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66 Zuchtanleitung für die Beimpfung von Fruchtungssubstraten (Kompost, Stroh, Holz – je nach Pilzsorte). Verwenden Sie – abhängig von Pilzsorte und Substrat - 2 bis 10 % Körnerbrut auf das Substratgewicht gerechnet. Mit fertig besiedelter Körnerbrut kann, um mehr Impfmaterial zu erhalten, auch weiteres sterilisiertes Roggensubstrat beimpft werden. Verwenden Sie 10% Körnerbrut gerechnet auf das Gewicht des frischen Roggensubstrates. Bei diesem Arbeitsschritt muss genauso steril und sauber wie beim Beimpfen von Körnerbrut mit Myzel gearbeitet werden. Öffnen Sie die Gläser/Substratsäcke mit sterilisiertem Roggensubstrat. Damit man einzelne bewachsene Körner aus der fertig besiedelten Brut erhält, wird diese mehrfach sanft aufgeschüttelt. Das frische Roggensubstrat kann nun mit den fertig besiedelten Körnern beimpft werden. Verschließen Sie den Substratsack mit einem Schweißgerät oder einem Klebeband. Schütteln Sie nun die beimpften Gläser/Säcke gut durch, damit sich die besiedelten unter die unbesiedelten Teile mischen. Zum Durchwachsen wird der Sack stehend mit dem Filter nach oben an einem sauberen, dunklen Ort bei der für die jeweilige Pilzgattung empfohlenen Temperatur gelagert. Für genügend Frischluft im Brutraum oder -kasten muss gesorgt werden. mrca-science.org.: „BEIMPFEN VON KÖRNERBRUT MIT MYZEL AUF AGAR-NÄHRBODEN“ In: mrca-science. Stand: 15. Januar 2018. http://mrca-science.org/index.php/de/pilzzucht-fuer-jedermann/43-zuchtanleitungen/68-beimpfen-von-koernerbrut-mit-myzel-auf-agar-naehrboden Fig. 20, 21, 22 S. 72, 73, 74, 75, 76, 77 25 Sterilisieren von Holzsubstraten Holzchips Sägemehl grob (passende Baum- zur Pilzart beachten) Gips Roggenkleie Wasser Autoklav-Bags Unicorn Typ 14 # Waage Schweißgerät oder Klebeband Sieb Behälter zum Mischen Dampfdruckkochtopf Die Holzchips werden über Nacht (ca. 12-18 Stunden) in kaltem Wasser eingeweicht. Bitte so viel Wasser eingießen, bis alle Chips schwimmen. Am nächsten Tag abseihen und ca. 15 Minuten lang abtropfen lassen. In einem Behältnis werden nun alle trockenen Zutaten (Sägemehl, Roggenkleie und Gips) gut vermischt. Danach die feuchten Holzchips unterrühren und zum Schluss das Wasser einarbeiten. Für die Füllung eines Autoklav-Bags (bitte original Unicorn Bags Typ 14 # für Holzsubstrate verwenden!) benötigen Sie 368 g Holzchips, 735 g Sägemehl grob, 31 g Gips, 200 g Roggenkleie und 950 ml Wasser. Diese Mischung ergibt rund 2,5 kg Substrat. Sterilisationszeit: 3-4 Stunden bei 121°C / 250°F / 15 psi (poundforce per square inch) / 1,05 bar Krempeln Sie das Autoklav-Bag ca. 10 cm um und füllen Sie 2,5 kg der fertigen Mischung ein. Achten Sie darauf, dass der obere Bereich des Sackes beim Befüllen nicht mit Substrat beschmiert wird (eventuell mit einem feuchten Tuch reinigen). Jetzt klappen Sie den Sack 2 Mal ein.
Zuchtanleitung 67 Zum Sterilisieren empfehlen wir einen Druckkochtopf, in welchen man ca. 2-3 cm hochWasser einfüllt und eine Ablage einsetzt (bitte Produktinformationen des Topfherstellers beachten!). Dann werden die Säcke eingeschlichtet. Sie dürfen nicht schwimmen - gegebenenfalls etwas Wasser abgießen. Ist der Topf groß genug, kann eine zweite Ebene gemacht werden. Verwenden Sie bitte eine Zwischenablage und schichten Sie die Säcke versetzt übereinander. Dadurch kann sich der Dampf gleichmäßiger verteilen. Das Ablassventil des Topfes ist so lange offen zu halten, bis feuchter sichtbarer Dampf austritt. Jetzt wird das Ventil geschlossen und der Topf kann auf Druck gehen. Erst ab dem Zeitpunkt, an dem die Druckanzeige des Topfes die höchste Stufe (bei Haushalts-Druckkochtöpfen) oder 121°C / 250°F / 15 psi / 1,05 bar (bei professionellen Töpfen) erreicht hat, wird die Sterilisationszeit gemessen. Nach Ablauf der Sterilisationszeit wird der Topf zum Auskühlen an einen sauberen Ort, am besten vor einen HEPA-Filter (steriler Luftstrom) gestellt. Während des Abkühlens kann ein mit Alkohol oder 10%-iger Chlorlösung getränktes Tuch über den Topf gelegt werden, das die in den Topf hineinströmende Luft filtert Erst wenn der Druck im Topf auf null gefallen ist, wird der Deckel geöffnet. Sollte der Druck im Topf unter null fallen, ist das mit Alkohol oder 10%-iger Chlorlösung getränkte Tuch auf das Eingangsventil zu legen – der Unterdruck führt dazu, dass unsterile Luft in den Topf hineingesogen wird. Durch das Tuch wird die Luft noch einmal gefiltert und verringert das Kontaminationsrisiko. Bitte Hände und Unterarme gründlich reinigen und desinfizieren, eventuell Latexhandschuhe verwenden. Die Gläser und Deckel werden an einen sauberen Ort, vor einen HEPA–Filter oder in das Glove-Bag gestellt, bis sie abgekühlt sind. Sobald sie auf Raumtemperatur (unter 30°C) abgekühlt sind, können diese weiterverarbeitet werden. Nach Ablauf der Sterilisationszeit wird der Topf zum Auskühlen an einen sauberen Ort, am besten vor einen HEPA-Filter (steriler Luftstrom) gestellt. Während des Abkühlens kann ein feuchtes, sauberes Tuch über den Topf gelegt werden, das die in den Topf hineinströmende Luft filtert. Wenn der Druck vollkommen ausgeglichen ist, wird der Deckel geöffnet. Bitte Hände und Unterarme gründlich reinigen und desinfizieren, eventuell Latexhandschuhe verwenden. Die Säcke werden an einen sauberen Ort vor einem HEPA–Filter oder in die Glove-Box gestellt, bis sie abgekühlt sind. Sobald das ganze frisch sterilisierte Substrat auf Zimmertemperatur (unter 30°C) abgekühlt ist, kann es beimpft werden. Wenn das Substrat nicht sofort verwendet wird, kann es im Kühlschrank (+ 2 bis + 4°C) gelagert werden. Bitte die Säcke vorher gut verschließen und innerhalb von 4 Wochen verarbeiten. mrca-science.org.: „STERILISIEREN VON HOLZSUBSTRATEN“ In: mrca-science. Stand: 15. Januar 2018. http://mrca-science.org/index.php/de/pilzzucht-fuer-jedermann/43-zuchtanleitungen/65-sterilisieren-von-holzsubstraten Fig. 23 S. 78
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