Monitoring_Lynx-lynx-carpathicus

4. Posudzovanie zdravotného stavu a genetika / Health screening and genetics________________________________________________________________________________________Posudzovanie genetického zdravia rysa na SlovenskuCHRISTINE BREITENMOSER-WÜRSTEN & GABRIELA OBEXER-RUFFKORA, Thunstrasse 31, CH 3074 Muri (Bern), Švajčiarsko; ch.breitenmoser@kora.chMonitoring populácie by nemal zahŕňať lenperiodické hodnotenie počtov, abundanciea distribúcie, ale aj zdravotný stav a genetiku.Z tohto dôvodu bol v rámci projektu Spolužities karpatskými prízrakmi zahrnutý aj monitoringtýchto dvoch parametrov.Populácia rysa na Slovensku bola zdrojom preprojekty reštitúcie v strednej a západnej Európev 70-tych a 80-tych rokoch 20. storočia.V súčasnosti viaceré z týchto populácií potrebujúgenetické posilnenie, keďže „inbreeding“(príbuzenské kríženie) sa stal dôležitýmproblémom. Najideálnejšie by malo byť totoposilnenie zrealizované s rysmi z Karpát, pretožetieto sú považované za rozdielnu manažmentovújednotku. Pred tým, ako budú translokované ďalšiezvieratá, je však dôležité pochopenie súčasnéhostavu.V tejto správe prezentujeme výsledkygenetických analýz 11 vzoriek zozbieraných počasrealizácie projektu v rokoch 2013–2014 (perióda 2)a porovnávame ich s 31 vzorkami z rokov 1999–2001 (perióda 1). Naše otázky boli: 1) Aký je stavgenetickej variability v porovnaní s hodnotamispred 12–14 rokov? 2) Vykazuje populáciaakékoľvek znaky genetického bottleneckuz minulosti? 3) Je možné pozorovať v súčasnýchvzorkách znaky genetického driftu, ktoré mohli byťspôsobené fragmentáciou?Tieto dve sady vzoriek, okrem odpovedí nauvedené otázky, poskytnú základ pre ďalšígenetický monitoring rysa na Slovensku.MetódyV rámci projektu genetiky rysa s názvomPopulačná a manažmentová genetika dvochreštituovaných populácií rysa (Lynx lynx) voŠvajčiarsku – molekulárne hodnotenie po 30 rokochod translokácie (Population and conservationgenetics of two re-introduced lynx (Lynx lynx)populations in Switzerland – a molecularevaluation 30 years after translocation) bolavyvinutá sada 20 mikrosatelitov na hodnoteniegenetickej variability a štruktúry populácie v rámcicelej Európy. Pre posúdenie vplyvu umelovytvorených bottlenecks v reštituovanýchpopuláciách sme analyzovali vzorky z 8autochtónnych a 5 reštituovaných populácií(Breitenmoser-Würsten & Obexer-Ruff 2003).Určené mikrosatelity nám umožnili analyzovať ajvzorky zozbierané počas projektu Spolužities karpatskými prízrakmi s relatívne malým úsilímako ich aj porovnať so súborom zozbieraným pred12 rokmi.Extrakcia: Použili sme Roche Diagnostics® HighPure PCR Template Preparation Kit pre extrakciu.Amplifikácia PCR bola vykonávaná v PE 9600termocykléri na základe protokolu Menotti-Raymond & O´Brien (1995). Amplifikovanéfragmenty boli zaznamenávané s použitímkapilárnej ABI Prism® 3700 Genetic Analyzer.Určovanie alel bolo vykonané v softvériGeneMapper 4.0 (Applied Biosystems, LifeTechnologies, Carlsbad, California, USA).Štatistika: Pre analýzu genetickej variability(heterozygotnosť a počet alel/lokus), ako ajdeferenciácie (Fst) medzi dvoma časovýmiperiódami sme použili program GENTIX (Belkhir etal. 1996–2004). Pre príbuznosť v populácie smepoužili SPAGeDi (Hardy & Vekemans 2002) a rkoeficient Wang (2002). Pre posúdenie či populáciavykazuje znaky predchádzajúceho bottlenecku smepoužili BOTTLENECK (Piry et al. 1999) a prístupLukart & Cornuet (1998).________________________________________________________________________________________Monitoring Lynx lynx carpathicus, Rigg & Kubala (2015) 72