500nm - TOBIAS-lib - Universität Tübingen

2.2.9 Schaumzellkultivierung
MATERIAL UND METHODEN
Zunächst waren Monozyten wie beschrieben zu isolieren (siehe 2.2.2).
Allerdings war es nicht notwendig, diese in adhärenter Form nach nächtlicher
Inkubation von den 6-Loch-Platten zu lösen. Vielmehr konnte nach Abnehmen
des Mediums und zweimaligem Waschen mit PBS direkt speziell hergestelltes
Schaumzellmedium (siehe 2.1.4) hinzu gegeben werden.
Nach einwöchiger Inkubation in Schaumzellmedium hatten sich die Monozyten
zu Makrophagen differenziert, was mikroskopisch überprüft wurde. Danach
erfolgte ein Mediumwechsel und dem neu zugegebenen Schaumzellmedium
wurden 80 μg/ml acetyliertes LDL zugegeben. Nach weiteren drei Tagen
erfolgte eine mikroskopische Kontrolle der erfolgreichen monozytären
Differenzierung zu Schaumzellen.
Abbildung 9 Aus Monozyten kultivierte Schaumzellen: Makrophagen monozytären
Ursprungs können sich durch Aufnahme von acetyliertem LDL
innerhalb weniger Tage zu Schaumzellen differenzieren. Dargestellt ist ein
repräsentatives lichtmikroskopisches Bild ausdifferenzierter Schaumzellen bei
20-facher Vergrößerung.
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