генотипов полиморфного локуса С+3953ТИЛ-1β в группах лиц, употреблявших наркотики, и контролеГенотипС/СС/ТТ/ТЛица, погибшиепри употреблениинаркотиков, n = 93Количество(шт.)463710Частотавстречаемости0,490,400,11Контроль, n = 100Количество(шт.)61372Частотавстречаемости0,610,370,02Уровеньстатистическойзначимостиразличия (Р)> 0,05> 0,05< 0,05Сведения об авторах:СОРОКИНА Вероника Владимировна, канд. мед. наук, доцент, кафедра судебной медицины с курсом правоведения, ГБОУ ВПО «ОмГМА»Минздравсоцразвития России, г. Омск, Россия. E-mail: vpkonev@mail.ru4 T. 11 № 2 2012