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A<br />

B<br />

Abb. 3: Auswirkungen der Blockierung des Ca 2+ -Austausches auf die Nekrose<br />

Nekrose. CGP hatte keinen Einfluß auf den<br />

prozentualen Anteil von durch A23187 depolarisierten<br />

CEM (Abb. 3B). Wie zu erwarten,<br />

leitete A23187 in Jurkat-Zellen weder eine<br />

mitochondriale Depolarisierung noch die<br />

Nekrose ein, und auch eine Präinkubation<br />

mit CGP in verschiedenen Konzentrationen<br />

hatte keinen Einfluß auf diese Zellen.<br />

Schlußfolgerung<br />

Die drei hämotopoetischen Zellinien reagieren<br />

unterschiedlich auf die Veränderungen der<br />

intrazellulären Kalziumkonzentration, wobei<br />

zwei davon die Apoptose durchlaufen und<br />

die dritte nekrotisiert. Diese Nekrose tritt ohne<br />

meßbare Veränderung des mitochondrialen<br />

Membranpotentials ein. Anders als zuvor<br />

berichtet, konnte jedoch in CEM-Zellen durch<br />

das Blockieren des Natrium-und Kalziumaustausches<br />

in der Mitochondrienmembran<br />

mit A23187 das Einsetzen der Nekrose nicht<br />

verhindert werden.<br />

Der Guava MitoPotential-Assay bietet eine<br />

Möglichkeit, zelluläre Ereignisse, die zur<br />

Veränderungen des mitochondrialen Membranpotentials,<br />

zum Zelltod und/oder zur<br />

Apoptose führen, zu unterscheiden. In Kombination<br />

mit dem MitoPotential-Assay können<br />

der Guava Nexin- and der Caspase 3/7-Assay<br />

schnell und effektiv dokumentieren, ob Zellen<br />

A<br />

in Apoptose oder Nekrose übergegangen sind<br />

und Details über die damit verbundenen Mechanismen<br />

liefern.<br />

Literatur<br />

[1] Wyllie AH. Br J Cancer. 1993; 67:205.<br />

[2] Majno G, Joris I. Am J Pathol. 1995; 146:3.<br />

[3] Rudin CM, Thompson CB. Ann Rev Med. 1997; 48:267.<br />

[4] alvesen GS, Dixit VM. Cell. 1997; 91:443.<br />

[5] Fiers et al. Oncogene 1999; 18:7719.<br />

[6] Hamahata et al. Eur. J. Pharmacol. 2005; 516:187<br />

[7] Tait JF et al. J Biol Chem. 1989; 264:7944.<br />

[8] Schmidt I et al. Cytometry. 1992; 13:204.<br />

[9] Ly JD et al. Apoptosis. 2003; 8:115.<br />

[10] Gollapudi S et al. Int J. Oncology. 2003; 22:597.<br />

[11] Reers M et al. Methods Enzymol. 1995; 260:406.<br />

Korrespondenzadresse<br />

Dianne M. Fishwild, Ph.D.<br />

Guava Technologies, Inc.<br />

25801 Industrial Boulevard, Hayward, CA 94545<br />

Tel./Fax: +1-(0)510-576-1400/-1500<br />

Dr. Michael Liebler<br />

RSM Germany<br />

Tel: +49-1717282932<br />

eMail: Mliebler@guavatechnologies.com<br />

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LABORWELT 7. Jahrgang | Nr. 2/2005 | 9<br />

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