500nm - TOBIAS-lib - Universität Tübingen

ERGEBNISSE
3.4 Rekombinantes Glykoprotein VI bindet spezifisch an immobilisiertes
EMMPRIN
Mit Hilfe eines wie im Abschnitt „Material und Methoden“ beschrieben
hergestellten modifizierten ELISAs sollte nachgewiesen werden, dass den
beobachteten Wechselwirkungen zwischen EMMPRIN und Glykoprotein VI eine
direkte Interaktion zugrunde liegt. Hierzu wurde das Bindungsverhalten von
gelöstem rekombinantem Digoxigenin-gefärbtem GPVI-Fc an immobilisiertes
EMMPRIN-Fc untersucht.
Dabei zeigte sich eine konzentrationsabhängige spezifische Bindung von GPVI
an EMMPRIN bis zu einer Konzentration von 170 nM, was sehr dafür spricht,
dass dem beschriebenen Mechanismus der Aufregulation thrombozytären
Rollings eine direkte Interaktion zwischen GPVI und EMMPRIN zugrunde liegen
könnte.
Abbildung 14 Rekombinantes GPVI-Fc bindet spezifisch an immobilisertes
EMMPRIN-Fc: Die ELISA-Platte wurden mit 250 nM EMMPRIN-Fc oder Fc-
Kontrollprotein beschichtet. Nach Waschen und Blockieren der Platte wurden
verschiedene Konzentrationen von Digoxigenin-gefärbtem GPVI-Fc oder
Kontroll-Fc zugegeben. Die Absorptionsmessung wurde bei einer Wellenlänge
von 450 nm durchgeführt. Die Referenzwellenlänge betrug 690 nm.
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