2010 年度结题项目汇编 - 国家自然科学基金委员会医学科学部

3 科 学 仪 器 专 项3.1 高 通 量 相 位 检 测 生 物 分 子 相 互 作 用 分 析 仪 的 研 制项 目 批 准 号 :30727001项 目 负 责 人 : 余 兴 龙依 托 单 位 :清 华 大 学采 用 新 颖 的 SPR 双 分 差 动 干 涉 成 像 法 , 研 制 了 高 通 量 和 高 精 度 的 生 物 分 子 相 互 作 用 分析 仪 。 在 理 论 研 究 的 基 础 上 , 曾 先 后 构 建 了 基 于 电 光 调 制 和 机 械 转 换 波 片 SPR 干 涉 成 像 系统 , 发 明 了 变 曝 光 时 间 图 像 采 集 法 提 高 检 测 灵 敏 度 技 术 , 实 验 结 果 表 明 未 能 满 足 阵 列 检 测 的要 求 。 针 对 发 现 的 技 术 难 题 , 提 出 了 SPR 双 分 差 动 干 涉 成 像 法 , 在 阐 明 其 理 论 后 , 研 制 了阵 列 检 测 系 统 。 该 系 统 可 同 时 获 取 2 帧 相 位 差 为 180º 的 传 感 表 面 的 干 涉 图 像 , 解 算 后 得 到 反映 生 物 分 子 相 互 作 用 的 折 射 率 相 关 因 子 A, 可 解 析 出 生 物 分 子 相 互 作 用 的 特 征 信 息 。 系 统 的性 能 测 试 结 果 表 明 , 检 测 范 围 为 1.33-1.40, 高 低 通 量 检 测 的 灵 敏 度 分 别 为 8.5 和 2RU, 高 通量 检 测 重 复 性 优 于 0.05RU。 同 时 , 开 发 了 多 种 高 亲 和 芯 片 , 建 立 了 质 控 金 膜 厚 度 和 高 密 度点 样 方 法 , 制 备 了 100 点 和 421 点 蛋 白 质 芯 片 , 结 果 表 明 检 测 通 量 大 于 400 点 。 利 用 3 种 适 配体 , 分 别 与 BIAcore3000 进 行 对 比 检 测 , 两 者 的 数 据 具 有 较 好 的 平 行 性 。 测 试 与 实 验 结 果 表明 , 所 研 制 系 统 的 各 项 参 数 都 达 到 了 申 请 书 中 预 期 的 指 标 , 部 分 优 于 。 该 项 目 发 挥 跨 学 科的 交 叉 优 势 , 取 得 了 创 新 性 成 果 , 申 报 发 明 专 利 8 项 , 发 表 论 文 18 篇 , 圆 满 完 满 完 成 了 计 划 。关 键 词 : 表 面 等 离 子 体 共 振 ; 双 分 差 动 干 涉 成 像 ; 相 位 检 测 ; 生 物 分 子 相 互 作 用 ; 蛋 白质 芯 片学 科 代 码 :H1812发 表 论 著 :(* 为 通 讯 作 者 )1. Liu FF, Luo ZF, Ding X, Zhu SG, Yu XL*. Phage-displayed protein chip based onSPR sensing. SENSORS AND ACTUATORS B-CHEMICAL,2009,136(1):133-137.(IF=3.083)2. 定 翔 , 刘 芳 芳 , 魏 星 , 等 . 空 间 相 位 调 制 表 面 等 离 子 体 共 振 检 测 蛋 白 质 芯 片 . 清 华 大 学 学报 ,2008, 48(5):792-795.3. 刘 芳 芳 , 罗 昭 锋 , 定 翔 , 等 . 噬 菌 体 展 示 蛋 白 质 芯 片 的 无 标 记 检 测 . 清 华 大 学 学 报 ,2008,48(11):1135-1139.4. 余 兴 龙 , 闫 硕 , 定 翔 , 等 . 基 于 SPR 传 感 的 空 间 相 位 调 制 蛋 白 质 芯 片 检 测 方 法 . 仪 器 仪 表 学报 ,2009, 30(6):1134-1139.5. 欧 惠 超 , 姜 浩 , 周 宏 敏 , 等 . 五 种 SPR 传 感 芯 片 的 再 生 制 备 及 其 应 用 . 中 国 生 物 工 程 杂 志 ,2009, 29(1):44-49.25